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[目的]建立方便可行的伪狂犬病毒血清抗体的酶联免疫吸附测定方法,并可特异性鉴别伪狂犬病毒TK-/gG基因缺失疫苗免疫株和野毒株.[方法]利用原核表达系统表达伪狂犬病毒gG抗原片段,蛋白纯化后包被,优化反应条件,建立一种用于检测伪狂犬病毒gG抗体的间接酶联免疫吸附测定方法.[结果]通过不同血清样品的检测试验,该酶联免疫吸附测定方法可以鉴别伪狂犬病毒TK-/gG-基因缺失疫苗免疫猪和感染野毒的血清学阳性猪.[结论]成功建立了检测伪狂犬病毒gG抗体的酶联免疫吸附测定方法,并可特异鉴别伪狂犬病毒TK-/gG-基因缺失疫苗免疫株和野毒株,此方法敏感性强,特异性高,操作简便,适合于临床大量检测. 相似文献
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夏平安 《郑州牧业工程高等专科学校学报》1995,(4)
应用鼠脑传代,从具有神经症状的病牛脑组织中分离获得5株病毒,经电子显微镜观察呈典型弹状病毒样粒子.用抗狂犬病毒CVS(狂犬病毒Ⅰ型代表株)免疫血清作ELISA检测及小鼠中和试验,证明分离株病毒为狂犬病毒.用狂犬病相关病毒Lagos bat(狂犬病毒2型)、Mokola(狂犬病毒3型)和Duvenhage(狂犬病毒4型)免疫血清对分离株病毒作交叉中和试验,结果发现分离株病毒与Duvenhage有较密切的抗原联系.而与Lagos bat及Mokola病毒没有抗原联系.用自制狂犬病毒“核蛋白”单克隆抗体作夹心间接ELISA检测分离株病毒的感染鼠脑均呈阳性反应,5株病毒与CVS及其互相之间没有明显差异.结论认为,由河南省黄牛分离的病毒为狂犬病毒. 相似文献
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【目的】对狂犬病毒Rmg基因进行克隆、表达、纯化及复性,以期获得表达量高、反应原性好的Rmg蛋白,为研制快速、直观、简便检测狂犬病毒抗体的胶体金试纸条奠定基础。【方法】用常规PCR从狂犬病毒基因组中克隆出狂犬病毒G蛋白的主要抗原表位基因Rmg,并将其插入原核表达载体pET-Trx中,构建原核表达质粒pET-Trx-Rmg,将pET-Trx-Rmg转化BL21（DE3）plysS,在IPTG诱导下进行表达。【结果】SDS-PAGE分析结果表明,Rmg基因在BL21（DE3）plysS中获得高效表达,表达量占菌体总蛋白的30.5%左右,并主要以不溶的包涵体形式存在,分子量约为51.7 kDa。将表达的蛋白以亲和层析法进行纯化并通过谷胱甘肽还原法进行复性,纯化后蛋白纯度达99.1%。经Western blotting检测,发现表达的Rmg蛋白能够与狂犬病毒高免血清发生特异反应,但与犬细小病毒（CPV）、犬瘟热病毒（CDV）阳性血清不发生反应。【结论】Rmg蛋白具有良好的抗原性,可用于研制检测狂犬病毒抗体的胶体金试纸条。 相似文献
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【目的】对狂犬病毒Rmg基因进行克隆、表达、纯化及复性,以期获得表达量高、反应原性好的Rmg蛋白,为研制快速、直观、简便检测狂犬病毒抗体的胶体金试纸条奠定基础。【方法】用常规PCR从狂犬病毒基因组中克隆出狂犬病毒G蛋白的主要抗原表位基因Rmg,并将其插入原核表达载体pET-Trx中,构建原核表达质粒pET-Trx-Rmg,将pET-Trx-Rmg转化BL21（DE3）plysS,在IPTG诱导下进行表达。【结果】SDS-PAGE分析结果表明,Rmg基因在BL21（DE3）plysS中获得高效表达,表达量占菌体总蛋白的30.5%左右,并主要以不溶的包涵体形式存在,分子量约为51.7kDa。将表达的蛋白以亲和层析法进行纯化并通过谷胱甘肽还原法进行复性,纯化后蛋白纯度达99.1%。经Western blotting检测,发现表达的Rmg蛋白能够与狂犬病毒高免血清发生特异反应,但与犬细小病毒（CPV）、犬瘟热病毒（CDV）阳性血清不发生反应。【结论】Rmg蛋白具有良好的抗原性,可用于研制检测狂犬病毒抗体的胶体金试纸条。 相似文献
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[目的]确定广东地区狂犬病毒流行毒株,更好地防控狂犬病。[方法]对2009年从广东省各地采集的犬脑和对应唾液腺进行直接免疫荧光和巢式RT-PCR检测,并通过颅内接种乳鼠进一步鉴定毒株。PCR扩增分离株的N基因,测定其核苷酸序列,并将其与广西地区的流行毒株和疫苗株进行了比对。[结果]分离到2株狂犬病毒毒株,其N基因序列与广西分离到的病毒具有极高的相似性（97.9%～99.4%）,与狂犬病毒疫苗株的相似性为87.7%～88.1%。[结论]外表健康犬只可能携带狂犬病毒,且狂犬病毒的流行存在明显的地域差异。 相似文献
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《江苏农业学报》2018,(6)
为建立一种快速鉴别猪伪狂犬病毒野毒株与疫苗株的方法,根据猪伪狂犬病毒(PRV)全基因序列,并参照SA215、Bartha-K61疫苗株基因缺失位点特征,在单一检测野毒株与疫苗株的基础上,针对g E、g B和TK基因设计引物,首次建立了同时检测猪伪狂犬病毒野毒株与疫苗株的多重PCR检测方法。通过一次PCR检测能区分感染野毒株、疫苗株SA215和Bartha-K61,且与猪圆环Ⅱ型病毒(PCV-2)、细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)无交叉反应。多次试验证明该方法简单、可靠且敏感度高,可用于科学研究和临床诊断等方面。 相似文献
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BAI Yanju ZHANG Wei LI Xuezhan SHEN Yu GAO Yanling FAN Guoquan MENG Xianxin GENG Hongwei 《东北农业大学学报(英文版)》2010,17(2)
Garlic virus infection is an important disease which affects garlic production,with the increasing years of planting,harm of virus is serious year by year,which seriously affect yield and quality of garlic.In order to know the garlic virus effectively,the paper reviewed the research situation of several important garlic virus in virus species,origin,distribution,host range,symptom,route of transmission,classification,genome and detection technique and the prevention technology of garlic viruses.At the same ... 相似文献
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Mapping of herpes simplex virus-1 neurovirulence to gamma 134.5, a gene nonessential for growth in culture 总被引：49，自引：0，他引：49
The gene designated gamma 134.5 maps in the inverted repeats flanking the long unique sequence of herpes simplex virus-1 (HSV-1) DNA, and therefore it is present in two copies per genome. This gene is not essential for viral growth in cell culture. Four recombinant viruses were genetically engineered to test the function of this gene. These were (i) a virus from which both copies of the gene were deleted, (ii) a virus containing a stop codon in both copies of the gene, (iii) a virus containing after the first codon an insert encoding a 16-amino acid epitope known to react with a specific monoclonal antibody, and (iv) a virus in which the deleted sequences were restored. The viruses from which the gene was deleted or which carried stop codons were avirulent on intracerebral inoculation of mice. The virus with the gene tagged by the sequence encoding the epitope was moderately virulent, whereas the restored virus reacquired the phenotype of the parent virus. Significant amounts of virus were recovered only from brains of animals inoculated with virulent viruses. Inasmuch as the product of the gamma 134.5 gene extended the host range of the virus by enabling it to replicate and destroy brain cells, it is a viral neurovirulence factor. 相似文献
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刘洪义 《东北农业大学学报》2001,32(3):310-312
试验证明 ,谷糜病毒病毒原的传毒介体为灰飞虱 (L aodel phax striatella Fallen) ,不能经卵传毒 ,生物学测定及田间调查表明 ,该病毒病的症状在谷糜上略有不同 ,二者均表现为矮化、丛生、花叶、后期叶片变红 ,这与小麦丛矮病显著不同 ;谷子还表现硬穗症状。寄主范围与小麦丛矮病一致。EL ISA及免疫电镜测定结果表明 ,该病毒与小麦丛矮病的抗血清呈阳性反应 ,结果证实该病毒为小麦丛矮病毒 (WRSV) ,又称北方禾谷花叶病毒 (NCMV)。 相似文献
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Reversion of murine sarcoma virus transformed mouse cells: variants without a rescuable sarcoma virus 总被引：10，自引：0，他引：10
P J Fischinger S Nomura P T Peebles D K Haapala R H Bassin 《Science (New York, N.Y.)》1972,176(38):1033-1035
Murine sarcoma virus transformed mouse 3T3 cells, which are negative for murine leukemia virus and which yield sarcoma virus after superinfection with murine leukenmia virus, spotaneously give rise to flat variants front which murine sarcoma virus can no longer be rescued. The revertants support leukemia viruis growth and show an enhanced sensitivity to murine sarcoma superinfection and, like normal cells, do not release RNA-dependent DNA polymerase activity. Because revertants could be obtained with high frequency from progeny of single transformed cells, each cell that containts the sarconma virus genome seems to have the capacity to suppress or eliminate an RNA tumor virus native to its species of origin. 相似文献
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为明确禽坦布苏病毒包膜蛋白E的基因特征,运用RT-PCR从已经分离鉴定的禽坦布苏病毒中扩增出其包膜蛋白E全基因,并进行克隆测序和分析。结果表明,禽坦布苏病毒包膜蛋白E全长为1503bp,编码501个氨基酸。所编码的包膜蛋白E大小为54.217ku,理论等电点为6.89,不稳定系数为25.48,属于稳定蛋白质类。利用TMHMM2.0进行跨膜区分析发现,该蛋白的拓扑结构为o442-464i471-489o。本试验株包膜蛋白E和北京鸭源坦布苏病毒（GenBank号：JF459991）同源性最高,达99.8％,和雌麻鸭源坦布苏病毒（GenBank号：JQ928189）核苷酸同源性最低,为98.2％,不同来源（鸡源、鸭源、鹅源、鸽源和蚊子源）坦布苏病毒包膜蛋白E同源性均较高,没有表现出宿主特异性。 相似文献
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口蹄疫流行病学及感染机制的研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
口蹄疫(Foot-and-mouth disease FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus FMDV)引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。FMDV有多种血清型及其亚型,目前主要引起动物致病的就有7种,即A、O、C、SATⅠ、SATⅡ、SATⅢ和亚洲Ⅰ型(AsiaⅠ型)。病毒通常在细胞受体的参与下才入侵宿主细胞,进行扩增生命循环,感染宿主细胞,使得该病得以广泛流行。但由于口蹄疫病毒的高度变异性和适应性而在流行中出现新的特点,以及被发现的病毒在动物体内和细胞中长期存在而引发FMDV的持续感染等问题,使得本病不能有效被控制而在许多国家和地区重新暴发和流行。为此本文将口蹄疫病原学、流行病学、病毒细胞受体及其病毒在体内持续感染形成的原因方面进行的论述,为口蹄疫病毒感染机制的研究提供了科学的依据。 相似文献
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本病是在我国发现的尚未见报道的丹顶鹤病毒性传染病。患鹤肝脏肿大。实验表明,人工感染雏鹅和成年鹅能引起发病和死亡;该病毒还可致死鹅胚、鸭胚和鸡胚,并能在鹅胚和鸭胚成纤维细胞上产生细胞病变。该病毒有囊膜,呈球形,大小约为130-180nm,无囊膜颗粒为95-105nm在CsCl里浮密度为1.29-1.34g/cm#+3,沉降系数为83.4s,对pH3.0敏感,而对pH5.0有抵抗力,1克分子MgCl#-2溶液对病毒无保护作用。该病毒不凝集禽类及动物红细胞。中和试验表明本病毒与小鹅瘟病毒、新城疫病毒、鸡马立克氏病病毒、法氏囊病病毒、鸭瘟病毒、小鸭肝炎病毒和猪瘟病毒没有抗原关系。 相似文献
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图书馆局域网防ARP病毒攻击方法探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
ARP病毒攻击在图书馆局域网中经常出现,这种病毒清理和防范比较困难,不少网络管理员对此感到困扰.在图书馆以电子阅览室受害最为明显,影响也较大,给读者和工作人员带来诸多不便.为避免或尽量减少因ARP病毒攻击造成的影响.笔者对ARP病毒的症状、攻击原理及处理办法等几个方面作了粗浅的探讨. 相似文献