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Ac/Ds转座子作为研究较为深入的植物转座子,已被广泛应用于植物功能基因组研究.利用Ac/Ds标签系统构建插入突变体库是研究功能基因组学的有效途径,也是进行基因克隆及功能分析的有利工具.结合课题组利用Ac/Ds转座子标签分离基因并进行基因功能验证方面的研究工作,综述了Ac/Ds转座子在植物基因组中的插入特点、转座机制以及转座子标签法的应用与发展前景,为更有效的利用Ac/Ds转座子提供参考依据. 相似文献
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随着植物基因组测序工作的迅速发展,植物功能基因组学已经成为植物分子生物学研究的重要内容,而大量有表型的突变体是进行功能基因组学研究的重要基础。Ac/Ds转座子激活标签技术(Ac/Ds transposonactivation tagging system)的产生使Ac/Ds转座子标签技术具有了产生显性突变的功能,并可避免在突变体库创建过程中进行大量繁重的人工转基因操作,是比较理想的植物功能基因组学研究工具。本文将对Ac/Ds转座子激活标签技术在发展过程中利用不同激活标签创建植物突变体库的研究进行介绍,并对近二十几年来报道的相关应用研究展开论述,以期对该领域的技术进步和应用研究提供一些有益的启发和参考。 相似文献
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针对链霉菌中现有转座子系统的一些缺陷,构建了一个链霉菌中的微型转座子质粒pHL265,它携带的转座酶基因tnpA在转座子mini-Tn4560A外部,降低了发生二次转座的可能性,并带有大肠杆菌与链霉菌进行属间接合转移的起始位点oriT,可通过接合转移的方式将其从大肠杆菌导入到链霉菌中.利用该转座子系统转座筛选得到天蓝色链霉菌M145的约1 000株转座突变株.选取其中的8株,经Southern杂交验证可知,该转座子的转座基本具有随机性,并在宿主DNA中稳定存在.此系统为链霉菌功能基因组的研究提供了新的技术手段. 相似文献
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转座子在被发现具有转座功能以前,被看作是作用在个别基因或整个基因组结构不寻常的诱变因素。在玉米中首先发现和认识转座子特征后,已在所有生物中发现其的存在,包括已研究的植物物种。在带有大而复杂基因组的植物中,转座子占核DNA的组成超过50％,但对每一个物种而言,尚缺乏有关转座子对许多物种适应性具有促进作用的证据。在每一植物物种中, 相似文献
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随着油菜基因组测序工作的完成和后续完善,油菜功能基因组学必将成为研究热点,如何构建高通量的突变体库则是影响其进展的关键.Ac/Ds( Activator/Dissociation)系统是构建插入型突变体库的理想技术,在水稻(Oryza Sativa)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)等异源植物中应用较广,但在油菜中尚处于起步阶段.文章介绍了Ac/Ds系统的结构特点、转座机理等基本概况,阐述了利用Ac/Ds系统构建植物突变体库的优势及存在的问题.结合模式植物水稻和拟南芥的研究成果,进一步分析了利用Ac/Ds系统构建油菜突变体库的改进策略,并对其在油菜功能基因组研究中的应用前景进行了展望. 相似文献
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为培育高度抗逆和无选择标记的转基因小麦,本研究从NCBI数据库中搜索到ThIPK2基因序列,依据该基因编码的氨基酸序列,参照小麦偏爱的密码子对该基因进行密码子优化,并将重复的和不必要的酶切位点去掉后进行人工合成。将改造后的ThIPK2基因插入到强启动子Ubiquitin和终止子AtSac66之间,然后将其插入到含有玉米Ac/Ds转座子背景骨架的植物表达载体中,获得了具有删除选择标记功能的、由玉米Ubiquitin启动子驱动ThIPK2基因的植物表达载体。经过限制性内切酶分析鉴定,该植物表达载体构建成功。 相似文献
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农杆菌介导Cry1 Ab/Ac抗虫转基因玉米植株的获得 总被引：1，自引：0，他引：1
转基因技术的迅速发展有效地打破了物种间的遗传壁垒,从而加快了优良基因定向聚合的进程,然而遗传转化率低及转基因安全问题成为制约其进一步发展的限制因素。基于此,本研究以玉米自交系H99为材料,将Ac/Ds双元表达载体(包含抗虫Cry1 Ab/Ac基因和gfp报告基因等)通过农杆菌介导法转入由110粒玉米幼胚诱导出的愈伤组织中,获得28株抗性转基因植株。经PCR及RT-PCR的验证结果显示,其中8株为含有Cry1 Ab/Ac目的基因且该基因有效表达的阳性植株,转化效率达7%。通过农杆菌介导法所获得的玉米转基因植株为今后剔除抗生素筛选标记,从而获得安全的玉米抗虫新种质提供了遗传材料。 相似文献
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Ca~(2+)对水稻Ac/Ds愈伤组织增殖·分化及生根的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
[目的]研究Ca2+对水稻Ac/Ds愈伤组织增殖、分化及生根的影响。[方法]选用水稻品种Dongjin的Ac/Ds插入突变株系的种子,从成熟胚盾片诱导出愈伤组织,在筛选出的最适增殖、分化及生根培养基中添加不同浓度的Ca2+,研究Ca2+对水稻愈伤组织增殖、分化及生根的影响。[结果]适当增加Ca2+浓度能提高水稻愈伤组织的相对生长量、分化率、再生植株生根条数及根长,当Ca2+浓度为6.0mmol/L时效果最佳,当Ca2+浓度为7.5~15.0 mmol/L时水稻愈伤组织的相对生长量、分化率、再生植株的生根条数及根长呈下降趋势。[结论]适当增加培养基中Ca2+浓度可提高水稻Ac/Ds愈伤组织的相对生长量、分化率、再生植株生根条数及根长。 相似文献
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The self-mobile maize transposable element Ac (Activator) displays two trans-acting genetic functions: it induces transposition of the element Ds (Dissociation) but, as its dosage is increased, it also inhibits transposition. Previous work has shown that the 4563 base pair (bp)-long Ac element contains three open reading frames (ORF's) and that a deletion in ORF 1 in wx-m9(Ds), a Ds derivative from Ac isolated at the wx (waxy) locus, results in loss of transposition. The Ds element in the bronze allele bz-m2(DI) is shown to have arisen from Ac by a 1312-bp deletion that is located almost entirely within ORF 2 and does not affect ORF 1. The Ds elements in wx-m9(Ds) and bzm2(DI), defective in ORF 1 and ORF 2, respectively, do not complement genetically to restore the transposition function of Ac; therefore, this function must be specified jointly by ORF's 1 and 2. Furthermore, since bz-m2(DI) does not contribute to Ac's inhibitory dosage effect, both Ac properties result from the expression of the same genetic functional unit. 相似文献
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Kermicle JL 《Science (New York, N.Y.)》1980,208(4451):1457-1459
Three instances of R gene instability were found in maize stocks carrying the controlling elements Dissociation (Ds) and Modulator (Mp). In each, Ds or a Ds-like element had transposed to R, inhibiting kernel pigmentation irregularly. When Mp was removed from the genome, R expression stabilized at lowt to intermediate levels. Strong pigmenting action was restored through recombination in heterozygotes of the three new forms with an R allele that specifies only plant pigmentation. The sites of Ds insertion mapped distal to the region that specifies seed versus plant expression. The evidence suggests that an R functional unit consists of one component that both governs tissue-specific expression and another that is common to alleles of different tissue-specific activities. 相似文献
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The ability of transposable elements (TEs) to insert into or excise out of a genetic locus can be regulated by genetic, environmental, and developmental factors. Tissue- or organ-specific activity of TEs is a frequent and well-characterized example of spatial, developmental regulation. Regulation of the timing of TE activity during ontogeny is less well understood. To analyze timing, TE-induced variegation was quantified in the aleurone of maize kernels, a tissue composed of only a single layer of cells, and sector sizes were assigned to specific cell divisions in aleurone development. Three TE families, Mu, Spm, and Ac/Ds, were studied at two genetic loci. It was found that the frequency of transposon excision changes drastically (up to 30-fold increase or equivalent decrease) during the proliferation of the aleurone. Moreover, these changes occur at the same cell divisions in all three TE families. These results suggest that the timing of TE excision during maize development can be controlled by the host. 相似文献
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为了找到根结线虫诱导的烟草根结内特异性强启动的启动子和了解巨型细胞被诱导形成的分子机理,用无启动子的报告基因(GUS)及旁边的Ds转座子,分离烟草根结内巨型细胞特意启动子.将p13DGUTs转烟草叶片,获得了转基因植株.通过根结线虫感染盆载转基因烟草后,分别检测根系、叶的报告基因的表达情况.结果显示,从转基因植株中筛选到只在根结巨型细胞内表达的转基因植株. 相似文献