超声波对淀粉酶催化活性的影响   总被引：11，自引：0，他引：11  

陈小丽黄卓烈  巫光宏何平詹福建  丘泰球 《华南农业大学学报》2005,26(1):76-79

为了探索不同参数超声波对淀粉酶活性的影响效果,将水稻淀粉酶经分级盐析初步纯化后,用DEAE-纤维素进行柱层析,层析结果分离出两个蛋白峰,第1个蛋白峰无酶活力;第2个蛋白峰有很高的酶活力,且酶活力峰与蛋白峰吻合,将此峰中蛋白成分进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳结果显示的蛋白带比粗酶的蛋白带明显减少,经柱层析后淀粉酶被纯化13．726倍,将部分纯化的淀粉酶用适宜参数的超声波处理可以使酶活力提高9．09％-33．09％。  相似文献   

树莓超氧化物歧化酶的分离纯化和部分性质研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘春菊  孟宪军  宣景宏 《西北农业学报》2006,15(3):142-144

树莓SOD粗酶液经硫酸铵分级沉淀、SephadexG-100柱层析,同时对比DEAE-52柱层析和金属螯合亲和柱层析,并对其部分性质做了研究。从树莓中纯化得到3种Mn-SOD同工酶:SODⅠ、SODⅡ、SODⅢ。结果表明经金属螯合亲和柱层析的回收率和纯化倍数远高于DEAE-52柱层析。3种SOD对KCN和H2O2均不敏感,最大紫外吸收峰均为280 nm,SODⅠ和SODⅡ受温度影响较小,SODⅢ受温度影响稍大,pH值在7~9范围内3种SOD的相对酶活力较高。  相似文献   

稻田Dactylosporangium aurantiacum菌中脲酶的纯化与性质研究     

彭仁  汪金莲  刘家龙  邱业先  卢向阳  罗泽民 《江西农业大学学报》2002,24(5):595-598

经磷缓液提取 ,乙醇沉淀 ,超滤去杂 ,然后经CM -纤维素柱层析 ,DEAE -SephadexA -5 0柱层析纯化了Dactylosporangiumaurantiacum菌脲酶 ,纯化倍数达 5 0 .0 1 ,活力回收率为 1 7.81 %。经SDS -PAGE垂直平板电泳测得其分子量为 42 0 0 0。经氨基酸组成分析 ,该酶含 2 71个氨基酸残基 ,该酶的紫外吸收峰为2 75nm。  相似文献   

稻田Dactylosporangium aurantiacum菌种脲酶的纯化与性质研究     

彭仁  刘家龙 《江西农业大学学报》2002,24(5):595-602

经磷缓液提取，乙醇沉淀，超滤去杂，然后经CM-纤维素柱层析，DEAE-SephadexA-50柱层析纯化了Dactylosporangium aurantiacum菌脲酶，纯化倍数达50.01，活力回收率为17.81%，经SDS-PAGE垂直平板电泳测得其分子量为42000。经氨基酸组成分析，该酶含271个氨基酸残基，该酶的紫外吸收峰为275nm。  相似文献   

超声波对海芋过氧化物酶催化活性影响的机理   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

许可  黄卓烈  邱桂英  巫光宏  詹福建  何平 《华南农业大学学报》2007,28(4):60-64

从海芋叶中分离和纯化过氧化物酶(POD),研究了不同参数超声波对其活性作用效果.结果表明,经不同频率、功率超声波处理不同时间后,酶活性均比未经超声波处理的活性低.将粗酶经硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-纤维素离子交换柱层析,在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上显示出1条蛋白带.对纯酶进行动力学分析,结果表明,超声波处理后,POD的Km值变大,而vmax值变化不大,说明超声波处理使酶与底物的亲和力降低.紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱的研究进一步表明,超声波处理使酶分子的构象发生变化,从而导致酶活性的改变.  相似文献   

芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅰ的分离纯化及部分性质     

贺字典  孙换顷  高玉峰 《西北农业学报》2006,15(4):156-159

将从芦荟叶中提取的SOD溶液,通过丙酮沉淀、热变性、DEAE-琼脂糖柱层析s、ephacryl S-200凝胶过滤,获得芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅰ电泳纯产品Fe-SOD。该同工酶经凝胶过滤测定全分子量为46 kD及SDS-PAGE测得亚基分子量为23 kD,由2个亚基组成。经等电点聚焦电泳测得该SOD酶同工酶Ⅰ的等电点为pH8.9。  相似文献   

枇杷果肉过氧化物酶的分离纯化及其性质研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

林建城  吴智雄  彭在勤 《四川农业大学学报》2007,25(4):419-424

枇杷果肉制成丙酮粉,通过硫酸铵沉淀分级分离、透析、DEAE-纤维素离子交换柱层析纯化,获得两个酶活力峰,第二活力峰的酶制剂经过PAGE和SDS-PAGE电泳获得单一纯的过氧化物酶(PODⅡ),纯酶比活力为710.5U/mg。酶亚基分子量为22.6kDa,等电点pI为3.6。酶的动力学研究表明:酶的最适pH为5.0,在pH2.6～10区域较稳定;酶最适温度是35℃,对热敏感,高于45℃以上酶的稳定性差。酶对愈创木酚和H2O2的表观Km值分别为20.58和12.04mmol/L,以愈创木酚为底物时,酶比活力最大,其次是苯酚、邻苯二酚、对苯二酚和间苯二酚,酶未能催化以焦性没食子酸为底物的氧化反应。Al3+、Mn2+、Zn2+和Hg2+对酶有抑制作用,Mg2+、Ca2+、Cu2+、Fe2+、Ba2+和Pb2+对酶有激活作用;半胱氨酸等12种化合物对酶活力均有不同程度的抑制作用,在防止或减轻枇杷采后的酶促褐变中将起到重要的作用。  相似文献   

意大利蜜蜂蛹超氧化物歧化酶提取技术研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

杜开书  柴立英  郎剑锋 《安徽农业科学》2006,34(23):6132-6133

以意大利蜜蜂蛹冻干粉为研究材料,经提取、盐析、浓缩、透析和DEAE纤维素离子交换柱层析等纯化步骤,获得了一种超氧化物歧化酶(SOD)。该酶蛋白结晶呈菱形,PAGE法显示为均一的蛋白谱带。在相同时间内,测定了pH值、温度对该酶活力的影响。结果表明:意大利蜜蜂蛹中SOD在pH值为8.3时,酶活力最高,pH值高于或低于8.3时,酶活力均有明显下降;温度在25℃左右时,该酶活力最高,40℃时保持活力在80%以上,到90℃时没有活力,说明意大利蜜蜂蛹SOD是一种比较耐热的酶,这为SOD的提取提供了新酶源。  相似文献   

树莓超氧化物歧化酶部分性质研究     

宣景宏  孟宪军  刘春菊  张春艳 《勤云标准版测试》2007,(4)

超氧化物歧化酶是体内自由基主要清除剂之一,简称为SOD。本文以树莓为原料,对树莓SOD的理化性质进行研究,即SOD敏感性实验,最大紫外吸收峰和温度、pH值及金属离子等因素对SOD的影响,为树莓SOD的进一步深入研究及其在药品、保健食品和化妆品的应用打下基础。三种酶(SODⅠ,SODⅡ和SODⅢ)均对KCN和H2O2不敏感,说明这三种酶都属于Mn-SOD;其最大紫外吸收峰均为280nm;温度对其影响相对稳定,SODⅢ受温度的影响稍大些,而SODⅠ和SODⅡ受温度的影响较小;在pH7～9范围内SOD相对酶活力较高,pH过高或过低SOD均易失活;三种SOD受金属离子的影响没有很大的差异,Al3 、Cu2 、Mg2 、K 、Ca2 、Zn2 都具有一定程度的激活作用,而Pb2 、Fe3 、Sn2 则具有非常明显的抑制作用。  相似文献   

紫外线诱变对平菇菌丝体生长代谢影响的研究     

李秀影 《吉林农业科技学院学报》2016,(4):15-18

通过紫外诱变的方法研究不同时间紫外诱变对平菇菌丝体生长量、干物质重量、可溶性蛋白质含量,以及其对菌丝体生长过程中产生的代谢酶活力的影响,结果表明:当紫外诱变时间达到5min时,平菇长势最好,干物质重量达2.01g,而且菌丝体中的可溶性蛋白含量最高(3.09μg/g).与此同时菌丝体在代谢过程中产生的纤维素酶和超氧化物歧化酶(SOD酶)活力均有显著性提高,与对照相比诱变后纤维素酶的活力提高1.887倍,SOD酶的活力提高了1.29倍.在此基础上进行的遗传稳定性试验表明:平菇菌丝体经过5min诱变后纤维素酶的活力达1.7~1.9倍,SOD酶活力提高了1.2~1.5倍.得出平菇菌丝体经紫外诱变后能够育选出长势更旺,代谢酶活力更强的平菇菌种,为平菇优良菌种的选育奠定了理论基础.  相似文献   

大蒜超氧化物歧化酶的分离纯化及其性质的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

王雪峰  沈颂东  迮玉官  杨龙寿  陈天  张锦云 《安徽农业科学》2001,29(3):408-409

以壳聚糖为基质的金属螯合亲和层析法纯化大蒜SOD ,得到比活为 1191U/mg的酶蛋白 ,回收率为 71% ,纯化倍数为7.2 9。实验表明 ,经 8mol/L的尿素处理后大蒜SOD活性不发生变化 ,并且可耐 6 0℃高温 1h而活性不下降  相似文献   

棉花黄萎病菌拮抗细菌TYG-2抑菌蛋白的分离纯化     

孙瑶 《山西农业大学学报(自然科学版)》2011,31(5):400-407

拮抗细菌TYG-2是从根际土壤中分离得到的一株芽孢杆菌,其菌株发酵液产生的抑菌物质对棉花黄萎菌具有较强的抑制作用。为了得到它的抑菌活性组分,将TYG-2菌株去菌体发酵液经硫酸铵沉淀,得到的沉淀物脱盐后经DEAE-Sepharose Fast Flow分离得到4个组分,经抑菌活性测定得到一个抑菌活性组分,再通过Sephacry S-100凝胶过滤分离得到两个组分P1和P2,经检测表明P1组分对V.dahliae的菌丝生长具有抑制作用,为有效抑菌活性组分。经SDS-PAGE电泳纯化为单一蛋白带,分子量约为30kDa。  相似文献   

蛹虫草超氧化物歧化酶的分离纯化及性质研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

苏瑛  唐咏  王成春 《安徽农业科学》2005,33(8):1388-1389

以蛹虫草为材料,经过硫酸铵盐析、SephedexG!75柱层析和DEAE!52柱层析,得到纯化的超氧化物歧化酶(SOD),经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白区带,此酶比活力为17855.73U/mg,纯化倍数为53.7,回收率为21.8%。该酶在40℃保温150min,活性不变;在pH值5.0～9.0有较好的稳定性。该酶每亚基含1原子铁,对H2O2和乙醇-氯仿溶液敏感。  相似文献   

牛乳中超氧化物歧化酶(SOD)的提纯与鉴定     

孙庆林  常梅秀  周书勤  姜广军 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》1998,(4)

新鲜牛乳经超速离心,氯仿乙醇处理,丙酮沉淀、透析、ＤＥＡＥ纤维素柱层析等步骤使其中Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ得到了纯化,提纯后酶的比活为１４９．５Ｖ／ｍｇ。该酶对Ｈ２Ｏ２敏感,并且在２７２ｎｍ和６７５ｎｍ处各有一吸收峰,证明被纯化的酶是Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ。  相似文献   

蜡状芽孢杆菌菌株255诱导香蕉产生抗性相关酶初步研究     

傅莹  黄益燕  肖爱萍  游春平 《广东农业科学》2011,38(9):75-77

在香蕉苗6叶期分别接种蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense),在接种后1、2、4、6、9 d,测定过氧化物酶POD、多酚氧化酶PPO、苯丙氨酸解氨酶PAL、超氧化物歧化酶SOD等4种与植物抗病密切相关的酶活性变化,结果显示,接种蜡状芽孢杆菌后,POD、PPO、SOD活性在接种后2d达到最高值,明显高于对照和接种香蕉枯萎病菌,PAL活性在接种后6 d达到最高值;而接种香蕉枯萎病菌后,POD、PPO、PAL活性在接种后24 h达到最高值,并明显高于对照,SOD活性在接种后2 d达到最高值。  相似文献   

植物叶片超氧物歧化酶活性及其从象草叶片的提取     

卢少云  郭振飞 《华南农业大学学报》1997,18(1):92-96

测定了华南农业大学校园内１８种常见植物叶片的超氧物歧化酶活性，发现鸡蛋花，白兰花，鸡蛋果，羊蹄甲和象草叶片的酶活性较高，以每ｇ鲜重计大于４００单位。经过热处理，硫酸铵沉淀和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等步骤，部分提纯了象草叶片超氧化歧化酶，并研究了部分性质。  相似文献   

水稻与基腐病菌互作中的活性氧代谢     

刘琼光  和兰娣  张静一  王玉涛  王振中 《华中农业大学学报》2007,26(4):451-455

对水稻与基腐病菌互作中活性氧及其相关酶系与抗性关系进行了研究。结果表明:超氧阴离子自由基(O2.-)、H2O2、MDA在接种后24 h达到高峰,且抗病品种的含量比感病品种高;SOD在抗感品种接种病菌24 h后活性增加,均达到高峰,然后开始下降,但总趋势为抗病品种低于感病品种;CAT在接种后24 h和96 h,感病品种出现2个高峰,而抗病品种的活性在整个过程中变化不明显。  相似文献   

皱皮木瓜超氧化物歧化酶分离纯化研究   总被引：7，自引：1，他引：6  

柳建平 《安徽农业科学》2009,37(1):222-223

[目的]探讨皱皮木瓜超氧化物歧化酶（SOD）分离纯化工艺。[方法]以重庆綦江皱皮木瓜为试验材料,采用硫酸铵分级沉淀、Se-vage法除杂蛋白、丙酮再次沉淀脱色除杂和Sephadex G-100凝胶层析,分离纯化皱皮木瓜SOD。采用Folin-酚法测定蛋白质含量,用改良的邻苯三酚自氧化法测定酶活性。[结果]皱皮木瓜SOD在层析过程中得到较好的分离纯化。其纯化倍数是178.72倍,回收率是4.94%,比活力是303.82 U/mg蛋白。SDS-PAGE纯度鉴定结果表明,电泳图为一条谱带,表明分离纯化到达电泳纯的样品。[结论]采用该分离纯化工艺得到比活力较高,达到电泳纯的皱皮木瓜SOD样品。  相似文献