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甘蓝小孢子植株倍性简易鉴定方法研究 总被引：2，自引：1，他引：1
以编号为12、22的甘蓝材料（F1）经小孢子培养得到的植株为试材,先利用流式细胞仪对供试材料进行倍性鉴定,再利用普通光学显微镜观察已通过倍性鉴定的双单倍体与单倍体的气孔保卫细胞,以测定其大小与叶绿体数。结果表明：气孔保卫细胞叶绿体数与甘蓝倍性高低呈正比关系,甘蓝双单倍体气孔保卫细胞叶绿体数变异幅度为12~17,单倍体气孔保卫细胞叶绿体数的变异幅度为6~10;同一材料双单倍体与单倍体气孔保卫细胞叶绿体数的比值≈2,两者数值差异非常显著直观,易于辨别。因此观测气孔保卫细胞叶绿体数是鉴定甘蓝小孢子植株倍性的简易有效手段。 相似文献
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采用秋水仙碱溶液对单倍体植株进行诱导,并采用流式细胞仪及保卫细胞叶绿体染色法对青花菜小孢子再生植株群体的倍性进行分析。结果表明,小孢子再生植株群体单倍体和二倍体所占比例基本一致;采用200 mg/L秋水仙碱处理单倍体植株20 h后,3个供试基因型植株的存活率分别为88.9%、90%和100%,二倍体诱导率分别为66.7%、70%和77.8%,另外还得到1株四倍体植株。采用FDA荧光染色和1%I-KI染色法可清楚地观察到不同倍性间植株气孔大小和形态以及保卫细胞叶绿体数存在显著差异;单倍体植株气孔长度约为20μm,二倍体约为25μm,而四倍体大于33μm;单倍体保卫细胞叶绿体数为7个左右,二倍体约13个,而四倍体最多超过23个。1%I-KI染色法对设备要求简单,宜普遍采用。 相似文献
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单倍体植株在倍性育种中具有极大的优点和巨大的应用潜力，快速、准确地筛选出单倍体植株对加速育种进程具有重要的意义。植株倍性的鉴定方法主要有直接鉴定法和间接鉴定法。现综述了直接鉴定法即染色体计数法和流式细胞分析法（flow cytometric measurement）、叶片气孔大小及保卫细胞叶绿体数目鉴定法、染色中心直径和异染色质数目以及植株形态观察等间接鉴定法的应用进展，并对各自的优缺点作了简要的评述。 相似文献
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以260份梨种质资源为试材,采用流式细胞仪对梨种质资源的倍性进行了鉴定,幵与前人用去壁低渗Giemsa染色法的鉴定结果进行了比较,以期为梨种质资源的创新和利用提供参考。结果表明:休眠期水培幼嫩叶片和早春嫩叶是梨种质资源倍性鉴定最理想的试验材料;供试的21份多倍体材料的倍性与前人鉴定结果一致,‘沙01’与前人鉴定结果存在分歧,幵新収现9份三倍体种质,分别为‘细皮梨’‘黑酸梨’‘冀蜜梨’‘世纪梨’‘敦煌香水梨’‘Beure Bosk’‘William Laspave’‘Yakumo’‘Butirra Rosata’;流式细胞仪法是进行梨种质资源倍性鉴定高效、快捷的斱法,克服了去壁低渗Giemsa染色法操作难度大、耗时长的不足,缺陷是不能获得更详细的染色体特征信息。 相似文献
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应用气孔性状对苹果与梨的倍性判别分析 总被引：17，自引：0，他引：17
以苹果和梨的二倍体和多倍体为试材,比较了气孔保卫细胞叶绿体数目,气孔密度,气孔长和气孔宽四个性状与倍性的关系,分析各个性状用于倍性鉴定的可靠性,并采用两类性状同时进行判别分析,建立判别分析方程。结果表明,叶绿体数目和气孔长鉴定倍性的可靠性较高,其中,苹果气孔误判率最低,为６．６７％;梨气孔保卫细胞叶绿体数目误判率最低,为１２．５％。 相似文献
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以二倍体、四倍体及经秋水仙素处理的黄花蒿植株为试材,采用整体透明技术制备黄花蒿叶片样品,对不同倍性植物的叶片气孔保卫细胞长轴长、短轴长及其周长进行考察,探讨气孔保卫细胞大小与植株倍性的相关性。结果表明:以10%氢氧化钾溶液为透明剂,透化时间为1.5h的透化效果最好;二倍体与四倍体植物的气孔保卫细胞长轴长、短轴长及其周长差异显著,其周长范围分别为57.19~70.33μm和83.36~91.99μm;利用二倍体与四倍体的周长分布在不同区间范围,可以对秋水仙素处理的黄花蒿植株进行快速的初步倍性鉴定。 相似文献
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借助细胞流式仪进行枇杷基因组学测序材料的倍性鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
利用流式细胞仪进行测试枇杷品种的染色体倍数鉴定,并用低深度测序结果进行验证,据此为选择枇杷全基因组测序材料提供依据。结果表明,来自华南农业大学种质资源圃和四川石棉的‘大五星’均与‘解放钟’一样为二倍体,而来自四川农业大学的两份‘大五星’枇杷1号和188号材料均为三倍体。测序结果显示,来自华南农业大学资源圃的‘解放钟’枇杷为二倍体,773 Mb;而来自四川农大的‘大五星’枇杷1号和188号可能都为三倍体,基因组大小分别为749 Mb和765 Mb。以已确定基因组大小的植物萝卜、番茄和大豆为参照测定了‘解放钟’枇杷的基因组大小,结果为654.399 Mb。 相似文献
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对小白菜品种进行游离小孢子培养,得到9株再生植株,其中2株为单倍体,7株为二倍体,二倍体自然加倍率为77.7 %。为
避免材料间差异,取单倍体和二倍体再生植株各2株,提取单株DNA,分别构建单倍体和二倍体DNA混合池。利用甲基化敏感性限制性
内切酶-PCR法,结合SRAP分子标记技术,对2个DNA混合池进行筛选,共筛选768对引物,只有在未酶切的单倍体和二倍体DNA池中SRAP
引物扩增无差异,而酶切后有差异的条带,才认为是单倍体和二倍体甲基化差异。试验共获得8对含有多态性的引物,试验结果证明
小白菜小孢子培养获得的再生植株的倍性与基因组DNA甲基化有关。 相似文献
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甲基胺草磷诱导大蒜多倍体的研究 总被引：2，自引：1，他引：1
以通过生理休眠的紫皮大蒜Z-006-10鳞茎茎尖为试材,利用固体培养基中添加甲基胺草磷的离体诱导方法,研究甲基胺草磷不同处理浓度和时间对紫皮大蒜体细胞染色体的诱导效果,并利用形态观察、根尖细胞染色体计数及流式细胞仪分析等方法对得到的再生植株进行倍性鉴定。试验结果表明：10 μmol?L-1甲基胺草磷处理6 d,四倍体诱导率最高,达32.87%。形态观察结果表明,得到的四倍体植株多倍体形态特征明显,与二倍体植株差异明显。根尖染色体压片观察表明,四倍体染色体数为2n=4x=32,对照为2n=2x=16。流式细胞仪倍性分析表明,四倍体体细胞DNA的相对含量是二倍体的2倍,其结果与染色体计数法鉴定结果一致。 相似文献
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澳洲指橘与粗柠檬体细胞杂种倍性FCM分析及其花粉活力检测 总被引：7，自引：1，他引：7
利用流式细胞仪对5株澳洲指橘(Microcitrus papuana Swingle,2n=2x=18)与粗柠檬(Citrus jambhiri Osbeck,2n=2x=18)属间体细胞杂种进行倍性分析,以已知倍性的二倍体粗柠檬植株的峰对应荧光值(FL)50作为对照,5棵再生植株的FL值分别为51、51、47、52、48,表明这些体细胞杂种植株均为二倍体。同时,实验结果还表明,HR(HighResolution)试剂盒中的核提取液HR-A和染色液HR-B的最佳处理时间分别是5min和2min。体细胞杂种于2002年3月首次开花,对其花粉活力进行分析,结果表明体细胞杂种的花粉活力为50％～90％。 相似文献
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A shed-microspore culture protocol was developed in Wageningen for producing doubled haploid plants in several genotypes of Indonesian hot pepper (Capsicum annuum L.). For transfer of technology to Indonesia, three factors were studied that appeared crucial for successful implementation in practice. First, application in the culture medium of a combination of the antibiotics timentin and rifampicin at the concentrations of 200 and 10 mg/l, respectively, prevented bacterial contamination from the donor explants. Second, in vitro application of colchicine (100 μM) during the first week of culture was highly effective in increasing the percentage of doubled haploid plants. Third, a comparative analysis of the ploidy level of plants regenerated from shed-microspore-derived embryos using chloroplast counts in guard cells of leaf stomata and flow cytometric measurement of leaf nuclear DNA content, revealed that the first procedure is a reliable and an easy to use method for ploidy determination with hot pepper. 相似文献
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《Scientia Horticulturae》2005,105(2):263-268
The genome doubling agent colchicine has been used effectively to obtain tetraploid plants when starting with diploid material. Since the plant meristem consists of many cells, as well as obtaining tetraploids, it is possible to obtain mixoploids (chimeras consisting of diploid and tetraploid tissue) after colchicine treatment. Flow cytometry was used to determine the DNA ploidy level of different tissues of individual hop plants following colchicine treatment of diploid hops. Plants that are shown to be mixoploid after analysis of leaf tissue can display higher levels of tetraploid nuclei in root tissue, such that they could be mistakenly classified as tetraploid. The hop variety Galena-4n, which was previously considered to be a tetraploid, is shown to be a mixoploid based on leaf material. However, Galena-4n consistently produces triploid progeny when crossed with a diploid hop variety, indicating that Galena-4n produces tetraploid reproductive tissues and is effectively a tetraploid from a breeding perspective. The results from this study indicate that care should be taken when determining the DNA ploidy level of an individual plant after exposure to genome-doubling agents based on single tissues and that leaf tissue is a choice material for flow cytometric analysis. 相似文献