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1.
用3种不同的离心速度提取蛋黄中的低密度脂蛋白(LDL),然后在猪精液冷冻稀释液中添加不同含量的LDL;冻融后的猪精液进行体外受精,观测其体外受精的卵裂率,以探索不同离心速度离心获得的LDL对冻融后猪精子生物学功能的影响。结果表明:以10000 r/min离心速度离心的LDL,其解冻后猪精子的活率、顶体的完整率和质膜完整性显著高于8000 r/min和12000 r/min的(P<0.05),LDL的最佳添加量为9%(P<0.05)。冻融后体外受精的卵裂率达到46.35%,与对照组相比差异显著(P<0.05)。 相似文献
2.
本试验将流式细胞术应用于猪精子分析,同时检测精子功能的多个特性,以保证精子具备多种特性且功能完整,顺利完成授精过程。分别采用SYBR-14/PI（Propidium Iodide）、YO-PRO-1/PI、PNA/PI及Mito Tracker/YO-PRO-1 4种染色方法对荣昌猪精子的质膜完整性、细胞凋亡、顶体完整性及线粒体功能进行了检测和分析;以SYBR-14+/PI-表示质膜完整的活精子,YO-PRO-1-/PI-表示活精子,PNA-/PI-表示未发生顶体反应的活精子,Mito Tracker+/YO-PRO-1-表示线粒体活性高的活精子,以上述检测指标的综合结果判定精子功能的完整性。本试验通过流式细胞术对荣昌猪精子进行质量检测和分析,结果表明,该方法可为临床诊断种猪不孕症提供理论依据,对有效治疗不孕症有重要意义。 相似文献
3.
为了提高猪冷冻精液品质和精子抵抗低温打击的能力,本研究以5%、10%、15%、20%和25%等不同浓度的鸵鸟卵黄作为冷冻保护剂,以20%的鸡蛋卵黄和20%的鸽蛋卵黄为对照,将冷冻-解冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率作为评价指标,分析鸵鸟卵黄对猪精子的抗冷冻保护作用。结果表明：稀释液中添加20%鸽蛋卵黄时,精子活率、顶体完整率和质膜完整性分别为52.11%、55.62%和54.94%,显著高于其他组（P〈0.05）。虽然稀释液中添加15%鸵鸟卵黄时,冷冻-解冻后精子活率、顶体完整率和质膜完整率显著高于5%、10%、20%和25%鸵鸟卵黄组,但仍然显著低于稀释液中添加20%鸽蛋卵黄处理组。本研究表明,鸵鸟卵黄在冷冻过程中对猪精子具有一定的保护作用,但相对于鸽子蛋和鸡蛋卵黄效果并不理想。 相似文献
4.
在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。 相似文献
5.
试验旨在探究不同pH的弱酸性环境常温稀释液对于猪精液常温保存的影响。通过测定不同pH（PH为6．2、6．3、6．4、6．5、6．6、6．7）的稀释液条件下猪精子的活率、质膜完整率和顶体完整性来检测对猪精液的保存效果。结果表明,稀释48h后,pH为6．4和6．5的稀释液中精子活率、质膜完整性和顶体完整性都分别出现降低,明显低于对照组（P〈0．05）。pH为6．2时,稀释液中精子的活率、质膜完整性和顶体完整性显著降低（P〈0．01）,不同PH的稀释液稀释后精液的品质在24h后开始出现明显的下降（P〈0．05）。试验表明,适宜猪精液常温保存的稀释液的弱酸性环境PH为6．4和6．5,在24h内保存效果较好。 相似文献
6.
《家畜生态学报》2021,42(7)
试验以精子冻后活率、质膜完整率和顶体完整率三项指标评价了一步稀释法(Ⅰ组)和两步稀释法(Ⅱ组),以及不同保存温度和时间对解冻、稀释后的猪精液质量的影响。结果表明,采用两步稀释法对解冻后的猪细管冻精进行稀释,精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别达到82.6%、89.4%和90.3%,极显著高于一步稀释法(P0.01)。用两步法稀释后的精液36℃保存5 min、10 min和15 min时精子活率分别为81.2%、80.8%和80.9%(P0.05),40 min时为50.1%;精子质膜完整率和顶体完整率未见显著下降(P0.05);17℃保存15 h时精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为81.1%、88.9%和91.4%(P0.05);60 h时分别为50.4%、61.4%和61.6%,均极显著低于初始的各项指标(P0.01)。 相似文献
7.
本试验旨在探索用谷氨酰胺（Gln）替代部分甘油对冻融猪精子体外获能和受精能力的影响，试验分为6组：3%甘油对照组和5个处理组（Ⅰ~Ⅴ组：2%甘油＋谷氨酰胺（0、20、40、80和100 mmol/L））。对冻融松辽黑猪精子的精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、鱼精蛋白水平、获能及体外受精等指标进行了检测。结果显示，用谷氨酰胺替代部分甘油均对冻融精子质量有一定的改善作用，改善的程度受谷氨酰胺浓度的影响。与对照组相比，Ⅰ组精子的质量参数均显著下降（P<0.05）；与Ⅰ组相比，Ⅱ组精子活力、顶体完整性和活率显著提高（P<0.05），Ⅲ组精子线粒体膜电位显著提高（P<0.05），Ⅴ组精子活力、质膜完整性、顶体完整性、活率和线粒体膜电位均显著提高（P<0.05）。说明用谷氨酰胺替代部分甘油对精子质量具有很大的影响，且当谷氨酰胺为100 mmol/L时可得到更高质量的精子，因此，后续试验使用浓度为100 mmol/L的谷氨酰胺进行研究。与对照组相比，2%甘油＋100 mmol/L谷氨酰胺处理组精子鱼精蛋白缺失率显著下降（P<0.05），精子获能无显著差异（P>0.05），但胚胎卵裂率显著提高（P<0.05）。综上所述，谷氨酰胺可作为一种新型冷冻保护剂替代部分甘油来提高猪精液的质量，并降低甘油对猪精液的毒性作用，为猪精液的冷冻保存及商业化生产提供技术支撑。 相似文献
8.
冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
研究冷冻保存前平衡温度对精子结构的影响,为提高猪精子冷冻效果提供参考。新鲜猪精液(Ⅰ组)稀释后于17℃过夜保存(Ⅱ组),然后于冷冻Ⅰ液中4℃平衡1.5h(Ⅲ组),再加入预冷的冷冻Ⅱ液于4℃平衡45min(Ⅳ组)。通过精子形态正常率及活力检测,吖啶橙(AO)染色检测精子DNA完整性,碘化丙啶(PI)染色检测精子头部质膜完整性,低渗肿胀试验(HOS)检测精子尾部质膜完整性,异硫氰荧光素标记的花生凝集素(FITC-PNA)染色检测精子顶体完整性,并用扫描电镜(SEM)观察精子结构,评价冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响。结果表明,与新鲜精液相比,Ⅱ组精液的精子DNA完整性、质膜完整性、顶体完整性等精子结构检测指标所受影响无统计学意义(P0.05);Ⅲ组和Ⅳ组的精子结构检测指标明显受到影响(P0.05),但Ⅲ组和Ⅳ组间无显著差异(P0.05)。扫描电镜检测结果表明,17℃过夜保存精子未见异常,头、颈、尾结构完整,顶体完整、光滑;Ⅲ组精子头部质膜及头颈结合部有轻微损伤;Ⅳ组精子尾部和头颈结合部有不同程度的断裂。冷冻前从17℃降低至4℃及4℃平衡对猪精子结构有一定程度的损伤。 相似文献
9.
试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响。取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精（IVF）试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔（MPTP）活性、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧（ROS）以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCP、TEKT3、DNAH1、TCTE3的表达。结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低（P<0.05）,冻精的顶体完整率也明显下降（P<0.05）;冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值（RFU）、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度（OD）值均显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精（P<0.05）;精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精（P<0.05）;而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著（P>0.05）。综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低。 相似文献
10.
为优化猪精子冷冻技术,提高解冻后精子的活力和受精能力,本试验分别以含精浆浓度为10%、20%和30%的冷冻保护剂处理精子,以冷冻前、解冻后精子活力和质膜完整性,解冻后精子进行体外受精(IVF)的卵裂率和囊胚率等作为检测指标,同时以含有卵黄的Tris-柠檬酸－葡萄糖(Tris-citric acid-glucose,TCG)冷冻基础液作为对照研究精浆对猪冷冻精子的保护作用。结果显示,在含有10%精浆浓度的稀释液中,冷冻前质膜完整性,解冻后精子活率、质膜完整性、IVF囊胚率相对于对照组均显著提高(P<0.05);当含有10%精浆的冷冻精液解冻后用于人工授精时,与配母猪妊娠率、窝产仔数、窝产活仔数等仍显著低于鲜精授精组(P<0.05)。上述结果表明,含10%精浆的冷冻保护剂能提高精子的冷冻后活力和IVF胚胎发育率,但用于人工授精配种与鲜精相比还有一定差距。 相似文献
11.
在冷冻稀释液中分别添加分数为1％、5％、10％、15％、20％的纳米化红景天多糖（Nonomaterialsrhodiolasa—chalinensispolysaccaride,NRSP）溶液,以添加6mg／L红景天多糖（Rhodiolasachalinensispolysaccaride,RSP）为对照组,不添加RSP为空白组,检测其对猪冷冻精子活力、顶体完整率、质膜完整率等生理结构指标,以及精子抗氧化能力的影响。结果表明,添加体积分数为15％NRSP组的精子活力（0．69）、顶体完整率（51．42％）、质膜完整率（25．95％）均高于其他组,并显著高于空白组（P〈0．05）。此外添加15％NRSP组的解冻后直线运动精子百分比（46．33％）要显著高于其他各组（P〈0．05）;添加6mg／LRSP组丙二醛（MDA）浓度最低（10．83±0．39）／2mol／L,并且显著低于空白组（31．85土1．36）μmol／L,（P〈0．05）,但与15％的NRSP组（11．60±0．42）μmol／L无显著差异（P〉0．05）。添加20％的RNSP组超氧化物歧化酶（SOD）活力最高（343．05-＋-19．64）μ／mgprot,显著高于其他添加组（P〈0．05）。精子活力、顶体完整率、质膜完整率之间存在显著的正相关关系（P〈0．05）,而精子活力和顶体完整性与MDA浓度呈显著负相关（P〈0．05）,与SOD活力呈显著正相关（P〈0．05）,质膜完整率与两者含量相关性不显著（P〉0．05）。 相似文献
12.
为探讨獭兔精液冷冻保存适宜的平衡时间,将精液稀释后分别平衡30 min、60 min、90 min、120 min后装管,并进行冷冻保存,解冻后分析精子活率、畸形率、质膜完整率和顶体完整率四个指标.结果表明,平衡60min时冻后精子活率（0.30）显著高于30 min（0.15）、90 min（0.21）和120 min（0.15） （P＜0.05）;畸形率显著低于30min（16.16％ vs26.23％）（P＜0.05）,但与其他各组差异不显著（P＞0.05）;平衡30 min、60 min时精子质膜完整率显著高于120min（83.05％、81.79％ vs74.79％） （P＜0.05）,与90 min差异不显著（83.05％、81.79％ vs78.63％）（P＞0.05）;不同平衡时间组精子顶体完整率差异均不显著（P＞0.05）.综合分析表明,獭兔精液在冷冻时适宜的平衡时间为60 min. 相似文献
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14.
为了研究甘肃高山细毛羊种公羊精液冷冻保存的效果.将液氮熏蒸距离按1.5、2.0、2.5 cm分为三个组合,每个组合用6.5、7、7.5 min三种时间进行熏蒸处理,对细毛羊种公羊冻精进行对比试验.熏蒸距离为2 cm,熏蒸时间为6.5 min、7 min和7.5 min处理组精子活率分别为24.91±3.31、42.33±3.96和32.83±2.08,与其它各组精子活率相比较好,组间差异显著（P＜0.05）.试验表明,细毛羊种公羊冻精熏蒸距离越近,熏蒸时间应减短,熏蒸距离越远,熏蒸时间应延长.最佳熏蒸距离为2 cm和熏蒸时间为7min,精子活率42.33±3.96.液氮熏蒸细管冷冻法的精子活率（42.33±3.96）,高于液氮熏蒸颗粒法（33.75±5.32）,而二者差异显著（P＜0.05）.液氮颗粒法的顶体完整率（33.75％）和细管法的顶体完整率（39.08％）差异不显著（P＞0.05）.通过调整细毛羊精液稀释液成分、pH值、渗透压,利用简易的液氮熏蒸方法可以完成甘肃高山细毛羊精液冷冻保存. 相似文献
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选取健康、体况良好、体格大小相近的波德代种公羊6只,分为运动与不运动两组,试验期6d,研究运动状态对绵羊精液品质的影响.结果表明：波德代种公羊平均每次采精量为1.33土0.08 mL,平均精子活率84.24±1.76,平均密度为38.06±2.55亿个/mL,精子畸形率平均为2.64±0.23％.在公羊运动与不运动状态下活率之间差异显著（P＜0.05）,而射精量、畸形率、密度之间差异不显著（P＞0.05）;对精液品质特性进行相关性分析发现精子密度与畸形精子率呈显著负相关（P＜0.05）,其他指标之间相关性不显著（P＞0.05）. 相似文献
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选取18月龄的健康五龙鹅24只,随机分为4个组,每组6个重复。各试验组日粮添加的羊草粉含量分别为12.70%、16.70%、21.00%、25.80%,采用全收粪法进行消化代谢试验,检测饲料和粪便中的多种营养成分,确定其消化率。结果表明：在代谢能（ME）和粗蛋白（CP）等摄入量一致的条件下,随着羊草粉添加水平的提高,CF的消化率为13.00%-18.40%,中性洗涤纤维（NDF）14.10%-21.47%,酸性洗涤纤维（ADF）15.40%-22.29%;组间净蛋白利用率（NPU）及氮（N）的沉积量差异不显著（P〉0.05）,粪中氨态氮（NH3-N）浓度显著下降（P〈0.05）,各种氨基酸表观消化率（AAAD）较高（77.30%-91.78%）;P的表观消化率各组间差异不显著（P〉0.05）,而Ca的表观消化率呈递减趋势（P〈0.05）;AKP活性与CF、NDF和ADF的消化率呈显著负相关（P〈0.05）,与Ca、蛋氨酸（Met）、胱氨酸（Cys）消化率呈显著正相关（P〈0.05）;ACP活性与Ca、P表观消化率呈显著正相关（P〈0.05）;其它四种酶的活性与CF、NDF、ADF消化率,Ca、P、Met、Cys表观消化率相关不显著。 相似文献
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采用单因素随机试验设计,选择离乳恢复期及冬毛生长期经产美国短毛黑母貂40只,随机分成A、B、C、D 4组,分别饲喂在基础日粮中添加0%、0.2%、0.4%和0.6%蛋氨酸的4种试验饲粮,以探讨不同水平蛋氨酸对埋植褪黑激素水貂生产性能的影响。结果表明:添加不同水平蛋氨酸后4组水貂干物质、粗蛋白、粗脂肪、能量的消化率表现为差异不显著(P0.05)。试验C组干物质采食量显著高于A、D组(P0.05);试验组与对照组增重、体长差异不显著(P0.05)。试验C组饲料转化率显著高于B、D组(P0.05),A、B、D组饲料转化率差异不显著(P0.05)。试验C、D组总胆固醇含量显著高于对照组A组(P0.05);B、C、D组总胆固醇含量差异不显著(P0.05)。试验各组甘油三酯含量差异不显著(P0.05);B组总蛋白含量明显高于A、D两组(P0.05);C、D组总蛋白含量明显高于A组(P0.05);C组与B、D组总蛋白差异均不显著(P0.05)。在此日粮基础上,综合各项指标可得出,埋植褪黑激素后恢复期和冬毛生长期经产母水貂日粮中蛋氨酸的适宜添加水平为0.4%。 相似文献