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利用BNYVV CP蛋白研制甜菜坏死黄脉病毒诊断试剂盒 总被引：4，自引：0，他引：4
将ＢＮＹＶＶ ＣＰ蛋白作为抗原，免疫家兔制备出了特异性强的ＢＮＹＶＶ抗血清，采用微量沉淀法测定其效价为１：１２０４。用改进的戊二醛二步法将ＨＲＰ酶标记到纯化的抗体上，得到了高质量的酶标抗体。在国内首次研制便于携带、易于操作和具有实用价值的ＢＮＹＶＶ ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒。 相似文献
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用根据国外已报道的甜菜坏死黄脉病毒（ＢＮＹＶＶ）的ＲＮＡ２的序列合成的两个引物，通过对ＢＮＹＶＶ新疆分离物的ＲＮＡ逆转录获得了ＢＮＹＶＶ的外壳蛋白基因的ｃＤＮＡ，经ＰＣＲ扩增后用Ｔ４聚合酶补平两端，克隆到ｐＧＥＭ－７Ｚｆ（＋）质粒的ＳｍａＩ位点，转化大肠杆菌ＤＨ５α，经筛选得到正向插入的重组质粒ｐＧＥＢ３。用ＰＣＲ扩增和酶切均得到５９０ｂｐ的ＤＮＡ片段。用ＡＢＩ３７０Ａ型ＤＮＡ全自动序列仪测出该ｃ 相似文献
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根据已发表的ＩＢＤＶ基因组序列设计并合成一对特异扩增ＩＢＤＶ ＶＰ２ｃＤＮＡ的引物，以纯化的ＩＢＤＶ－Ｄ７８弱毒疫苗株基因组为模板，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增出约１．５ｋｂ产物。将ＰＣＲ产物克隆到ｐＵＣ１９的Ｓｍａｌ位点，经酶切图谱分析等方法鉴定出重组ＶＰ２ｃＤＮＡ质粒（ｐＶＰ２）。将ＶＰ２基因正向插入ＦＰＶ启动子ＬＰ２３Ｐ２下游，连同痘苗病毒启动子Ｐ１１启动的ＬａｃＺ报告基因盒插入ＦＰＶ转移载体中 相似文献
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紫外线UV—B增加对小麦开花及结实率的影响 总被引：11，自引：0，他引：11
采用田间试验方法，研究了在自然紫外光强基础上人工增加紫外线ＵＶ－Ｂ强度照射对小麦开花及结实的影响。结果表明，ＵＶ－Ｂ增加能显著降低小麦的每惠粒数；显著影响泪科的开花过程，表现为开花推迟，开共大幅度下降，可孕小花数下降。而可孕小花数下降并发育小花退化百分率下降并非发育小花数下降造成。ＵＶ－Ｂ增加对小麦的结实率无显著影响。 相似文献
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乙肝表面抗原和生长抑素融合基因在杆状病毒中表达 总被引：2，自引：0，他引：2
将乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）与生长抑素的融合基因（ＨＢｓＡｇ／ＳＳ）插入杆状病毒转移载体质粒ｐＶＬ１３９３，构成重组转移质粒ｐＶＬ１３９１ＨＳ。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂质证实ＨＢｓＡｇ／ＳＳ已插入ＰＶＬ１３９３。借助磷酸钙沉淀法，将ＣｓＣｌ超速离心纯化的重组转移质粒和苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）共转染Ｓｆ９细胞，用荧光空班和酶联免疫测定法（ＥＬＩＳＡ），筛选到重组病毒ＡｃＮＰＶＨＳ。提取感 相似文献
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γ辐照对晶体管电学参数的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
研究了掺磷、硼的ＮＰＮ型电子器件的反向击穿电压ＢＶＣＥＯ、ＢＶＣＢＯ和放大系数ＨＦＥ和＾６０Ｃｏ γ射线辐照下受到的影响，用辐射引起的点缺陷对获得的实验结果进行了讨论和解释。 相似文献
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首次采用放射性＾７Ｂｅ离子注入玉米种子。结果表明，３３ＭｅＶ和１４ＭｅＶ能量的＾７Ｂｅ离子均能不同份额地穿透种皮，注入到胚体，并诱发根尖染色体畸变，引起ＰＡＬ活性和丙醛含量的变化：Ｍ１代幼苗的形态也出现畸形。 相似文献
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传染性支气管炎病毒S1纤突糖蛋白基因的克隆及部分序列分析 总被引：4，自引：1，他引：3
大纤突Ｓ糖蛋白是传染性支气管炎病毒重要的免疫相关性蛋白之一，参考已发表的ＩＢＶ－Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因ＤＮＡ序列，合成一对特异性引物，以ＩＢＶ－ＲＮＡ为模板，应用ＲＴ－ＰＣＲ方法，获得传染性支气管炎病毒上海分离株Ｓ２Ｔ２－Ｓ１纤突糖蛋白基因，长度１．６５ｋｂ，利用引物设计中的ＢａｍＨ和ＨｉｎｄⅢ位点将其克隆到载体ｐＳＩ（＋）中。对该基因进行限制性酶发分析，结果与已报道的相一致。 相似文献
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介绍了高效液相色谱法同时测定维生素Ｂ１和维生素Ｂ２的方法，该方法色谱条件为μＢｏｎｄｐａｋＣ（１８）柱；甲醇／水４０／６０（Ｖ／Ｖ）为流动相，流速为０．８ｍＬ／ｍｉｎ；采用荧光检测器（λ（Ｅｘ）＝３６５ｎｍ，λ（Ｅｍ）＝４２５ｎｍ）．维生素Ｂ１和维生素Ｂ２的平均回收率分别为９５．５０％和９５．８２％，变异系数分别为０．３７％和０．４８％．该方法具有简单、省时、干扰小等优点，并有较高的灵敏度、准确度和宽的应用范围。 相似文献
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UV—B辐射增加对麦田生态系统N,P累积和循环的影响 总被引：5，自引：0，他引：5
在大田栽培和自然光条件下,研究了模拟ＵＶ－Ｂ辐射（ＵＶ－Ｂ,２８０￣３１５ｎｍ）增强对麦田生态系统Ｎ、Ｐ累积和循环的影响。ＵＶ－Ｂ辐射显著影响春小麦不同生育期各部位Ｎ、Ｐ含量和群体Ｎ、Ｐ累积,并显著降低群体Ｎ、Ｐ总累积。在５．３１ｋＪ／ｍ＾２ＵＶ－Ｂ辐射下,春小麦群体Ｎ、Ｐ总累积的降低最显著。ＵＶ－Ｂ辐射降低春小麦群体Ｎ、－Ｐ输出,标志羞麦田生态系统Ｎ、Ｐ产投比降低,Ｎ、Ｐ循环功能下降。麦田土壤有 相似文献
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猪生殖和呼吸综合征病毒中国分离株B13株ORF5基因在杆状病 … 总被引：4，自引：0，他引：4
本研究将ＰＲＲＳＶＢ１３株ＯＲＦ５基因克隆到杆状病毒转移载体质粒ｐＶＬ１３９３中,构建了重组转移载体质粒ｐＶＬ１３９３－ＯＲＦ５。用该重组转移载体质粒与线性化苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒（ＡｃＭＮＰＶ－ＳＶＩ Ｇ）基因组ＤＮＡ（ＢａｃｕｌｏＧｏｌｄ Ｌｉｎｅａｒｉｚｅｄ Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ ＤＮＡ）共转染草地夜蛾（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ,ｓｆ９）细胞,得到重组病毒ＡｃＭＮＰＶ 相似文献
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鸡传染性法氏囊病毒cDNA文库的建立及核酸探针的制备 总被引：1，自引：0，他引：1
利用氯化铯－蔗糖超速离心法纯化了细胞培养的鸡传染性法氏囊病（ＣＪ－８０１株）。经蛋白酶Ｋ消化，酚抽提得到的基因组ＲＮＡ在ＡＭＶ反转录酶催化下合成双链ｃＤＮＡ，通过Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ４００柱层析得到４００ｂｐ以上的大片段。将其重组到载体质粒ｐＵＣ１９的ＳｍａＩ酶切位点上，转化大肠杆菌ＮＭ５２２株。通过α－互补鉴定重组体克隆，从而构建了ＩＢＤＶ的ｃＤＮＡ文库。从文库中筛选出三个重组子作为用于ＩＢＤＶ诊 相似文献
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吕康娟 《水土保持应用技术》1999,(2):41-43
在介绍流域综合治理规划模型的结构和设计方法的基础上,分析了ＶｉｓｕａｌＢａｓｉｃ５．０（以下简称ＶＢ５０）在模型中的应用特点。在模型中进一步展示了ＶＢ语言面向对象的程序设计、界面友好、事件驱动等的优点。模型的应用使小流域综合治理规划与现代科技结合起来,具有较高的应用价值和现实意义。 相似文献
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应用样品一个稀释度间接ＥＬＩＳＡ法对产蛋母鸡及其小鸡进行传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗体效价测定，同时用病毒中和试验（ＶＮ）作比较检测。结果表明，该ＥＬＩＳＡ法比ＶＮ法敏感、精确、简便，所有样品只测定一个稀释度的Ｐ／Ｎ值，再根据线性回归方程（ｒ１=０．８８９８，Ｐ≤０．０５）计算抗体效价，达到省时省力、节约材料、减少试验误差和一次可进行大批样品检测的目的。２种方法相关性较高（ｒ３=０．８４９２，Ｐ＜０．０１），小鸡母源抗体衰减与日龄呈线性关系（ｒ２=－０．８７５８，Ｐ＜０．０１），ＩＢＤＶ母源抗体半衰期为６．３ｄ。 相似文献
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VSMB多层次土壤水分平衡动态模型及其初步应用 总被引：8，自引：2，他引：8
简要介绍了ＶＳＭＢ（ｔｈｅＶｅｒｓａｔｉｌｅＳｏｉｌＭｏｉｓｔｕｒｅＢｕｄｇｅｔＭｏｄｅｌ）多层次土壤水分平衡模型的物理原理和程序结构,并列举了模型在我国初步应用的结果。 相似文献
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表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2重组鸡痘病毒的构建 总被引：2，自引：0，他引：2
含ＩＢＤＶ保护性抗原ＶＰ２的质粒,以ＳｐｈＩ消化,然后用Ｔ４噬菌体ＤＮＡ聚合酶将末端补平,产物纯化后再以ＳａｌＩ消化一次,经再次纯化后与ＳｍａＩ和ＳａｌＩ分步酶切的鸡痘病毒插入载体ｐＦＧ１１７５－１相连,使唤基因顺向插入到载体Ｐ７５启动子下游,得到含ＩＢＤ ＶＰ２基因的重组插入载体ｐＦＧ ＶＰ２。 相似文献
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本建立了高压液相色谱测定农产品中黄曲霉素的方法，样品经石油醚（或正己烷）脱脂，用甲醇／水（５５／４５，Ｖ／Ｖ）混合溶液提取黄曲霉素，提取液以氯仿萃取，萃取液过弗罗里硅土柱净化，用三氟乙酸衍生后进液相色谱检测，荧光检测器的激发和发射波长分别为３６０、４２５ｎｍ，该方法在花生中的平均添加回收率均大于７７．０％，相对标准偏差小于９．０％，最低检出浓度，Ｂ１，０．２；Ｂ２，１．２；，Ｇ１，０．８；Ｇ２， 相似文献
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本研究比较了５种方法从棉花叶中提取棉花曲叶病毒基因组ＤＮＡ的提取效果。对不同的ＣＬＣｕＶ分离物的ＰＣＲ扩增表明，通常用于双生病毒基因组ＤＮＡ提取的ＮａＯＨ法和ＣＴＡＢ提取的ＤＮＡ无法用于ＰＣＲ检测，但ＣＴＡＢ法提取的ＤＮＡ可用于Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交。有３种方法可有效地提取ＣＬＣｕＶ ＤＮＡ，供ＰＣＲ扩增使用，这３种方法的共同点是去除了棉花组织中的干扰物质。 相似文献