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山羊成骨细胞的体外培养和鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
采用初生山羊羔股骨骨膜，通过植块培养法、完全消化法和半消化植块法分离、培养成骨细胞。结果表明，植块培养法、完全消化法和半消化植块培养法的贴壁时间分别为4、24、4h；培养4d时的细胞数量分别为少量细胞、少量细胞、大量细胞，细胞汇合时间分别为21、19、10d。传代后第7d即可汇合，第14d出现矿化结节，茜素红染色呈橘红色，Von Kossa染色呈黑色；姬姆萨和HE染色后可见体外培养的细胞呈三角形、多角形，胞质丰富，胞核卵圆形，单核，有1～3个核仁；碱性磷酸酶染色后胞质呈黑色颗粒或块状沉淀；扫描电镜观察胞突发达，伸出的突起与临近细胞的突起相连。体外培养传至15代时细胞的生物学性状未发生变化。试验结果显示，半消化植块培养周期短，细胞损害小，有利于细胞贴壁，是一种可行的骨组织工程研究方法。 相似文献
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PK-15细胞，又称猪肾传代细胞，主要用于病毒的培养，尤其是猪圆环病毒对此细胞特别敏感。本试验通过研究细胞的复苏方法、培养基种类、细胞接种密度和消化液浓度与PK-15细胞生长的关系，观察培养过程中的限制性因素对PK-15细胞生长的影响。为获得状态良好的高密度的PK-15细胞培养提供依据，结果表明，用换液法复苏PK-15细胞成活率高，用0.05%胰蛋白酶：0.02% EDTA消化细胞，接种密度2×105cells／mL-2.5×105cells／mL，用DMEM-LG培养基培养，细胞生长快，形态好。 相似文献
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利用培养金黄色葡萄球菌培养基过滤液建立成纤维上皮细胞炎症反应模型，用于观察和研究炎症反应过程中细胞形态的变化。将培养金黄色葡萄球菌培养基除菌过滤冻干，用细胞培养基稀释，按照一定蛋白含量加到上皮细胞的培养基中，制作细胞炎症反应模型。结果显示，成纤维上皮细胞发生炎症反应，高浓度细菌滤过液的细胞形态发生变化，细胞边缘模糊不清，细胞出现空泡，随着培养时间的延长低浓度的大量大型细胞开始增加；在添加金黄色葡萄球菌培养基滤过液培养24h后利用^3H—TdR方法测定细胞增殖率，细胞增殖差异是显著的。结果表明，建立细胞炎症反应模型是可行的，并为以后炎症反应机理研究和抗炎性反应药物研究奠定了基础。 相似文献
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为筛选适宜MDCK细胞生长的最佳血清，分析6个批次新生牛血清在两种培养方式即贴壁静置培养条件下MDCK细胞的生长状态、平均集落形成率及微载体悬浮培养条件下MDCK细胞的生长状态、生长速率、生长动力学情况。结果表明6组新生牛血清贴壁静置培养的MDCK细胞，平均集落形成率最大的为第Ⅴ组，最小的为第Ⅰ组，由大到小依次为第Ⅴ、Ⅵ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅰ组；微载体悬浮培养条件下的MDCK细胞，最大增殖密度从大到小依次为第Ⅳ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅴ、Ⅱ、Ⅰ组，平均倍增时间由大到小依次为第Ⅵ、Ⅴ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅰ组。因此，通过对不同批次血清贴壁静置培养的MDCK细胞生长状态、平均集落形成率及微载体悬浮培养的MDCK细胞生长状态、生长动力学评价，筛选出适宜细胞生长的新生牛血清批次为第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组，而第Ⅰ组新生牛血清对细胞生长的促进效果不明显，细胞生长状态不佳。 相似文献
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本试验借助透射电镜技术、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术和荧光染色技术对传染性法氏囊病病毒变异 Ｅ 株人工感染诱导的雏鸡法氏囊淋巴细胞和体外培养法氏囊细胞的细胞凋亡进行了较为详细的研究。结果表明， Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 感染后早期阶段，雏鸡法氏囊淋巴细胞和体外培养法氏囊细胞呈现典型细胞凋亡的形态学特征和生化特 征。 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 感染雏鸡后２４～４８ ｈ 和感染法氏囊培养细胞后４～２４ ｈ，法氏囊淋巴细胞凋亡细胞数量显著增加，而正常淋巴细胞数量相应减少，揭示 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 人工感染可以诱导雏鸡法氏囊淋巴细胞和体外培养法氏囊淋巴细胞的细胞凋亡。 相似文献
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应用二次细胞技术生产鸡痘弱毒细胞疫苗，在单位培养瓶内可培养更多的细胞以供鸡痘病毒生长繁殖，对提高鸡痘病毒产量来说，是一种十分有效的方法。 相似文献
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不同培养系统牛体外受精囊胚的质量评价 总被引：5，自引：1，他引：4
采用双重荧光分染方法，结合免疫外科手术，对来自TCM199和SOF培养系统的牛体外受精囊胚质量进行了评价。结果显示，TCM199培养系统的囊胚发育率为31．9％(335／1074)，平均细胞总数为73．1，内胚团细胞数为16．8，其中生存细胞占99．5％；SOF培养系统的囊胚发育率为20．9％(248／1186)，平均细胞总数为56．2，内胚团细胞数为11．3，其中生存细胞占96．5％。证实，使用TCM199生产的囊胚质量和囊胚发育率优于SOF培养系统。 相似文献
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对猪传染性胃肠炎病毒TH-98分离株进行了在ST，PKl5及IBRS2三种细胞增殖特性的研究，以及不同培养条件对其繁殖滴度的影响。结果表明，在静置培养每件下，用含15％FBS的生长液进行细胞传代，对ST，PKl5及IBRS2三种细胞生长以及接毒后对CPE判定都起到良好效果。但在旋转条件下培养细胞，用l0％的FBS生长液即可使三种细胞生长良好，用ST细胞增殖病毒的滴度明显高于其他两种细胞。旋转培养条件下增殖病毒始终比静置培养繁殖病毒的滴度高，在维持液中加入胰酶未见有病毒滴度的明显提高。 相似文献
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小鼠皮肤成纤维细胞的体细胞核移植 总被引：1，自引：1，他引：0
取成年小鼠唇部皮肤进行培养，分离成纤维细胞并血清饥饿培养1周，用作核供体。对成年小鼠进行超排，取卵母细胞用作核受体，核移植重构胚经SrCl2激活处理6h后，同mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养，把发育到早期囊胚的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上，添加ES细胞条件培养液，消化分离ICM，然后接种培养，对孵出的ES细胞样集落进行鉴定培养。结果显示，小鼠唇部皮肤成纤维细胞为核供体，核移植重构胚2-细胞率为54．05％，桑椹胚率17．14％，囊胚率6．90％，对照组卵丘细胞的核移植重构胚2-细胞率为60．00％，桑椹胚率21．85％，囊胚率11．69％，但2种供体细胞在支持核移植重构胚发育能力上差异不显著。成纤维细胞重构囊胚中6个囊胚分离出ES细胞样集落，3个ES细胞样集落可稳定传代；对照组卵丘细胞重构囊胚中9个囊胚中分离出ES细胞样集落，5个ES细胞样集落可稳定传代。从核移植重构胚中分离出的ES细胞样集落具有岛状或巢状群体生长形态，生长旺盛的集落可自发分化成单个散在或片状存在的上皮样或梭形细胞，碱性磷酸酶检测为阳性，常规冻存复苏，仍显示ES细胞特征。 相似文献
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胚胎干细胞体外诱导分化的研究进展 总被引：2，自引：0，他引：2
胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)是由早期胚胎内细胞团(ICM)或原始生殖(PGC)细胞经体外分离、抑制分化培养获得的多潜能细胞。ES细胞具有发育分化的多潜能性和无限的自我更新能力，能在体外长期培养并具有向机体各种组织细胞分化的潜能。由于ES细胞的全能性，在体外可以分化出包括3个胚层在内的所有细胞， 相似文献
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骨骼肌卫星细胞是一种肌源性干细胞，在动物生后的肌肉发育和损伤修复中发挥重要作用，同时与产肉家畜的胴体性状、肉产量和肉品质密切相关。为完善猪骨骼肌卫星细胞的快速、简便分离和培养方法，本研究对比了不同酶、不同消化时间、不同日龄对猪骨骼肌卫星细胞分离和培养的影响。结果显示：不同胶原酶和胰蛋白酶消化能力不同，II型胶原酶和胰蛋白酶的消化能力较强；猪日龄越小越容易获得大量卫星细胞；II型胶原酶消化之后分离培养细胞的Pax7阳性率更高，进一步利用分离的卫星细胞进行成肌诱导分化，成功诱导肌管形成。本实验为建立快速、简便的猪骨骼肌卫星细胞分离培养方法提供了参考。 相似文献
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牛体外受精胚胎卵裂阶段对其体发育能力影响的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
将经过体外成熟培养（ＩＶＭ），体外受精（ＩＶＦ）后获得的牛早期胚胎，按其所处卵裂阶段的不同，划分为２细胞、３～４细胞和５细胞以上３个试验组，在体外条件十继续培养到发育囊胚和孵化囊胚阶段，以观察在胚胎早期，受精卵裂发育的快慢与其后胚胎所获得的继续发育能力的关系。结果显示，牛早期胚胎体囊胚发育率的高低，与其在体外培养（ＩＶＣ）前卵裂发育的快慢成正比。在ＩＶＦ后４２～４６ｈ处于２细胞、３～４细胞和５细胞 相似文献
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棘球蚴细胞系（株）的培育及其在免疫预防中的应用研究 总被引：5，自引：1，他引：4
用外科方法从临床确诊的细粒棘球棘球病人肝脏取出包囊、以生发层为培养材料，采用ＲＭＰＭＩ１６４０、１９９、改良伊格水解乳蛋白培养基，用胶原蛋白包被和不包被两种培养瓶，对细粒棘球蚴生发层细胞进行和初培养，并进行了对比观察，结果显示，以胶原蛋白作支撑条件，应用改良伊格水解乳蛋白培养基培养生发层细胞的效果优于其他，并已传７代，原代培养时间需要２８－４５ｄ才能传代，３代以内细胞为多形态性。 相似文献