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抗猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒卵黄抗体制备及其临床应用研究 总被引：2，自引：1，他引：1
本研究旨在制备猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒高免卵黄抗体,研究其治疗效果。以猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻二联灭活苗免疫产蛋鸡,琼脂扩散方法检测抗体效价达到1∶64时,收集卵黄,采用氯仿抽提和硫酸铵盐析法纯化卵黄抗体,进行微生物学检测、安全性试验,通过人工感染治疗试验和临床应用,观察其治疗效果。结果人工感染治愈率为100%,临床应用治愈率为88.0%,表明制备的卵黄抗体对猪传染性胃肠炎和流行性腹泻具有显著的治疗效果。 相似文献
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《中国兽医杂志》2018,(11)
为开发抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)卵黄抗体制剂,应用RT-PCR技术从患猪流行性腹泻(PED)仔猪肠组织中扩增出523 bp的基因片段,构建了重组表达质粒pET32a-S1-523,转化至感受态细胞BL21 (DE3)中,经0.4 mmoL/L IPTG诱导表达7 h后成功表达出32.8 kDa大小的可溶性重组蛋白。该重组蛋白经Ni-NTA蛋白纯化柱纯化后,进行SDS-PAGE鉴定。Western Blot检测结果显示特异性良好。以重组蛋白作为抗原免疫50只初产蛋鸡,收集高免卵黄液,并采用喷雾干燥技术和冷冻干燥技术研制卵黄抗体粉和卵黄抗体冻干粉,利用间接ELISA方法检测其抗体效价。应用高效价高剂量的卵黄抗体制剂对规模化猪场中患病仔猪进行治疗试验,结果显示,卵黄抗体粉组的治愈率为74.67%,卵黄抗体液组的治愈率为78.26%,卵黄抗体冻干粉组的治愈率为75.93%。表明卵黄抗体制剂对患PED仔猪具有一定的治疗效果。 相似文献
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为筛选免疫效价高的疫苗,获得高免血清并进行临床治疗观察。本试验选用3种猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫健康新西兰大白兔,免疫后分别采血和分离血清,并用猪蓝耳病毒抗体PPA-ELISA检测试剂盒检测血清抗体效价,筛选出抗体效价较高的两种疫苗;免疫猪,制得高免血清对自然发病仔猪进行高免血清治疗试验。免疫兔试验表明,猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(CH-lR株)免疫后血清抗体效价最低,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)血清(简称高致病疫苗血清)抗体效价比猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(CH-la株)血清(简称灭活疫苗血清)低,用后两种疫苗免疫猪,血清抗体效价均能达到1∶1280。自然发病仔猪高免血清治疗试验显示,注射高致病疫苗血清对蓝耳病的治愈率为88%,灭活疫苗血清治愈率为76%。结果表明高免血清是无菌、安全的,所得两种血清可用于临床防治猪蓝耳病。 相似文献
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猪圆环病毒2型高免卵黄抗体的研制与应用 总被引：2，自引：1，他引：1
为制备猪圆环病毒2型(porcine circovirus serotype2,PCV-2)高免卵黄抗体,并对其治疗效果进行研究,通过自制猪圆环病毒2型(PCV-2)灭活苗,免疫SPF产蛋鸡,收集高免蛋,制备PCV-2高免卵黄抗体,对高免卵黄抗体进行无菌检验、活体动物安全性检测,用琼脂扩散方法进行效价检验和人工感染保育猪治疗试验,并将其应用于临床实践,观察其治疗效果。结果抗体效价达到1∶64;人工感染治疗试验治愈率达100%;临床试验治愈率为96%,应用效果良好。 相似文献
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为了制备猪蓝耳病(PRRS)高免卵黄抗体,并对其治疗效果进行研究,采用高致病性猪蓝耳病灭活疫苗(NVDC-JXA1株)免疫产蛋鸡,收集高免蛋,通过水稀释提取法制备PRRS高免卵黄抗体,对其进行无菌检验、安全性检测、效力检验及动物保护性试验,并将其应用于临床实践,观察其治疗效果。结果发现,该方法制备的PRRS高免卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:32,保护率达100%,临床试验治愈率为84.5%。研究表明,PRRS特异性卵黄抗体的制备具有操作简便、成本低廉等特点,可以用于PRRS临床治疗。 相似文献
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采用吉林市郊区数家鸡场分离鉴定的致病性鸡白痢沙门氏菌,经固体增菌培养纯化后甲醛灭活,制成油佐剂灭活抗原免疫健康蛋鸡;用平板凝集试验检测卵黄抗体效价,当抗体效价达到1:320倍时,收集免疫鸡蛋分离卵黄,减压低温干燥制成卵黄抗体细粉并进行效价测定和安全检测。最后将卵黄抗体细粉以不同比例加入雏鸡饲料,对试验雏鸡进行预防量饲喂后强毒菌攻毒试验、强毒菌攻毒后治疗量的饲喂试验及小区域雏鸡饲喂试验。结果表明,卵黄抗体粉预防添加量为3%和卵黄抗体治疗添加量为6%时,攻毒保护率、治愈率分别为77.50%和72.50%;饲料添加组较同期普通饲养组总发病率降低7个百分点,抗生素用量降低33%,增重率提高6%。 相似文献
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本试验采用辛酸去脂、饱和硫酸铵溶液盐析法提纯鹅卵黄抗体IgY,采用SDS-PAGE方法分析其纯度;用纯化后的IgY免疫试验兔,收集血清,测定血清抗体效价;采用辛酸-硫酸铵法结合Protein G树脂亲和层析法纯化免血清IgG,用改良的高碘酸钠法进行辣根过氧化物酶标记,直接ELISA法测定标记物效价.结果表明,提纯的鹅卵黄IgY浓度为11.5 mg/mL,纯度约为92％;血清琼脂扩散抗体效价为1∶32;Western Blotting试验证明,兔血清中含有抗鹅卵黄抗体IgY重链及轻链的特异性抗体;直接ELISA法测得标记物效价为1:1 100. 相似文献
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采用JLDA株小鹅瘟抗原,高免马匹后经采血精制可获得滴度为1∶64～1∶128的抗小鹅瘟高免血浆。通过胃蛋白酶消化-硫酸铵盐析的工艺,得到小鹅瘟马源高免血清。按0.5 mL/羽剂量共预防雏鹅52.48万羽,按1 mL/羽～3 mL/羽剂量共治疗感染雏鹅5.66万羽,证实该抗血清效价高,对雏鹅的预防保护率为95.58%,对感染雏鹅的治愈率为92.87%,表明对小鹅瘟防治安全高效。马采血量大,成本低,同时有效地避免了同源动物间其他疫病的感染和强毒的散播,较之用鹅作为血清来源动物经济和社会效益显著。 相似文献
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为建立PRRSV抗体的检测方法,通过扩增PRRSV ORF6基因,将其克隆至pET-28a（＋）中,IP TG诱导重组质粒转化菌表达,经SDS-P AGE和Western blot鉴定,表明重组质粒能够表达目的蛋白;经亲和层析纯化表达蛋白,以SP A标记胶体金,用纯化M融合蛋白和羊抗猪抗体为检测线和质控线研制胶体金试纸,检测猪血清样品,比较与IDEXX ELISA试剂盒检测结果的符合率。结果表明,表达蛋白具有良好的反应性,制备的胶体金试纸与IDEXX ELISA试剂盒检测符合率为89％,该方法为P RRSV抗体的检测提供了快速简便的方法。 相似文献
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Muhammad Wasif Malik Najma Ayub Irfan Zia Qureshi 《Journal of veterinary science (Suw?n-si, Korea)》2006,7(1):43-46
Infectious bursal disease (IBD) is an acute and highly contagious disease of young chickens caused by Birnavirus. Mortality of infected birds can be best prevented if injected with antibodies. The present study was an attempt to raise specific hyper-immune polyclonal antibodies against IBD virus in Pakistan. Commercial layers divided into four groups were injected with IBD vaccine subcutaneously according to four different treatment regimens. Eggs were collected daily and antibodies were purified from yolk with dextran sulphate. Titers of antibodies in serum and yolk were evaluated with enzyme linked immunosorbant assay and agar gel precipitation test. Antibody titers were significantly higher in yolk than serum. Eggs collected at 28 days post-vaccination had maximum antibody titers. Of treatment regimens, T3 was found to be most effective for hyperimmunization. Lyophilized antibodies stored at 4℃ did not lose their activity till the end of experiment. IBD virus infected birds were injected with purified antibodies which induced 92% recovery as compared to control birds. The study implicates that the purified antibodies may be useful as a therapeutic agent to cure IBD infected birds. 相似文献
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CL Leng TQ An JZ Chen DQ Gong JM Peng YQ Yang J Wu JJ Guo DY Li Y Zhang ZX Meng YQ Wu ZJ Tian GZ Tong 《Veterinary microbiology》2012,159(3-4):273-281
In 2006, highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (HP-PRRSV) caused great economic losses emerged in China and continues to be a threat for the pig industry. B antigenic region (AR) ((37)SHL/FQLIYNL(45)) of GP5 was considered to be a major linear neutralizing AR in PRRSV classical strains. However, peptide-purified antibodies against this AR did not neutralize PRRSV in a recent report. Compared with classical PRRSV, one amino acid mutation (L/F(39)→I(39)) was found in B AR of HP-PRRSV. To study the ability of B AR of HP-PRRSV to induce neutralizing antibody (NA) in vitro and in vivo, rabbit antisera against B AR with and without the mutation and pig hyperimmune sera with high titer of NAs against HP-PRRSV were prepared. Immunofluorescence assays (IFA) showed that the two rabbit antisera both had reactivity to classical PRRSV CH-1a and HP-PRRSV HuN4 with no observable difference in IFA titer. However, antisera did not have neutralizing activity against classical PRRSV CH-1a and HP-PRRSV HuN4. No correlation was observed between the levels of anti-B AR peptide antibodies and NAs in pig hyperimmune sera that were detected by indirect ELISA and virus neutralization, respectively. B AR peptide-specific serum antibodies had no neutralizing activity and, GST-B fusion protein could not inhibit neutralization of NAs in pig hyperimmune sera. Based on these findings, we conclude that B AR of HP-PRRSV is not a neutralizing AR of HP-PRRSV GP5. 相似文献
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重组M蛋白-乳胶凝集试验检测PRRS病毒血清抗体的研究 总被引：19，自引：0，他引：19
利用纯化的 PRRS病毒重组 M蛋白致敏乳胶制成乳胶抗原 ,成功地建立了一种检测 PRRS病毒血清抗体的乳胶凝集试验 (L AT)诊断方法。用制备的乳胶 M抗原分别检测猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪弓形体病、猪衣原体病、猪乙型脑炎阳性血清 ,结果均为阴性 ,无交叉反应 ,说明建立的 L AT方法具有良好的特异性。用建立的乳胶凝集试验方法与国外IDEXX公司 PRRS病毒抗体检测试剂盒同时对 76份猪血清样本进行检测 ,结果表明建立的 L AT方法的特异性和敏感性均为 95 % ,两种方法的总符合率为 87% ,检出率基本一致。研究结果表明 L AT方法具有操作简便、快速、敏感性高、特异性强、价格低廉且可用于现场检测等优点 ,是一种适合基层兽医单位用于 PRRS病毒血清抗体检测的新方法 相似文献
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本试验利用猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)SC株免疫产蛋鸡,收集高免卵黄,采用水稀释法和水稀释-盐析法获得鸡源抗PEDV卵黄抗体,采用已建立的ELISA方法对卵黄抗体效价进行测定。以3日龄无母源抗体的易感仔猪为试验动物,对抗PEDV卵黄抗体的治疗效果及安全性进行测定,并进一步利用自然发病猪场的治疗效果进行验证。结果表明,经PEDV SC株细胞毒免疫的鸡可在2次加强免疫后15 d产生高水平的特异性抗体。在实验室治疗试验中,攻毒治疗组仔猪的存活率达60%,攻毒对照组存活率为20%;用于自然发病猪场时,饲喂抗PEDV卵黄抗体饲料的仔猪存活率亦为60%,而自然发病对照组的存活率为10%。以上结果表明抗PEDV卵黄抗体对感染PEDV的仔猪有一定治疗作用。 相似文献
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鸭传染性法氏囊病病原分离鉴定及防治试验 总被引：9，自引：0，他引：9
从疑似鸭传染性法氏囊病的病例中分离到 １ 株鸭传染性法氏囊病毒,该病毒可使 ７ 日龄健康鸭 １００％ 发病,发病鸭具有鸭传染性法氏囊病的典型病变,用鸡传染性法氏囊高免卵黄抗体预防和治疗鸭传染性法氏囊病取得了满意效果。 相似文献
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抗鸡新城疫和传染性法氏囊病二联卵黄抗体的研制及应用 总被引：2，自引：1，他引：1
用新城疫疫苗和传染性法氏囊病疫苗免疫健康高产蛋鸡制备抗鸡新城疫和传染性法氏囊病二联卵黄抗体,并在40个规模化肉鸡场做推广应用,结果表明,预防保护率达100%,治愈率为63%~85%。 相似文献