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家蚕蛋白质双向电泳的样品制备方法 总被引：14，自引：11，他引：14
进行蛋白质组研究的关键是要尽可能完整地获得一个基因组在一个生物体或一个组织器官的特定时期表达的蛋白质的种类和数量 ,双向电泳技术是分离组织和器官蛋白质的核心技术 ,而蛋白质样品的制备是双向电泳的基础。以家蚕胚胎、中肠、皮肤、丝腺等组织器官为材料 ,采用磷酸缓冲液或Tris HCl缓冲液抽提蛋白质样品 ,用 6种不同的蛋白质溶解缓冲液溶解蛋白质 ,经蛋白质双向电泳和蛋白质图像软件分析 ,结果表明用磷酸缓冲液抽提、蛋白质溶解缓冲液E溶解是制备家蚕蛋白质双向电泳样品的较好方法。蛋白质磷酸抽提缓冲液 (PBS)的组成为 :32 5mmol/LK2 HPO4,2 6mmol/LKH2 PO4,4 0 0mmol/LNaCl,pH 7 6。蛋白质样品溶解缓冲液E的组成为 :8mol/L尿素 ,2mol/L硫尿 ,4 %CHAPS ,2 0mmol/LTrisbase,30mmol/LDTE ,2 %Pharmalyte(pH 3～ 10 )。 相似文献
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山茱萸凝集素的测定及其提取方法的比较 总被引：2，自引：0，他引：2
对药用植物山茱萸进行了血凝活性测定及提取方法的比较.将未经炮制的山茱萸粉碎,用不同的缓冲液在不同的pH和含不同浓度NaCl的浸提液中浸泡并制备浸提液.对不同缓冲液的浸提液分别进行了血凝活性测定.结果表明,山茱萸在1 mol/L NaCl-甘氨酸缓冲液(pH 3)的浸提液中活性最强,并能被N-乙酰葡萄糖胺所抑制;在80%饱和浓度硫酸胺溶液中沉淀最多,活性最强,其活性蛋白含量为4.1%.本试验为开发利用山茱萸,提取其有效成分提供了具体方法. 相似文献
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瘤胃液渗透压和pH值是决定反刍动物灌注营养能否成功的重要因素。灌注缓冲液的浓度及缓冲液与挥发性脂肪酸（VFA）的比例控制着瘤胃液的渗透压与pH值。本试验用4只灌注营养的绵羊，分6个缓冲液水平研究了缓冲液对瘤胃液渗透压与pH值的影响。结果表明，当缓冲液储备液与挥发酸储备液重量之比为4．39～6．58，且缓冲液灌注水平为84．7～127．2g／kgW0．75时，灌注绵羊的瘤胃液渗透压与pH值可处于安全范围内。 相似文献
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《现代畜牧兽医》2021,(3)
试验研究不同条件对植酸酶水浴耐热性的影响。分别稀释4种植酸酶酶活力40、20、10、2 U/mL,测定80℃和85℃水浴5 min的耐热性。结果表明,稳定性强的植酸酶受酶浓度的影响较小,稳定性较差的植酸酶受影响较大,当处理液酶活力低时,耐热性结果较高。取3种植酸酶样品,分别使用缓冲液Ⅰ、缓冲液Ⅱ、水为耐温稀释缓冲液,测定85℃水浴5 min耐热性,结果表明:缓冲液Ⅰ作为稀释缓冲液测定的耐热性结果最高,其次是缓冲液Ⅱ,水作为稀释缓冲液时测定的耐热性结果最低。取3种植酸酶样品,分别在pH值5.5和5.0缓冲体系中测定85℃水浴5 min耐热性,结果表明,植酸酶在与最适pH值相近的条件下进行耐热性处理,测定的耐热性结果相对较高。研究表明,本试验的3种条件对水浴法测定植酸酶耐热性的结果均有影响,制定检测标准时需要明确测定条件。 相似文献
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嗜热链球菌部分生物学特性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
对嗜热链球菌采用六种不同培养基、不同培养温度（37℃、42℃、45℃）和培养基不同酸碱度（pH6.5、pH6.8pH7.0）进行培养,对其在不同条件下的生长状态进行了研究,得出嗜热链球菌的最佳培养温度为42℃,最适酸碱度为pH6.8,最佳培养基为乳酸菌培养基. 相似文献
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恩诺沙星,环丙沙星在鸡组织中残留量的检测方法研究 总被引：24，自引：2，他引：24
用高效液相色谱法,荧光检测器,同时检测鸡组织中恩诺沙星、环丙沙星的残留量。用0.1m ol/L磷酸液(pH 12) 乙晴(1 3v/v)作为提取液,脱脂,浓缩至干,用0.1m ol/L磷酸液(pH 12)溶解。HPLC条件:荧光检测器,激发波长280nm ;发射波长450nm 。流动相:0.05m ol/L磷酸/三乙胺缓冲液(pH 2.4) 乙腈(80 20v/v)。恩诺沙星、环丙沙星标准曲线线性范围5～500ng/m l。对不同组织的4种浓度进行回收率测定,其回收率在70% ～107%之间;变异系数10% 以内。恩诺沙星、环丙沙星的最低检出限分别为2ng/g、5ng/g。 相似文献
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本文以三羟甲基氨基甲烷为基础溶液,用氯化钾和氯化钠混合液调节溶液渗透压,用盐酸和氢氧化钠调节pH值,研究了pH值和渗透压对中蜂精子活力的影响。结果表明,在中性三基缓冲液中,精子活力最高;pH<4.0,精子死亡;pH≥8.0,精子活力下降。精子在高渗(OP≥470毫渗摩尔/升)三基缓冲液中的活力强于在低渗(OP≤330毫渗摩尔/升)三基缓冲液中。pH值和渗透压对精子活力有显著的互作效应。 相似文献
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差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化鸭病毒性肠炎病毒(DEV)免疫兔制备兔抗DEV高免血清后,用DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化的兔抗DEVIgG建立了间接免疫荧光染色法(IFA)检测石蜡切片中DEV的方法。IFA的最佳条件为:石蜡切片用10mmol/L pH6.0的柠檬酸缓冲液为微波修复液微波修复10min,胰酶修复20min;10%小牛血清室温封闭30min;加入1∶25的兔抗DEVIgG于4℃孵育过夜;再加入FITC标记的羊抗兔IgG于37℃孵育45min。以建立的IFA对DEV人工皮下感染死亡鸭的各组织器官进行检测,在死亡鸭的脾脏、胸腺、法氏囊、肝脏、食道、十二指肠、直肠及肺脏中检测到DEV抗原。研究表明,IFA检测石蜡切片中的DEV具有直观、特异性强的优点,是对DEV进行检测和抗原定位的良好方法。 相似文献
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在单因素试验的基础上,采用响应面分析法,优化初始pH值、接种量、发酵温度3个主要培养条件对德氏乳杆菌保加利砸亚种NCFB2772（Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus NCFB2772, L.b NCFB2772）高产乳酸菌胞外多糖（extracellular polysaccharides, EPS）的影响。结果表明,初始pH6．5、接种量4．5％、发酵温度42℃、L．bNCFB2772合成EPS的量达到最大（907．8mg／L）。各因素对响应值的影响可用回归方程Y=-287．08＋39．83C1＋11．44C2＋18．54C3表示。 相似文献
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酶法水解牦牛血红蛋白的试验研究 总被引：1，自引：0，他引：1
对牦牛血液中血红蛋白的碱性蛋白酶水解制取工艺进行了研究,采用L9(34)正交实验确定了最佳酶解条件,实验结果表明:加酶量5%、酶解pH 8、酶解温度55℃、酶解6h,100mL牦牛血细胞可得血红蛋白粉32.17g。 相似文献
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研究利用表面等离子共振生物传感器（SPR）检测氟罗沙星标准品的检测条件,绘制标准曲线,为实际检测提供依据。试验中采用氨基偶联法对芯片（SM5）活化及固定氟罗沙星-OVA偶联物,对抗原在芯片表面的固定条件及抗体浓度的选择进行优化。结果表明,芯片活化及抗原固定时,选用pH 4.5的醋酸缓冲液及50 mmol/L氟罗沙星-OVA偶联物可以得到较理想的固定响应值;试验中绘制标准曲线的最低检测限为1 ng/mL,检测范围为0～20 ng/mL。抗体1∶400稀释时可达到较低的检测限,为实际样品检测提供检测依据。 相似文献
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正交优化苜蓿叶蛋白提取工艺条件研究 总被引：1，自引：0，他引：1
文章在单因素试验的基础上,采用L9(33)正交试验对苜蓿叶蛋白提取工艺进行研究。结果表明,最佳工艺条件组合为:料液比1∶20、加盐量4%、pH为5,在此条件下可溶性蛋白的提取率可以达到19.62%。影响可溶性蛋白提取率的因素依次为:料液比加盐量pH,絮凝温度在60℃、时间为15min时效果最好。 相似文献
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功能特性和培养条件研究是植物根际促生菌(PGPR)工业化潜力挖掘和开发的关键。为了进一步对菌株开发利用,选取前期研究中从珠芽蓼(Polygonum viviparum)、洽草(Koeleria glauca)、红三叶(Trifolium pratense)及草地早熟禾(Poa pratensis)根际获得的5株菌株为材料,测定菌株溶磷、固氮、分泌吲哚乙酸(IAA)能力等特性,利用16S rRNA分子生物学技术,确定菌株分类学地位;测定菌株生长特性、温度耐受性、pH耐受性、产气特性、产酸特性,确定菌株适宜的培养条件。结果表明:菌株M1溶有机磷量最高,为170.37μg·mL?1,菌株Y3溶无机磷量最高,为308.50μg·mL?1;菌株Y1、Y3、Y5、M1、M6均具有分泌IAA的能力,分泌量在24.23~164.74μg·mL?1。菌株Y1和Y3具有固氮能力,固氮酶活性分别为175.30和255.55 nmol·(h·mL)?1(C2H4)。通过对菌株生长特性测定,5株菌株在40 h均已进入生长稳定期,适宜的生长温度在25~31℃,适宜的生长pH范围为6.50~7.50,在LB培养基中生长无产气现象,生长过程中pH稳定在6.23~7.52,具有作为工业化发酵菌种的潜力。16S rDNA鉴定确定菌株Y5与Y3为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),Y1为蕈状芽孢杆菌(Bacillus mycoides),M1为产黄假单胞菌(Pseudomonas synxantha),M6为猴假单胞菌属(Pseudomonas simiae)。本研究为菌株的工业化生产研究奠定了基础。 相似文献
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Ibrahim F. M. MARAI Abdel-Halim A. EL-DARAWANY El-Sayed A.-F. ISMAIL Mohamed A. M. ABDEL-HAFEZ 《Animal Science Journal》2006,77(5):487-494
The aim of the present study was to investigate the effects of hot summer climatic conditions (compared to winter) on the libido, semen quality traits, level of serum testosterone hormone and some physiological and body measurements of Egyptian Suffolk rams. A parameter for the tolerance of the rams to adverse hot climatic conditions, designated as the tunica dartos index (TDI), was estimated as the multiplication of the percentage change in scrotal length and that of the percentage difference between rectal temperature and scrotal skin temperature. The relationships between the TDI and semen characteristics were also estimated. The results showed that in summer, the reaction time, pH, percentage dead and abnormal spermatozoa, acrosomal damage and temperatures of rectum, body skin and scrotal skin and scrotal length were significantly higher, while sperm motility, sperm concentration, scrotal circumference and testis length were significantly lower than in winter. The correlation coefficient (r) values estimated between the TDI and each of the semen pH, ejaculate volume, sperm motility and sperm cell concentration were positive, and those estimated between the TDI and each of the reaction time, dead and abnormal spermatozoa and acrosomal damage were negative. The best values of libido (low reaction time), semen pH, semen motility percentage, sperm cell concentration and testosterone level were recorded with a high TDI level (7.5 and more), while those of percentage of dead spermatozoa, sperm abnormalities and acrosomal damage were recorded with a low TDI level (less than 4.5). It can be concluded that the TDI correlates well with the reproductive ability of the ram and can be a reliable parameter to indicate the tolerance of rams to hot subtropical conditions in Egypt. 相似文献
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采集华北北部不同阶段牛群和不同养殖模式夏秋季节奶牛鲜粪便的样品并检测，对测定数据进行方差分析。结果显示：夏秋季产奶牛组鲜粪便中CODcr含量均值为64．31kg／t，NH3-N含量均值为0．252kg／t；停奶育成组鲜粪便中CODcr含量均值为62．58kg／t，NH3-N含量均值为0．267kg／t。不同的养殖模式间CODcr、NH3-N含量稍有差异，但达不到极显著水平。奶牛鲜粪便pH值为弱碱性，范围在7～8之间，产奶组pH值低于停奶育成牛组。 相似文献
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为了开发新的食用蛋白质资源,本试验以“青大1号”紫花苜蓿新品系青干草为原料,采用酸化加热法配合加盐法提取叶蛋白.单因素试验设计,分别考察料水比、加盐量、絮凝时间、pH、预浸时间、絮凝温度6个因素对粗蛋白质提取率的影响,并以单因素试验结果为依据,采用四因素（料水比、加盐量、絮凝时间、pH）三水平L9（34）正交试验设计进行提取工艺优化.试验结果表明：影响粗蛋白质提取率的因素,从大到小依次为料液比、絮凝时间、pH、加盐量.当絮凝温度为70℃、料液比为1∶10、加盐量1％、絮凝时间5min、pH为4时是叶蛋白提取的最优提取条件. 相似文献