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肠出血性大肠杆菌Ｏ１５７∶Ｈ７的发生与控制研究王萍（青岛动植物检疫局青岛２６６００２）管恩平（山东商检局青岛２６６００２）大肠杆菌是一种危害严重的人畜共患病病原菌。肠出血性大肠杆菌（ＥＨＥＣ）Ｏ１５７∶Ｈ７为致病性大肠杆菌的一种，近来因在公共卫生上的... 相似文献
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从肿头综合征鸡分离出产Vero毒素E.coli 总被引：1，自引：1，他引：0
本研究从哈尔滨郊区某鸡场肿头综合征（ Ｓ Ｈ Ｓ）鸡分离出 ３ 株血清型为 Ｏ７８ 的埃希氏大肠杆菌（ Ｅ．ｃｏｌｉ）,从鞍山 Ｓ Ｈ Ｓ病料分离出 １ 株血清型为 Ｏ８ 的 Ｅ．ｃｏｌｉ。并证实这 ４ 株 Ｅ．ｃｏｌｉ 能够对 Ｖｅｒｏ 细胞产生毒性作用,与产 Ｖｅｒｏ 毒素的 Ｅ．ｃｏｌｉ一致。对哈尔滨市郊 Ｓ Ｈ Ｓ病鸡做病理组织学观察,主要变化为头部皮下组织,头盖骨气室及鼻粘膜下纤维素性化脓性炎症,水肿和大肠杆菌性肉芽肿,心、肝、肾等器官炎症变化并有大量异嗜性粒细胞和细菌团块。 相似文献
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应用宜兴赛尔生物化工厂产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基与美国Ｓｉｇｍａ公司产１９９、Ｆ－１０、１６４０和ＤＭＥＭ细胞培养基分别配制细胞培养液，培养ＳＰ２／０和Ｖｅｒｏ细胞系及原代鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），做细胞培养动力学比较试验。比较这两种来源的细胞培养基对细胞生长的形态、分裂速度及鸡马立克氏病毒（Ｍａｒｅｋ＇ｓｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ．ＭＤＶ）疫苗毒株ＨＶＴ－ＦＣ１２６和ＲｉｓｐｅｎｓＣＶＩ９８８在ＣＥＦ单层上增殖量的差异。研究结果表明，四种国产细胞培养基与对应的四种进口培养基对细胞生长及病毒增殖的影响无显著差异 相似文献
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本试验直接从细胞培养液中提取猪瘟兔化弱毒（ＨＣＬＶ）ＲＮＡ，并根据猪瘟病毒（ＨＣＶ）Ａｌｆｏｒｔ株和Ｂｒｅｓｃｉａ株的核苷酸序列，将ＥＩ基因分两段，设计并合成了４条引物。采用反转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ），成功地扩增出了ＨＣＬＶ保护性囊膜糖蛋白ＥＩ基因。以ｐＧＥＭ－Ｔ和ｐＵＣ１９为载体，将ＥＩ基因的两个片段分别进行克隆并转化到大肠杆菌ＪＭ１０１。经过分析鉴定，证明所扩增的片段为ＨＣＬＶＥＩ基因 相似文献
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仔猪四大细菌性腹泻病原的鉴别诊断孔繁德厦门动植物检疫局陈琼厦门市家畜检疫站在仔猪腹泻病原中，除传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）、轮状病毒（ＲＶ）和流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）３大病毒外，还有大肠杆菌（ＳＣ）、Ｃ型魏氏梭菌（ＣＥＩ）、痢疾密螺旋体（ＳＤ）沙门... 相似文献
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鸽新城疫病毒毒价的血凝价,ELD50和TCID50值相关性比较 总被引：2，自引：0，他引：2
本文比较了用血凝反应（ＨＡ）,在鸡胚成纤维细胞上的ＴＣＩＤ５０及用发育鸡胚做ＥＬＤ５０来测定鸽新城疫病毒（ＮＤＶ）毒价的相关性。结果表明,鸽ＮＤＶ毒价的ＴＣＩＤ５０和ＥＬＤ５０的值基本相同。ＨＡ滴度虽然与ＴＣＩＤ５０值有一定的相关性,但远不如ＴＣＩＤ５０准确。接种病毒后死亡鸡胚的新鲜尿囊液经冻融后,其中鸽ＮＤＶ的ＨＡ滴度和ＴＣＩＤ５０均逐渐下降。每经一次冻融,毒价几乎减少５０％。 相似文献
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将火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）接种于鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）后,用显微镜观察病变（ＣＰＥ）达５０％时添加等量的健康ＣＥＦ,继续培养至ＣＰＥ达８０％时收获培养物,此时病毒蚀斑数最高。 相似文献
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白细胞介素—3对猪瘟病毒E2基因疫苗免疫增强作用的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以昆明系小白鼠为试验动物，观察了白细胞介素－３（ＩＬ－３）对猪瘟病毒Ｅ２囊膜糖蛋白（ＨＣＶ Ｅ２）基因疫苗免疫效果的增强作用。用ＤＮＡ重组技术将ＨＣＶ Ｅ２基因和白小鼠ＩＬ－３基因克隆到ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ质粒，因在两者之间有脑心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）的核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）片段，可得到ＨＣＶ Ｅ２抗体效价。结果显示，ＩＬ－３能显著提高ＨＣＶ Ｅ２基因疫苗的免疫效果，表明ＩＬ－３可作为ＨＣＶ Ｅ２ 相似文献
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为确定供生物制品和生物工程产品生产所用动物传代细胞系有无致癌／致瘤性,对研制生产犬、貉、狐用五联病毒,即犬狂犬病病毒（ＲＶ）、犬瘟热病毒（ＣＤＶ）、犬细小病毒（ＣＤＶ）、犬腺病毒２型（ＣＡＶ２）和犬副流感病毒（ＣＰＩＶ）的活疫苗以及猫、狮、虎、豹用三联病毒,即泛白细胞减少症病毒（ＦＰＬＶ）、猫疱疹病毒１型（ＦＨＶ１）和猫杯状病毒（ＦＣＶ）的活疫苗,所用猫肾细胞系（Ｆ８１,ＣＲＦＫ）、犬肾细胞系（ＭＤＣＫ）、非洲绿猴肾细胞系（Ｖｅｒｏ,Ｖｅｒｏ２）、恒河猴肾细胞系（ＭＡ１０４）和叙利亚金… 相似文献
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应用PCR检测产vero毒素大肠杆菌 总被引：5，自引：0，他引：5
根据产ｖｅｒｏ毒素大肠杆菌（ＶＴＥＣ）产生的ｖｅｒｏ毒素１（ＶＴ１）和ｖｅｒｏ毒素２（ＶＴ２）的基因序列，合成了２对寡核苷酸引物，建立了聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增方法。共对４株产ｖｅｒｏ毒素大肠杆菌和其他７个属的４１株肠道致病菌中的ＶＴ基因进行了检测，结果仅从用传统组织培养方法确定为ＶＴ阳性的产ｖｅｒｏ毒素大肠杆菌和痢疾１型志贺氏菌提取的ＤＮＡ中观察到了ＰＣＲ扩增产物，而从其他肠道致病菌提取的模板ＤＮＡ中未扩增出任何ＤＮＡ片段。用这２对引物可以清楚地区分产ＶＴ１、ＶＴ２或ＶＴ１／ＶＴ２的大肠杆菌。ＰＣＲ扩增方法的检测敏感性为３２０ｐｇ全细菌ＤＮＡ，用ｖｔ１引物可以检测出低达３２ｐｇ的全细菌ＤＮＡ。 相似文献
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应用生物素－新和素过氧化物酶复合物和单克隆抗体（ＡＢＣ－ｍＡｂ）检测冷冻和福尔马林固定石蜡包埋的感染火鸡出血性肠炎（ＨＥ）的火鸡脾组织切片中ＨＥ病毒抗原的间接免疫过氧化物酶技术（ＩＰ），与间接免疫荧光抗体技术（ＩＨＡＴ）及琼脂沉淀试验（ＡＧＰＴ）作了比较。ＩＰ染色法从感染后４８小时至试验结束时的第１１天均能检出ＨＥ病毒抗原。ＡＧＰＴ和ＩＦＡＴ检出ＨＥ病毒抗原的时间分别为感染后３～７天和２～９天.同 相似文献
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５株已适应鸡胚细胞的ＡＶＡＶ在Ｖｅｒｏ细胞上传２～５代后各毒株均能产生明显的ＣＰＥ和较高的病毒滴度，而２株非鸡胚细胞适应株（分别为鸡胚毒和野外组织毒）在Ｖｅｒｏ细胞上盲传７代，仍无明显的ＣＰＥ出现。这一结果初步表明Ｖｅｒｏ细胞能用于已适应鸡胚细胞的毒株的增殖。而不能用于病毒的分离。吸附时间与冻融次数明显影响病毒的适应进程，以吸附１小时、冻融２次以上为佳。ＡＶＡＶＪＮ－１株能在Ｖｅｒｏ细胞上产生蚀斑，大小为２．７～４．４ｍｍ，出斑时间为接种后４～５天，Ｖｅｒｏ细胞用于中和试验，测得Ｓ（１１３３）株免疫鸡血清的小和效价为１：８０。 相似文献
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参考Ｃｕｌ株核酸序列自行设计一对２０ｂｐ序列为引物，经反转录和ＰＣＲ扩增传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）核酸高度保守的Ｖｐ４编码区中１５０ｂｐ的片段，用于检测ＩＢＤＶ。对德国Ｃｕｌ株、美国标准强毒ＳＴＣ和变异株１０８４Ｅ、中国ｑ８０１以及７个国内野外分离株分别进行扩增，同时对新城疫病毒（ＮＤＶ）、马立克氏病毒（ＭＤＶ）、禽呼肠孤病毒（ＲＥＯＶ）、禽腺病毒（ＨＡＡ）、Ｖｅｒｏ细胞、ＳＰＦ鸡法氏囊组织进行扩增后，２％琼脂糖凝胶电泳分析，１１株ＩＢＤＶ都出现分子量大小与设计相符合的ＤＮＡ扩增带，４种其他病毒、囊组织和Ｖｅｒｏ细胞都未出现任何扩增带。建立了直接采用细胞毒或组织毒进行ＰＣＲ的快速简便的核酸提取方法，应用二级ＰＣＲ扩增出了与一级ＰＣＲ相符的更加清晰的扩增带。 相似文献
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免疫鸡羽毛根中火鸡疱疹病毒的分离与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
用常规剂量的商用火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）冻干苗经腹腔免疫１日龄非免疫鸡，于第３周采集羽毛根，分别采取直接法和间接法（即经过滤获取脱细胞的游离物）接种次代鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），以进行病毒的分离。结果显示，在免疫后第３、４、５、６周，２种方法都分离到病毒，第７周仅直接法分离到病毒，而第８周２种方法都没有分离到。根据分离到病毒的细胞病变（ＣＰＥ）特征，结合地高辛标记的Ⅰ型马立克氏病病毒（ＭＤＶ－１）核酸探针检测结果，表明ＨＶＴ免疫鸡羽毛根中含有可脱离细胞的、具有感染性的疫苗株ＨＶＴ粒子，且其可检出时间具有阶段性。 相似文献
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用血清１１型蓝舌病病毒（ＢＴＶ－１１）接种１６头处于繁殖期或妊娠阶段的易感牛。这些牛不含蓝舌病病毒（ＢＴＶ）和流行性出血热病病毒（ＥＨＤＶ），病毒接种前无ＢＴＶ抗体。一组４头牛与１头牛可从精液中排ＢＴＶ－１１（ＣＯ７５Ｂ３００株）的公牛自然交配。以推测该公牛是否能通过交配使母牛感染ＢＴＶ－１１，继而经胎盘感染胎儿，并持续感染，产出先天性畸胎儿。有４头妊娠牛的两个组，接种昆虫介导的ＢＴＶ－１１（ＣＯ 相似文献
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猪生殖—呼吸道综合征病毒（PRRSV）分离鉴定及其与欧,美PRRSV … 总被引：2，自引：0，他引：2
在我国吉林省某地猪生殖呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ,间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明,ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应;分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应,而分离株与ＨＣＶ,ＰｒＶ,ＰＰＶ,ＴＧＥＶ,ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原,以上试验证明,我们已成功地分离到２株地方性ＰＲ 相似文献