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猪瘟在我省时有暴发 ,对养猪业威胁很大 ,因此做好猪瘟监测工作对预防和控制猪瘟的流行具有重要意义。猪瘟单克隆抗体诊断新技术能识别猪瘟强毒抗体和猪瘟弱毒 (疫苗 )抗体 ,又能排除牛病毒性腹泻病毒 (ＢＶＤＶ)和绵羊边界病病毒(ＢＤＶ)所产生的非特异性抗体。因此 ,它即可用于猪瘟免疫监测又可用于猪瘟病的诊断。 1998年以来 ,我们应用该技术在猪瘟免疫监测和诊断方面做了一此推广工作 ,取得了良好的效果。现报告如下。1 材料与方法1.1 材料 猪瘟单克隆抗体试剂 ,购自北京中国兽药监察所 ,置- 2 0℃以下冰箱保存 ;猪血清样本 ,来自 … 相似文献
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本文报道了我省１９９７年１０月以来，在福州、南平、莆田、泉州等地非典型猪瘟的发生情况，并采用猪瘟单克隆抗体ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒调查了这些猪场猪瘟的感染情况，发现这些猪场的猪瘟感染情况比较了严重。 相似文献
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通过杂交瘤技术制备猪瘟病毒单克隆抗体，对酶联免疫吸附试验筛选的阳性单克隆抗体进行免疫组织化学研究，从中发现1株单克隆抗体能与感染猪瘟病毒的猪肾、肝病理组织切片及PK15细胞产生特异性染色反应，与非感染猪的肾、肝组织切片和PK15细胞无染色反应。单克隆抗体与猪瘟病毒感染的PK15细胞或猪肝、肾小血管内皮细胞中的猪瘟病毒呈现较强的特异性棕色着染，表明该单抗是针对猪瘟病毒的单克隆抗体，对研究猪瘟病毒在宿主细胞中的生命活动和繁殖定位有非常重要的意义。该单抗命名为YNF，培养上清液和腹水的抗体效价分别为1：80和1：10000。抗体蛋白属IgG类，亚类为IgG2／κ。 相似文献
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应用FA及PPA-ELISA技术对猪瘟的检测 总被引：3，自引：0，他引：3
用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术检测了猪瘟血清抗体 ,在 40头母猪血清样品中 ,猪瘟弱毒抗体效价 OD值较高 ,有 1 0 0 %的保护率 ,但是发现母猪群中有 1 0 %隐性猪瘟感染 ,其强毒抗体效价 OD值大于 0 .5,体内带有猪瘟病毒。结果及过程表明此两种诊断方法检测快速、鉴别准确、分辨率高 相似文献
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用猪瘟单克隆抗体监测猪瘟免疫抗体及疫情段荫祥，王建民（天津市畜牧兽医站，天津３００４０２）马志刚（天津市小南河猪场）猪瘟是养猪生产中的重要疫病之一，猪场如何及时发现猪瘟强毒感染，采取紧急措施避免造成严重损失，是养猪生产急待解决的问题。猪瘟单克隆抗体诊... 相似文献
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控制猪瘟的“规模化猪场猪瘟净化技术”课题，是用猪瘟单克隆抗体化酶联免疫吸附试验的技术，查出亚临床猪瘟发病原因和猪瘟野毒感染等情况，制订出净化实施方案和科学免疫程序．采用净化措施，淘汰带病毒猪，组建净化种猪群， 相似文献
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检测非洲猪瘟McAb-ELISA竞争试剂盒的建立及初步应用 总被引：3，自引：0，他引：3
用基因重组技术制备的非洲猪瘟蛋白P54免疫BALB/C小鼠,将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释法进行克隆,获得能稳定分泌抗ASFV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。使用该单克隆抗体,建立了检测血清中非洲猪瘟抗体的竞争法ELISA。实验结果表明：ELISA竞争法特异性高,无交叉反应,灵敏度高于间接免疫荧光法,可用于猪血清的非洲猪瘟抗体检测。该法的建立对非洲猪瘟实验诊断的标准以及流行病学调查具有重要的现实意义。 相似文献
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非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究旨在制备非洲猪瘟病毒（ASFV） S273R蛋白的特异性单克隆抗体。本研究以原核表达的非洲猪瘟病毒重组S273R蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞。结果显示：基于纯化的S273R蛋白建立的间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆,获得了4株可稳定分泌抗ASFV S273R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过免疫印迹（Western blot）和免疫荧光试验（immunofluorescence assay,IFA）测定了其免疫特性。4株单克隆抗体亚类均为IgG1型,轻链均为κ链。本研究获得的非洲猪瘟病毒S373R蛋白单克隆抗体可为进一步研究ASFV pS273R的生物学功能及基因缺失毒株的鉴别诊断和疫苗开发提供技术储备。 相似文献
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《畜牧与兽医》2020,(9)
非洲猪瘟(ASF)传播对我国生猪养殖造成重大危害,开发用于ASF诊断产品已刻不容缓。本研究为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)pK205R蛋白单克隆抗体,构建了能表达ASFV pK205R蛋白的工程菌BL21/pET-pK205R。经IPTG诱导,可表达可溶性的pK205R蛋白。经SDS-PAGE检测,获得的蛋白大小为25 kDa左右。经Western blot鉴定,纯化后的蛋白可与ASFV阳性血清发生特异性反应。以纯化的ASFV pK205R蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备了12株针对ASFV pK205R蛋白的单克隆抗体。经间接ELISA方法鉴定,单克隆抗体的效价均不低于1∶80 000。单克隆抗体重链亚类分别为IgG1及IgG2b,轻链亚类均为κ。通过间接免疫荧光试验(IFA)测定12株单克隆抗体均不与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒存在交叉反应,且均能与ASFV反应。本研究为建立快速检测非洲猪瘟病毒感染的诊断方法奠定了基础。 相似文献
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为了建立一种能够检测非洲猪瘟病毒(ASFV)特异性抗体的单抗阻断ELISA方法，本试验首先构建了非洲猪瘟病毒p30蛋白的原核表达载体，进而制备并筛选出1株能特异性识别p30蛋白的高亲和力单克隆抗体，采用昆虫杆状病毒表达系统Bac-to-Bac进行该单克隆抗体的表达。以p30重组蛋白作为包被抗原，辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体作为阻断抗体建立了一种非洲猪瘟病毒特异性抗体的检测方法，并验证其敏感性、特异性以及与商品化试剂盒的符合率。结果显示，该方法敏感性为100%,特异性为100%,与商品化试剂盒比较，符合率为98.7%。结果表明，本试验基于非洲猪瘟病毒特异性单克隆抗体建立的阻断ELISA方法敏感性好、特异性强，结果准确可靠，可用于非洲猪瘟病毒抗体检测。 相似文献
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抗猪瘟病毒单克隆抗体技术在养猪场的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
王亚鸣 《江西畜牧兽医杂志》1996,(3):42-44
抗猪瘟病毒单克隆抗体技术在养猪场的应用王亚鸣（江西农业大学牧医学院）疫苗接种和血清学检测是控制和消灭猪瘟的两个关键技术，而疫苗接种又必须依赖于血清学检测制定出一个合理的免疫程序。因此猪瘟抗体的检测在现行的养猪场中显得极为重要。国外不少学者对猪瘟抗体水... 相似文献
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应用猪瘟单克隆抗体酶联免疫吸附试验监测进行猪场净化韵洪亮杜慧英史夏云关尧智李玉生李爱民山西省家畜疫病防治站太原０３００２４１９９６年３月初，我省某种猪场发生猪瘟，经过疫情调查，临床观察，尸体剖检，猪瘟荧光抗体检查，消毒隔离和疫苗接种以及历时一年的猪瘟... 相似文献
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采用猪瘟病毒C株毒（CSFV C strain）免疫BALB/C小鼠,按照常规单克隆抗体制作方法构建并筛选出能稳定分泌抗猪瘟单克隆抗体杂交瘤细胞株4株,分别命名为1C9,1B11,3C8和3G9,经鉴定,4株单克隆抗体腹水效价达到104~106。交叉试验及特异性试验表明,所制备的McAb与鸽新城疫病毒、猪蓝耳病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、鸡减蛋综合征病毒无交叉反应性,均完全针对猪瘟病毒（CSFV）抗原决定簇,具有高度特异性。抗CSFV McAb的成功制备,为进一步研究建立CSFV的快速诊断方法奠定了基础。 相似文献