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转基因检测以外源DNA、蛋白质等为检测对象,以定性和定量PCR技术、酶联免疫吸附技术为主要检测手段,最终判断样品中转基因成分组成及其含量。进行转基因检测的机构是转基因生物安全监管的重要技术支撑,应当确保检测结果可靠、准确。能力验证是实验室内部和外部质量控制的有效手段,监管机构借此来确定检测实验室的能力和水平。当前,中国转基因检测能力验证的组织水平与国外相比还有较大差距。介绍了国外一些机构如Fapas、GIPSA、ISTA组织转基因能力验证工作的流程,其共同点都是盲样检测,对阳性成分进行定值,并以离散度来判定结果。同时,介绍了中国农业部和质检系统组织能力验证的通常做法,以期提出进一步加强我国转基因检测能力验证工作的对策和建议。 相似文献
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随着转基因水稻研究在世界范围内的研究和开发,以及转基因水稻商业化的争议性加剧,相关部门对粮食安全、食品安全更加关注,农业科研单位检测转基因水稻也将具有重要意义。参照农业部的质检标准书和转基因PCR检测中的实践经验,对抗虫转基因水稻在转基因检测中可能出现的问题进行了技术层面和理论层面分析;同时对转基因抗虫水稻的启动子、终止子、内参基因、靶基因等几个元件的检测分别进行探讨,并重点分析了启动子和终止子的检测工作,根据研究者的工作经验报道,从植物病毒学原理和植物基因工程的理论角度,提出了对转基因PCR定性检测中可能遇到问题的解决方案。 相似文献
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基于Special-Base模型检测转基因作物nos/plamid构建特异性 总被引：1，自引：1，他引：0
以转基因作物中常见的nos/plamid构建特异性序列为研究对象,通过同源性比较和焦磷酸测序dispensation order设计,建立Special-Base焦磷酸测序检测模型;利用转基因大豆Roundup Ready Soybean和转基因玉米Bt11、GA21、NK603等4种转基因作物为试验材料,针对nos/plamid构建特异性序列设计引物,经复合PCR扩增及焦磷酸测序,验证Special-Base焦磷酸测序检测模型有效性。结果表明:本研究建立的Special-Base焦磷酸测序模型能检测出样品中单一或多种转基因作物成分,提高了转基因作物检测的精确性、检测通量和自动化程度。 相似文献
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能力验证活动能够及时发现实验室存在的系统误差,实时监测实验室运行状态,并提供客观、公正、科学、准确的检测数据,提高其检测能力水平,从而有效保证检测工作顺利进行。介绍了农产品农药残留检测能力验证过程的试验方法和试验步骤,并通过结果的分析,探讨了农产品农药残留检测能力验证的关键技术要点。 相似文献
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过量表达蔗糖转运蛋白基因增强转基因小麦的耐旱性 总被引：2，自引：0，他引：2
【目的】创制过量表达TaSUT1A的转基因小麦,分析TaSUT1A在转基因小麦中的遗传及其对干旱胁迫的应答反应,选育抗旱的转基因小麦新种质。【方法】采用基因重组技术构建了TaSUT1A表达载体,利用基因枪介导法将该载体转入小麦品种科农199,通过Bialaphos筛选、转化植株基因组DNA PCR验证获得转基因T0植株;利用RT-PCR检测TaSUT1A在转基因T3植株中的表达情况,在此基础上,对3个转基因系的T4转基因植株进行抗旱性鉴定和抗旱相关生理指标分析,验证其抗旱能力。【结果】经PCR检测和RT-PCR验证,获得了转TaSUT1A小麦阳性植株,与非转基因对照相比,20%PEG胁迫处理显著诱导了转基因株系根叶组织中目标基因TaSUT1A的上调表达。抗旱鉴定和抗性生理分析显示,在20%PEG胁迫处理下,转基因株系的萌发率比非转基因对照平均提高了32.8%,显著高于非转基因对照,并促进初生根的萌发和生长,初生根长和胚芽鞘长比非转基因对照平均增加了81.72%和170.77%;在20%PEG胁迫处理下,转基因植株叶组织中的蔗糖和可溶性糖平均提高了42.95%和36.56%,根中蔗糖和可溶性糖平均提高了58.01%和43.01%,均显著高于非转基因对照植株;与未胁迫处理相比,20%PEG胁迫处理后非转基因植株叶中的SOD活性由105.4 U·g-1FW升高到139.1 U·g-1FW,而转基因植株的活性由107.7-115.3 U·g-1FW提高到168.2-211.6 U·g-1FW,显著高于非转基因对照,同时,转基因小麦株系的MDA的产生较非转基因对照平均降低了37.47%,显著减少了MDA的产生。【结论】TaSUT1A在参与植物的逆境应答反应机制中具有重要作用,促进逆境胁迫中小麦的萌发和生长,超量表达TaSUT1A可显著提高转基因小麦的耐旱能力。 相似文献
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《江苏农业学报》2018,(6)
为解决转基因农产品检测中阳性标准物质匮乏的问题,利用重叠PCR技术将检测过程中常用的调控元件Ca MV35S启动子、FMV35S启动子、PAT29启动子、Ubiquitin启动子、NOS启动子、35S终止子、NOS终止子和E9终止子依次连接获得融合片段,再利用分子克隆技术将融合片段转化到载体p MD-19T中,获得含有调控元件的标准质粒p MD-RG。PCR和测序结果验证了标准分子构建的正确性,并且标准质粒的均匀性和稳定性比较好,符合标准物质候选物的要求,可代替阳性标准物质用于转基因成分的检测和研究。该质粒可用于大多数已经批准的转基因作物的检测和监管工作中。 相似文献
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CaMV35S启动子及其在转基因作物中的应用和检测 总被引：1，自引：0，他引：1
花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)是植物基因工程中应用最广泛的启动子之一,它在转基因植物的安全评价及检测研究中具有重要意义。了解CaMV35S启动子的起源及其发展情况,是开展转基因安全评价和检测的前提。文章对CaMV35S启动子的发展历史及其结构、功能作了简要描述,分析总结了CaMV35S启动子在转基因作物中的应用情况和目前对其相应的检测方法。针对目前在转基因作物中检测CaMV35S启动子存在的问题,认为今后转基因相关作物的序列信息及检测数据需要交流和共享,同时各个检测机构或实验室之间需要展开数据共享与共同验证,从而建立针对CaMV35S启动子的相对统一的标准检测方法。 相似文献
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我国农业转基因生物安全检测机构体系运行现状分析 总被引：1，自引：1，他引：0
农业转基因生物安全检测机构体系是我国转基因生物安全管理技术支撑体系的重要组成部分。文章系统回顾了我国农业转基因生物安全检测机构在布局、条件建设、质量认证、运行模式、检测能力等方面的建设情况,全面总结了检测机构在我国转基因生物安全行政监管、安全评价、标准研制、风险交流等方面发挥的作用,深入剖析了检测机构在地域分布、质量法律意识、运转效率方面存在的不足及原因,并从完善机构布局、提升质量法律意识、提高运转效率、构建网络体系等方面提出了相关对策和建议。 相似文献
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国外转基因生物安全检测机构发展现状及趋势 总被引：5，自引：4，他引：1
转基因生物安全管理技术性强,需要建立以配套设施完善、技术水平先进的转基因生物安全检测机构为基础的技术支撑体系。在调研国外100余家转基因检测机构概况基础上,系统研究和分析了主要国家和地区检测机构的发展现状和趋势,按建设和运行经费来源,将国外检测机构分为政府投资型、企业投资型、自筹经费型3种类型,并对不同类型检测机构的综合能力做了分析。结合我国转基因生物安全管理工作实际需要,从硬件建设、质量管理、业务水平、人才队伍、网络体系等5个方面,提出了我国检测机构建设和发展的相关对策与建议。 相似文献
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转Hu-IFN-α基因草鱼的分子验证及抗性研究 总被引：4，自引：1，他引：4
采用显微注射法将人α-干扰素抗病基因转移到草鱼受精卵中,获得转基因群体,通过PCR及Southern杂交对转基因草鱼进行分子水平的检测,以进一步验证外源人α-干扰素是否整合入草鱼基因组.结果表明,外源人α-干扰素抗病基因已整合人草鱼基因组中.采用腹腔注射法,对转基因鱼进行草鱼出血病病毒接种攻毒试验,结果显示转基因草鱼比对照组的抗病毒能力有显著提高. 相似文献
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当前,在现代化的转基因种子检测过程中,不但应当明确检测的技术重点和难点,而且应当对常用的技术手段和工作方式等进行综合性的分析,以更好地实现转基因种子检测质量的增强和改进。基于此,详细的分析了当前现代化的转基因种子检测技术手段和工作方式;同时,对工作开展过程当中应当注重的核心问题以及工作的主导思想等进行了综合性的分析,旨在更好地实现对相关技术和事业的改革。 相似文献
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国外转基因植物检测技术及其标准化研究综述 总被引：9，自引：1，他引：9
转基因生物安全管理技术性强,只有建立起配套完善的技术支撑体系作为后盾,才能保证法律法规和管理制度的顺利实施。开展转基因生物检测技术及其标准化研究,既是技术支撑体系建设需要,又是基础性工作,借鉴国外先进经验和成功做法,对我国开展相关工作具有重要意义。文章以转基因植物为对象,通过系统研究,分析了当前国外检测技术研究及其标准化工作的发展现状与趋势,总结了相关国际组织和发达国家的主要做法与经验,针对我国开展转基因生物检测技术标准化的需要,提出了加强检测技术研究及其标准化的对策与建议,希望对我国转基因生物安全管理工作有所裨益。 相似文献
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转Hu—IFN—α仅基因草鱼的分子验证及抗性研究 总被引：1，自引：2，他引：1
采用显微注射法将人α-干扰素抗病基因转移到草鱼受精卵中，获得转基因群体，通过PCR及Southern杂交对转基因草鱼进行分子水平的检测，以进一步验证外源人α-干扰素是否整合入草鱼基因组。结果表明，外源人α-干扰素抗病基因已整合入草鱼基因组中，采用腹腔注射法，对转基因鱼进行草鱼出血病病毒接种攻毒试验，结果显示转基因草鱼比对照组的抗病毒能力有显著提高。 相似文献
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转基因玉米种子的PCR检测 总被引：2，自引：2，他引：0
以PCR技术为基础,建立了检测玉米种子中转基因成分的方法。对提取的基因组DNA进行PCR以扩增玉米内源基因zSSIIb,设计了常见的CaMV 35 S启动子、NOS终止子、Bar终止子、Bt,进行了初步的定性筛选,并用Bt176对阳性结果进行验证,结果表明:这是一套转基因玉米定性PCR检测方法,具有较高的准确性、可靠性,可以用于转基因玉米种子及其产品的筛查、抽检。 相似文献
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四种转基因玉米新型质粒标准分子协同实验验证 总被引：4，自引：1，他引：3
构建了分别适于转基因玉米GA21、TC1507、T25和Bt11品系特异性双重PCR检测标准分子,并对其在定性PCR检测体系中的适用性进行了实验室间协同实验验证。对7家实验室返回结果的统计分析表明,标准分子pBt11、pTC、pT25和pGA分别对转基因玉米Bt11、TC1507、T25和GA21品系具有高特异性。4个标准分子在zSSⅡb和对应品系特异性序列单一PCR检测体系中检测下限均为50拷贝。因此,4个标准分子均可作为新型标准物质用于相应转基因玉米品系特异性定性检测。 相似文献