共查询到20条相似文献，搜索用时 25 毫秒
1.
为探讨细胞培养基中血清浓度对鸡盲肠上皮细胞体外培养的影响,分别用含0%、2.5%、5%和10%胎牛血清(FBS)的细胞培养液培养鸡胚盲肠上皮细胞,检测细胞活性;选择适宜的FBS浓度,并测定了该浓度条件下鸡盲肠上皮细胞的生长特性。结果表明:用含2.5%和5%FBS的培养基培养鸡胚盲肠上皮细胞,第4天细胞贴壁率达最高,分别为84%和80.33%,显著地高于无血清和10%FBS组(P<0.01/0.05),第7天仍均维持在76%以上,两者间除了第2天外,其余差异均不显著;用含2.5%FBS的细胞培养基进行鸡胚盲肠上皮细胞原代培养,第2~3天为适应阶段,第3~5天处于对数生长期,第5~9天细胞进入减速期,第10~11天再次进入对数生长期,第11天以后细胞进入衰退期,整个过程持续14 d左右。鸡胚盲肠上皮细胞培养的血清浓度以2.5%FBS为宜。 相似文献
2.
ZHAO He ;WANG Xiao-xuan ;DU Yong-chen ;ZHU De-wei ;GUO Yan-mei ;GAO Jian-chang ;LI Fei ;John C Snyder 《农业科学学报》2014,13(10):2122-2131
In order to determine the potential for haploid induction via in vitro gynogenesis in tomato, the ovules and protoplasts of embryo sacs from the hybrids Zhongza 101 and Zhongza 105 were cultured. An efficient method of ovule isolation was established in this study. Using this method, 100-150 ovules could be isolated from one ovary. Isolated ovules were cultured on three induction media to induce gynogenesis in vitro. During culture, ovules were enlarged markedly, with opaque white color. When observed microscopically, there were cell divisions and cell clumps in embryo sacs. Subsequently, the cell clumps in embryo sacs ceased growth, likely because the integument grew faster than embryo sacs did and hindered the fiarther development of embryo sacs. Therefore, subsequent callus morphogenesis might be originated from the integument. Thousands ofcalli from the two tomato varieties were obtained. Five diploid plants were regenerated after 15 months of subculturing. To eliminate the hindering effect of integument on embryo sac cells, the protoplasts of embryo sacs were prepared and cultured. After 48 hours of culture, the protoplasts of embryo sacs doubled in size and gradually formed clusters of cells. These results suggested that gynogenesis might be a potential way for haploid induction in tomato. 相似文献
3.
胚发育指数分别为0.15和0.40的‘西农早蜜’桃幼胚在胚珠离体培养条件下维持胚性生长,转移胚培养后各获得77.8％和100％的成苗率,克服了桃幼胚营养中存在的早熟萌发、成苗率低等问题。此外,取盛花后10d(胚处于二细胞原胚期)、17d(球形胚)、24d(球形胚)、31d(心形胚)、38d和45d(肉眼看不到的幼胚)的胚珠进行培养,分别获得1.7％,3.4％,14.3％,22.4％,53.4％和57.9％的成苗率,为克服李属果树种间杂交桃胚早期败育的障碍,提供了新方法。本文还研究了影响胚珠培养的有关因素。 相似文献
4.
昆明小鼠单细胞胚胎体外培养的研究 总被引：6，自引：0，他引：6
本试验研究了葡萄糖、EDTA和小鼠血清对昆明小鼠单细胞胚体外发育的影响.结果发现:不含葡萄糖HECM-1组桑椹率为40.05％,对照组为8.14％;含EDTA的CZB组桑椹率为61.18％,对照组为47.44％;小鼠血清对昆明小鼠单细胞胚体外发育无促进作用。可见,葡萄糖抑制昆明小鼠单细胞胚胎体外发育;在不含葡萄糖的条件下,EDTA支持小鼠早期胚胎体外发育;无论有无葡萄糖小鼠血清对小鼠早期胚体外发育无促进作用。 相似文献
5.
[目的]分离培养并鉴定欧拉羊胚肾细胞,为该品种基因组文库构建和遗传多样性研究提供生物学材料。[方法]用胰蛋白酶热消化法分离并培养欧拉羊胚肾原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞,扩大培养至第3代用液氮保存,细胞复苏后进行活力、形态、生长曲线、微生物污染检测和连续传代培养试验。[结果]欧拉羊胚肾细胞呈成纤维型,复苏活力90%以上,生长良好,生长曲线呈"S",最大增殖浓度为4.61×105/ml,倍增时间26 h;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性,连续传代培养在10代内生长正常。[结论]欧拉羊胚肾细胞分离培养成功,使这一重要种质资源在细胞水平上得以保存。 相似文献
6.
利用机械方法二等份分割小鼠的桑椹胚、早期囊胚和晚期囊胚,并在体外培养分割的半胚到晚期囊胚。将这些囊胚移植到假孕受体鼠子宫内以评价他们附植后发育的能力。在体外培养中发现,囊胚期分割的胚胎比桑椹胚期分割的胚胎有较高的成活率。通过附植前胚胎细胞数量分析得知,囊胚期半胚的细胞数量大约是对照组的一半,但内细胞团细胞与整个胚胎细胞的数量比不变。虽然从半胚发育到囊胚期的胚胎附植率仅略低于对照组,但半胚形成胎儿的能力却显著低于全胚。组织学分析表明,附植后的这种低成活率现象是由于缺乏卵柱发育造成的,而此卵柱则与半胚中的内细胞团的细胞数量减少有关。移植到第3天假孕受体鼠中的半胚,附植后的发育情况明显地比移植到第4天受体中的好。 相似文献
7.
为了探讨神经干细胞(Neural stem cells,NSCs)在体外培养中的生物学特性,研究不同细胞因子对NSCs分化的影响,试验对大鼠胎儿神经干细胞进行了分离培养,并研究了10,50和100 ng/mL的神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain derived neruotrophic factor,BDNF)和胶质源性神经生长因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对NSCs的定向诱导分化作用。结果表明,大鼠胎儿NSCs可在体外增殖并形成典型的神经球,指数增长期在传代后的第4~5天;10和50 ng/mL的NGF、BDNF和GDNF对NSCs的诱导分化作用不明显,100 ng/mL的NGF、BDNF和GDNF可诱导NSCs分化为神经元或胶质细胞。说明NGF和BDNF可诱导NSCs向神经元方向分化,GDNF诱导其向胶质细胞分化。 相似文献
8.
The cholinergic neuronal differentiation factor from heart cells is identical to leukemia inhibitory factor 总被引：46，自引：0，他引：46
T Yamamori K Fukada R Aebersold S Korsching M J Fann P H Patterson 《Science (New York, N.Y.)》1989,246(4936):1412-1416
A protein secreted by cultured rat heart cells can direct the choice of neurotransmitter phenotype made by cultured rat sympathetic neurons. Structural analysis and biological assays demonstrated that this protein is identical to a protein that regulates the growth and differentiation of embryonic stem cells and myeloid cells, and that stimulates bone remodeling and acute-phase protein synthesis in hepatocytes. This protein has been termed D factor, DIA, DIF, DRF, HSFIII, and LIF. Thus, this cytokine, like IL-6 and TGF beta, regulates growth and differentiation in the embryo and in the adult in many tissues, now including the nervous system. 相似文献
9.
Ca对离体筛选耐盐大豆再生植株的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
大豆小复叶外植体在含ＮａＣｌ２５、５０、７５和１００ｍｍｏｌ／Ｌ并加Ｃａ（ＮＯ３）２１０ｍｍｏｌ／Ｌ的培养基中，大豆离体胚在含ＮａＣｌ５０和１００ｍｍｏｌ／Ｌ并分别加Ｃａ（ＮＯ３）２、１０、１５和２０ｍｍｏｌ／Ｌ的培养基中进行耐盐筛选培养。实验结果表明，在盐胁迫下加Ｃａ有缓解盐害的效应．小复叶外植体在较高浓度盐胁迫下的出愈率和根、芽分化率增高；对离体胚在盐胁迫下的生长有促进作用，ＮａＣｌ５０盐胁迫下以Ｃａ１５效果最佳。ＮａＣｌ１００盐胁迫下，以Ｃａ２０效果较好．在盐胁迫下加Ｃａ可减少离体胚再生植株中Ｎａ＋和Ｃｌ－的积累，而增加Ｃａ＋和Ｋ＋的积累，并使ＭＤＡ含量减少．因而有减轻Ｎａ＋和Ｃｌ－毒害和膜脂过氧化的作用。 相似文献
10.
收集26-27d的猪胚胎分离原始生殖细胞(Primordial germ cells，PGCs)，培养在STO细胞饲养层上生长，形成EG细胞。EG细胞具有干细胞所具有的显著特性，形态，多能性和种系的延续，AKP染色阳性，并能在体外分化；分别将PGCs用三种不同的培养基培养，在形成EG细胞集落的数量和EG细胞分化上有着明显的差距，说明血清的质量和浓度以及细胞因子对干细胞的生成和增殖有着重要的作用。 相似文献
11.
本文介绍了用小麦体细胞离体培养的成苗技术,并明确用未成熟胚、幼穗以及嫩叶作外植体均可形成愈伤组织,但只有未成熟胚和幼穗的愈伤组织才分化出幼苗。幼穗的发育阶段对愈伤组织的形成无影响,但未成熟胚却不一样,采样过早不能长出愈伤组织,过迟自外植体直接长出幼苗数量多,影响愈伤组织的形成。研究认为以授粉12—14天的未成熟胚做外植体最好,愈伤组织形成的多,直接长出幼苗的外植体数量少。用根腐病菌毒素作选择压力,6%的毒素压力幼胚外植体可诱导成苗,12%的毒素压力虽也可形成愈伤组织,但未能获得成活的幼苗。品种对真菌毒素的耐力可能不同,因而各自的外植体及其愈伤组织对毒素的耐力也可能不一样,所以用毒素选择压力强度应根据品种确定。 相似文献
12.
13.
14.
15.
[目的]探讨Roscovitine同期化供核细胞对食蟹猴—猪异种体细胞核移植胚胎体外发育的影响,为提高灵长类的核移植效率奠定基础.[方法]活体采集4岁雄性食蟹猴的耳组织,经组织块培养获得纯化的食蟹猴耳成纤维细胞,细胞经固定、染色后用流式细胞仪分析细胞周期分布.以不同同期化方法处理的食蟹猴耳纤维细胞为供体细胞,以体外成熟、去核的猪卵母细胞为受体细胞,利用电融合法构建食蟹猴—猪异种核移植胚胎,观察异种核移植重构胚胎的体外发育情况.[结果]以15 μmol/L Roscovitine处理食蟹猴耳成纤维细胞24、48、72 h获得的G0/G1期细胞比率分别为76.51％、89.69％和90.49％,其中处理48和72h的G0/G1期细胞比率显著高于对照组（P＜0.05）.血清饥饿、接触抑制72 h同期化获得的G0/G1期细胞比率分别为91.12％和90.46％.Roscovitine同期化处理食蟹猴耳成纤维细胞48 h可有效提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率（15.05％）,显著高于血清饥饿同期化处理和接触抑制同期化处理的效果（P＜0.05）.[结论]Roscovitine可有效同期化食蟹猴耳成纤维细胞在G0/G1期,最终提高食蟹猴—猪异种核移植重构胚胎的囊胚形成率. 相似文献
16.
鸭胚肝细胞培养的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
取１５日龄左右的鸭胚肝脏，经清洗、剪碎后，加入最终浓度为０．１２５％的胰酶，３７℃消化１５～２０分钟，以含犊牛血清的１９９培养基为营养液，置含５％ＣＯ＿２培养箱内培养７２小时，可制成鸭胚肝细胞单层培养物，若向培养基中加入１０％的鸭胚尿囊液，能促进细胞的生长，接种鸭肝炎病毒后，感染细胞可在４８小时出现ＣＰＥ，９６小时形成空斑。 相似文献
17.
用胰蛋白酶对欧拉羊胎儿皮肤组织进行热消化分离并培养原代细胞，通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞，扩大培养至第3代时用液氮保存，复苏后进行活力、形态、生长曲线、微生物污染检测和连续传代培养试验。结果显示，欧拉羊胎儿皮肤细胞呈成纤维型，复苏活力93.5%以上，生长良好，细胞生长曲线呈“S”型，最大增殖量为3.31×105 mL-1，倍增时间为26.2 h；细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性，连续传代培养在10代内生长正常。表明欧拉羊胎儿皮肤细胞分离培养成功，使这一重要种质资源在细胞水平上得以保存。 相似文献
18.
鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定 总被引：5，自引：0，他引：5
从18日龄鸡胚长骨（股骨和胫骨）中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法。结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜（TEM）和扫描电镜（SEM）对其形态和功能进行观察鉴定。结果表明,直接分离的细胞具有典型的破骨细胞的形态特点：属多核大细胞,TRAP染色阳性,能在骨片表面形成吸收陷窝。结论：鸡胚长骨机械分离法可获得一定数量并具有骨吸收活性的破骨细胞。 相似文献
19.
Cerebral white matter from a patient with metachromatic leukodystrophly was successfully cultured in vitro. A luxuriant growth in Rose chambers and in roller tubes was apparent by the 14th day. The outgrown cells contained large numbers of granules which stained dark brown with cresyl violetacetic acid. The growth and metachromasia were maintained up to 80 days in vitro. 相似文献