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为了研究氟苯尼考纳米凝胶对新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的抑菌效果,试验从新疆南疆地区某奶牛场的乳房炎患病奶牛乳样中分离纯化金黄色葡萄球菌,采用生化试验、PCR扩增及测序等方法进行细菌鉴定,并通过比较氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌圈直径(DIZ)、最小抑菌浓度(MIC)和抑菌曲线分析氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌效果。结果表明：从乳样中分离到一株细菌,该分离株革兰氏染色、镜检后呈蓝紫色并排列成葡萄串状,触酶、血浆凝固酶和甘露醇发酵试验结果均为阳性,其基因组DNA中能扩增出金黄色葡萄球菌耐热核酸酶(nuc)基因,16S rDNA基因序列与金黄色葡萄球菌的相似性为99.7%,判断该分离菌为金黄色葡萄球菌。氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株均产生抑菌作用,DIZ大小为氟苯尼考纳米凝胶>氟苯尼考注射液>氟苯尼考原料药,均表现为高度敏感,其中氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株的DIZ均显著高于氟苯尼考原料药和氟... 相似文献
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大通县城奶牛乳样中葡萄球菌的分离与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
通过细菌分离培养法对大通县城奶牛乳汁样品36份进行金黄色葡萄球菌的分离，并采用金黄色葡萄球菌常规鉴定方法血浆凝固酶试验、甘露醇发酵试验和接触酶试验进行了鉴定，36份乳样中检出金黄色葡萄球菌阳性7份，阳性率为19．7％(7／36)。 相似文献
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鸡金黄色葡萄球菌的分离鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
本试验对从病鸡分离到的病原进行微生物经细菌形态学观察、鉴别培养、生化试验、血浆凝固酶试验、过氧化氢酶试验,结果鉴定为金黄色葡萄球菌。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2019,(24)
为了对从临床患病犬皮肤采集的样品进行分离菌鉴定,并了解犬源伪中间型葡萄球菌(Staphylococcus pseudintermedius)的生物被膜形成能力,试验对采集的临床患犬的皮肤样品通过染色镜检、触酶试验、血浆凝固酶试验、耐热核酸酶试验进行鉴定,并对分离菌进行药敏试验,对16S rRNA基因、凝固酶(Coagulase)基因、MecA基因及生物被膜主要基因(ica、sarA)进行PCR扩增,同时对Coagulase、MecA基因的PCR扩增产物测序并进行BLAST比对分析。结晶紫染色定量法检测分离菌的生物被膜形成能力,扫描电镜(SEM)观察生物被膜的形态结构。结果表明:染色镜检、触酶试验、血浆凝固酶试验初步确定分离菌为葡萄球菌,耐热核酸酶试验初步确定为伪中间型葡萄球菌。分离菌对红霉素、头孢哌酮、哌拉西林等抗菌药物表现为中介或耐药,对多西环素、四环素、米诺环素等敏感。16S rRNA基因、Coagulase基因、MecA基因及生物被膜主要基因(ica、sarA)PCR扩增结果均为阳性,16S rRNA基因、MecA基因扩增产物测序结果表明,分离菌为耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌。结晶紫染色定量法检测结果表明,该分离菌可形成中等黏附。电镜检测可见菌体呈球形,菌体聚集成簇,细菌间有黏液样物质,且菌体表面被大量丝状黏性物质包裹,即菌体分泌的大量胞外物质。说明本试验分离得到耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌,该分离菌具有生物被膜形成能力。 相似文献
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临床上绵羊的乳房炎发病率每年通常低于5％（Bergonier等，2003；Contreras等，2007）。病原经常是金黄色葡萄球菌、溶血性曼氏杆菌和凝固酶阴性葡萄球菌。不过链球菌和肠杆菌菌株也能从绵羊乳房中分离培养（Lafi等，1998；Bergonier等，2003； 相似文献
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《中国兽医学报》2015,(12):1933-1938
以研制安全有效的奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌基因工程疫苗为目的,采集380份隐性和临床型乳房炎奶样,经高盐肉汤、过氧化氢酶、甘露醇发酵、三糖铁发酵试验以及Baird-Parker平板对金黄色葡萄球菌进行分离和生化鉴定,PCR扩增分离株凝集因子基因(Clf A)并连接TA克隆载体。经测序确定无误后,连接pc DNA3.1His B以构建真核表达载体pc DNA 3.1His B-Clf A,转化Trans T1TM感受态细胞,HindⅢ和XhoⅠ双酶切分析,同时进行测序和序列分析。结果显示,通过高盐肉汤、过氧化氢酶、甘露醇、三糖铁试验和Baird-Parker平板从380份隐性及临床型奶牛乳房炎奶样中共分离到35株金黄色葡萄球菌,成功构建了真核表达载体(pc DNA3.1His B-Clf A),为研制金黄色葡萄球菌基因工程疫苗奠定基础。 相似文献
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为快速检测食品中的金黄色葡萄球菌(SA)、单增李斯特氏菌(LM)和副溶血性弧菌(VP),根据各菌的相关基因设计引物,分别扩增金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因-nuc、单增李斯特氏菌溶血素O上的hlyA基因和副溶血性弧菌的热稳定直接溶血素基因-tdh,建立一种MPCR快速检测食品中致病菌的方法,结果表明,三条特异性扩增片段分别为279bp、243bp和202bp,经DNA测序证明其序列与模板被扩增片段一致。该方法具有良好的灵敏性和特异性。 相似文献
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近期红河州某规模化养猪场在引种后,发生以发热、腹泻、呼吸困难、濒死前鼻孔出血为特征的仔猪传染病,尝试用多种药物治疗均不能有效控制病情,死亡率很高。为调查该病病因,本试验对采集自病死猪只的肺脏、脾脏、肾脏和淋巴结,取病料组织划线于血琼脂平板培养,对形成的溶血性菌落采用高盐培养、革兰染色、生化试验做初步鉴定,同时使用细菌16S rRNA基因通用引物扩增该菌株DNA片段,琼脂糖凝胶电泳回收扩增产物,经TA克隆后测序分析;取病料组织研磨上清,应用PCR技术扩增病原核酸,以类似方法分析核酸序列。结果发现,该溶血性菌株为革兰染色阳性球菌,葡萄糖、蔗糖、木糖、山梨醇和6.5%Na Cl利用试验呈阳性,麦芽糖、棉籽糖、蕈糖、七叶苷、水杨苷、VP、PYR、硝酸盐和触酶试验均呈阴性,PCR扩增出1542 bp的特异性条带,其基因序列与脲气球菌同源性最高(94%);应用PCR技术从病料中分别直接扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)421 bp和支原体267 bp的特异性条带,前者为高致病性PRRSV毒株特有核酸片段,后者与猪鼻支原体(MHR)SK76菌株的DNA同源性达99%。试验结果表明,该猪群发生以高致病性PRRSV感染为主、伴有猪鼻支原体和类脲气球菌混合感染的急性传染病,提示必须高度重视引种携带PRRSV的风险。 相似文献
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PCR技术在鼠金黄色葡萄球菌检测中的初步研究 总被引：5，自引：0，他引：5
根据已公布的金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因的序列 ,设计并合成一对特异性的引物 ,利用PCR技术扩增nuc基因片段。对金黄色葡萄球菌和其他非金黄色葡萄球菌菌株抽提的DNA进行扩增。结果金黄色葡萄球菌PCR产物出现 6 6 8bp的特异性DNA扩增片段 ,而其他非金黄色葡萄球菌未出现扩增片段 ,证实了合成的引物对金黄色葡萄球菌具有特异性。将抽提的金黄色葡萄球菌DNA进行系列稀释 ,测定此PCR体系的敏感性。结果显示 ,该PCR体系能检出 3pg金黄色葡萄球菌DNA ,且从抽提DNA到PCR扩增及电泳结束仅需 4h。因此 ,研究所建立的扩增耐热核酸酶nuc基因检测鼠金黄色葡萄球菌的PCR方法 ,具有快速、可靠、敏感和特异的特点 ,可用于临床样品和金黄色葡萄球菌感染时的检测 ,适合应用于实验大小鼠的监测 相似文献
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《中国奶牛》2015,(7)
为调查北京某牛场乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药性,采集该牛场48头奶牛的乳头涂抹点、牛乳、粪便以及卧床土等200份样品进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验,共检出可疑菌株142株,并通过耐热核酸酶试验、触酶试验、凝固酶试验等确定出致病性金黄色葡萄球菌47株。药敏试验结果表明,分离的47株菌株对多种药物具有不同程度的耐受性,对牛场常用药青霉素的耐药率高达83%,对氨苄西林、链霉素的耐药率分别为60%、53%,已具有较高的耐药性,建议不再经常使用;氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、庆大霉素、万古霉素、头孢哌酮、头孢唑啉、头孢噻吩、阿米卡星等具有较强的抗菌活性(S﹥80%),可用于奶牛乳房炎的临床用药。本研究结果为该牛场在对乳房炎致病性金黄色葡萄球菌的诊断及治疗药物的选择方面提供了技术服务。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2020,(12)
为了了解重庆市荣昌区、永川区和巴南区奶牛乳房炎葡萄球菌的种类和生物膜相关基因的流行现状,试验对从重庆市荣昌区、永川区和巴南区18个奶牛养殖场分离得到的127株葡萄球菌采用全自动生化鉴定和葡萄球菌特异性基因dnaJ扩增及测序分析法进行葡萄球菌种的鉴定,并采用多重PCR扩增法进行毒力基因检测。结果表明:从127株葡萄球菌中鉴定出20种葡萄球菌,其中表皮葡萄球菌占18.90%,溶血葡萄球菌占12.60%,阿尔莱特葡萄球菌占11.81%,金黄色葡萄球菌占3.15%;采用多重PCR方法检测127株葡萄球菌的eno、clfB和fib等14个毒力基因,其中eno基因检出率高达40.16%,clfB基因检出率高达18.11%,未检测到icaB和icaC基因。说明引起本地区奶牛乳房炎流行的葡萄球菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主,而非金黄色葡萄球菌,应加强对表皮葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌的临床防控。 相似文献
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2010年从贵州省猪肉和牛奶样品中分离鉴定出73株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌50株,凝固酶阴性葡萄球菌23株。采用琼脂稀释法检测其对18种抗菌药物的敏感性,运用统计学方法比较分析金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性差异。结果显示,动物性食品源葡萄球菌耐药较严重,对临床上常用药物耐药率较高,且为多重耐药,其中乳源葡萄球菌的多重耐药现象较猪肉源葡萄球菌严重;猪肉源金黄色葡萄球菌主要对青霉素类、四环素和大环内酯类耐药,乳源金黄色葡萄球菌主要对青霉素类、头孢菌素类、大环内酯类、四环素、克林霉素、泰妙菌素及利福平耐药;猪肉源凝固酶阴性葡萄球菌主要对氨苄西林、苯唑西林和泰妙菌素耐药,乳源凝固酶阴性葡萄球菌的耐药谱与乳源金黄色葡萄球菌类似。 相似文献
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