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家兔扩张囊胚玻璃化冷冻保存技术的研究 总被引：16，自引：0，他引：16
本试验对家兔扩张囊胚的玻璃化冷冻保存技术进行了探讨。首先在２０℃室温下，将扩张囊胚直接移入ＥＦＳ４０溶液中短时间平衡后，直接投入液氮中冷冻保存（一步法）；或胚胎在１０％～２０％ＥＧ（或ＥＦＳ２０）溶液中经预先处理后，再移入ＥＦＳ４０中冷冻保存（二步法），解冻后的胚胎发育率达到９５％～１００％。当室温提高到２５℃时，一步法和二步法冷冻的胚胎均得到了较高的发育率（８９％～９０％）。利用２０℃条件下一步法即２分钟平衡后冷冻的胚胎移植后，妊娠受体的产仔率为２９．２％（７／２４），同对照组产仔率３２．４％（１１／３４）相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。 相似文献
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牛体外受精扩张囊胚的玻璃化超低温冷冻保存及移植技术的研究 总被引：6，自引：0，他引：6
本试验对牛的扩张囊胚的冷冻保存技术进行了探讨。在２５℃温度下，利用ＥＦＳ４０的玻璃化溶液，将扩张囊胚直接移入此液中平衡后，投入液氨中一步法冷冻保存。或胚胎移入ＥＦＳ４０之前，在１０％ＥＧ溶液中预先处理，二步法冷冻保存。其解冻后获得了较高的发育率（分别为５９％ＶＳ６３％）。冷冻保存的胚胎移植后的妊娠率及产仔率分别高于对照组（８０％ＶＳ５５％；５５％ＶＳ２３％）。 相似文献
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小鼠桑椹胚简易玻璃化冷冻技术再探讨 总被引：12，自引：0，他引：12
本试验继小鼠扩张囊胚玻璃化冷冻保存成功后，在室温（２５℃）下利用不同浓度的ＥＦＳ玻璃化溶液，对小鼠的桑椹胚简易玻璃化冷冻技术进行再探讨。结果是胚胎在１０％ＥＧ溶液中预先处理５分钟，再移入事先配置好含有ＥＦＳ３０的０．２５ｍｌ塑料细管中１分钟平衡后直接投入液氮中冷冻，解冻后获得的发育率最高（９４％）。冻胚移植后妊娠率和产仔率分别为５６％（９／１６）及４２％（４９／１１６）。与对照组相比差异不显著（Ｐ＞０．０５） 相似文献
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在25℃室温和37℃恒温台条件下，利用玻璃化冷冻溶液EFS30、EFS40、EDFS30或EDFS40，对小鼠4-细胞胚胎进行玻璃化冷冻保存．以解冻后培养72h的囊胚发育率为其体外发育能力的考核指标，同时对解冻后培养1～3h的胚胎进行移植以判定其体内发育潜力。开放式拉长塑料细管（OPS）二步法冷冻保存，即胚胎首先移入预处理液（10％EG或10％EG＋10％DMSO）中平衡30s，再移入玻璃化溶液中洗涤后吸入OPS管中，分别经35、30或25s后直接投入液氮中冷冻保存。一步法冷冻保存则无需预处理液处理。结果表明，小鼠胚胎4-细胞一步法和二步法冷冻后囊胚最高发育率分别为87．7％和88.6％，与对照组（93.0％）差异不显著（P〉0．05）。利用最佳冷冻组获得的143枚胚胎移植于12只假妊娠50～60h的受体母鼠，结果有4只妊娠产仔17只，妊娠产仔率为42．5％（17／40），与对照组59．4％（19／32）差并不显著（P〉0.05）。 相似文献
6.
影响玻璃化冷冻兔胚胎效果的一些因素 总被引：4，自引：0，他引：4
试验对影响玻璃化冷冻兔胚胎效果的一些因素进行探讨，以找出理想的玻璃化冷冻方法。在测试的５种玻璃化溶液中，含３５％乙二醇（ＥＧ）和１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖的溶液（ＶＳ１）对胚胎的毒性最小。用ＶＳ１冷冻桑椹胚和囊胚的理想程序是：在室温下使胚胎分别在２０％ＥＧ和３５％ＥＧ中平衡２、３分钟后，移入ＶＳ１中，０．５分钟内（囊胚也可在２分钟后）投入液氮中冷冻。桑椹胚的存活率为９１．７％（３３／３６），囊胚的存活率为９７．１％（３３／３４）～９７．３％（３６／３７）。８～１６细胞胚胎的理想冷冻程序为：在室温下使胚胎在２０％ＥＧ、３５％ＥＧ中平衡２、３分钟，移入４℃的３７％ＥＧ＋１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖溶液中平衡２分或１０分钟后冷冻，胚胎存活率分别为１００％（３７／３７）、８６．１％（３１／３６）。 相似文献
7.
牛体外受精胚冷冻保存的研究 总被引：9，自引：0，他引：9
对牛卵泡卵母细胞体外受精（ＩＶＦ）１６８ｈ的致密桑椹胚、囊胚用常规快速冷冻法、预冷和不预冷的超快速冷冻法进行了冷冻保存试验。结果表明：ＩＶＦ囊胚采用含１０％甘油的常规快速冷冻法、含２．１ｍｏｌ／Ｌ甘油和０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖预冷５ｍｉｎ的一步冷冻法及含２５％甘油和２５％乙二醇预冷５ｍｉｎ的玻璃化冷冻法等３种方法进行冷冻保存，解冻后的继续发育率（６８．０％，５９．０％，６５．７％）均无显著差异（Ｐ＞０．０５），可用快速、简便、预冷的一步冷冻法或玻璃化冷冻法替代常规快速冷冻法；ＩＶＦ致密桑椹胚可用一步冷冻法（２．１ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖）和玻璃化冷冻法（２５％甘油＋２５％乙二醇或２５％甘油＋２５％１，２－丙二醇）进行预冷的超快速冷冻保存；冻前预冷（５ｍｉｎ）能显著提高ＩＶＦ囊胚的冻后形态正常率和继续发育率（Ｐ＜０．０５）；ＩＶＦ囊胚冷冻—解冻后的继续发育率高于ＩＶＦ致密桑椹胚。 相似文献
8.
转基因兔胚胎玻璃化冷冻保存的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
在２５℃条件下,将兔体外受精精子载体转基因兔桑椹胚置于含有４０％乙二醇、１８％Ｆｉｃｏｌ、０．３ｍｏｌ蔗糖的ｍＰＢＳ溶液（ＥＦＳ４０）中平衡２分钟,然后直接投入液氮,成功地进行了玻璃化冷冻保存。解冻后桑椹胚发育至囊胚和孵化囊胚的比例分别为６５．８１％和３９．２４％,与未经冷冻的鲜胚发育比例（７１．０５％和４３．４２％）相比,没有明显的差异。７８枚经玻璃化冷冻和解冻的桑椹胚移植给５只受体,其中２只妊娠,共产下８只活仔兔。 相似文献
9.
小鼠扩张囊胚低渗液处理试验 总被引：1，自引：0，他引：1
为研究解冻后的胚胎膨胀对其发育率的影响，本试验用２０～５０％的低渗ＰＢＳ溶液（即０．２０×、０．２５×、０．３０×及０．５０×），分别将小鼠扩张囊胚在低渗液中处理３０分钟后培养，结果新鲜胚在０．５０×和０．３０×中处理后的发育率分别为１００％和９１％，０．２０×处理组的发育率降低到５３％。解冻后的胚胎直接用低渗液处理，０．５０×组只有８５％继续发育，低于０．２５×组完全不能发育。而解冻后经培养恢复到扩张囊胚后再做低渗处理，０．３０×组仍有９６％继续发育。 相似文献