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甜蛋白基因MBLII 对莴苣的遗传转化 总被引:6,自引:0,他引:6
以4 日龄莴苣(Lactua sativa L.) 无菌苗子叶为外植体, 通过根癌农杆菌介导,成功地进行了马槟榔甜蛋白基因MBLII 对莴苣的遗传转化。抗生素浓度和子叶外植体与农杆菌的共培养时间是影响转化的重要因素。附加卡那霉素( Kan) 50 mg/ L 的诱芽培养基MS I(MS+ NAA 0. 1 mg/ L+ 61048577;BA 0. 1 mg/ L+ 羧卞青霉素500 mg/ L) 最适于侵染后子叶外植体的诱芽培养。在外植体与农杆菌共培养0~ 7 d 的范围内, 以共培养3 d 最佳( 生芽率58. 3%, 白化率29%) 。1~ 2 cm 再生芽移入诱根培养基MS II (MS+ NAA 0. 05 mg/ L+ Kan 50 mg/ L+ 羧苄青霉素300 mg/ L) 中, 诱根率可达100%。获得的抗性植株经组织化学及PCR 特异扩增鉴定和统计, 7. 6%阳性。Southern blot 结果证明MBL II 基因已整合到莴苣基因组中。 相似文献
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大白菜AB-81高频再生系统的建立及gus A基因瞬时表达的研究 总被引:15,自引:1,他引:14
以大白菜自交系AB-81 的子叶和真叶切块为外植体, 建立了高频不定芽离体再生系统。在MS 附加TDZ 0. 2 mg/L , NAA 2. 0 mg/L , AgNO3 10 mg/L 和ABA 0. 25 mg/L 的再生培养基上, 子叶和真叶的不定芽再生频率分别达到93. 3%和90. 0%, 每块外植体的不定芽数达3~6 个, 最多达21 个。以EHA105/ pMOG410 为载体转化侵染大白菜AB-81 的子叶, 获得较高gus A 基因瞬时表达频率的条件为: 子叶预培养2~3 d ; 侵染的工程菌液的浓度OD 0. 3~0. 5 ; 侵染时间2~10 min ; 共培养时间2~3 d。 相似文献
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李、杏属间远缘杂交及杂种胚培养技术研究 总被引:18,自引:3,他引:18
以李为母本、杏为父本进行李、杏远缘杂交,在获得果实的5个杂交组合中,授粉后30d的坐果率为4%~30%,授粉后90~100d的坐果率为4%~16%。杂交后90~100d,取杂种胚进行离体培养,结果表明在S1:改良SH+6-BA1.0mg/L+IAA1.0mg/L和S2:改良SH+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基上,杂种胚均可萌发。对萌发芽进行继代培养,结果在MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基上增殖和生长良好。 相似文献
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新疆甜瓜高效再生体系的建立及NPR1/HRP双价抗病基因转化 总被引:1,自引:0,他引:1
以厚皮甜瓜5d龄无菌苗子叶为外植体,MS和1/2MS为基本培养基,研究了添加6-BA、IAA和卡那霉素不同浓度,进行甜瓜再生体系与根癌农杆菌介导的转化体系的建立。结果表明:甜瓜子叶最适宜的不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.3mg/L,芽伸长培养基为MS+6-BA 0.75mg/L+IAA 0.3mg/L,生根培养基为1/2MS+IAA 0.3mg/L,适宜的转化条件为外植体预培养48h,农杆菌菌液浓度为OD600=0.3~0.4,侵染时间为15min,22℃暗培养48~55h。经75mg/L的卡那霉素筛选,共获得再生甜瓜幼苗21株,其中8棵经PCR鉴定证明NPR1/HRP双价抗病基因已经整合到甜瓜基因组中,即转化率为38%。 相似文献
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草莓主栽品种再生和转化的研究 总被引:41,自引:2,他引:41
建立草莓主栽品种高效、稳定的离体再生体系和遗传转化体系, 获得了转基因植株。‘弗吉尼亚’和‘森嘎拉’的叶片离体再生芽频率达到100 %。试管苗叶片与农杆菌菌株EHA105 共培养3 d。共培养后的叶片在附加卡那霉素40 mg/L 的再生培养基上选择培养4周后, 外植体再生出转化芽, 弗吉尼亚的转化芽再生频率可达6. 8 %。采用组织化学染色法对随机选取的10 个GUS 基因转化植株进行基因表达测定, 结果5 个植株强烈表达GUS 活性。转bar 基因植株在附加除草剂草丁膦10 mg/L 的培养基上能够正常分化, 在田间对草丁膦表现出强烈抗性。转基因植株开花、结果正常。 相似文献
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五彩朱蕉的组培快繁技术研究 总被引:1,自引:0,他引:1
五彩朱蕉接种于 2种添加不同浓度的细胞分裂素 6 - BA诱导培养基及 5种添加不同浓度的细胞分裂素 6 - BA的继代增殖丛生芽培养基进行培养试验 ,结果表明 ,MS+6 - BA10 mg/L +AD5mg/L易诱导出愈伤组织 ,MS+6 - BA3~ 4 mg/L+AD5 mg/L,上述培养均附加蔗糖 30 g/L,卡拉胶4 g/L ,对朱蕉的诱导及丛生芽的生长有较好的作用 ,平均分化芽率为 5~ 7个 ,不定芽生长正常 ,将不定芽接种在 MS+IBA0 .5 mg/L+蔗糖 30 g/L+卡拉胶 4 g/L有较好的生根作用 ,10 d后根系粗壮 ,生长正常 ,组培小苗在假植移栽后成活率在 90 %以上。 相似文献
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袋鼠花的组织培养 总被引:8,自引:0,他引:8
对袋鼠花( Anigozanthos) 组织培养研究表明: 外植体消毒以0. 1 %升汞溶液浸泡, 7~8 min 为宜; 不同浓度激素对其愈伤组织形成、分化以及根的形成有不同的影响, 随着62BA 浓度的增加, 愈伤组织的诱导率有增加的趋势; 生长素与分裂素的比例决定着愈伤组织的分化; 小苗在1/ 2 MS 培养基上生根最好, 6-BA 对其生根有抑制作用。各培养阶段最适培养基: (1) 愈伤, MS + 6-BA 1 mg/L + NAA 0. 1 mg/L +3 %活性炭; (2) 芽诱导, MS + 6-BA 0. 5 mg/L + NAA 0. 5 mg/L ; (3) 生根, 1/ 2 MS + IBA 0. 2 mg/L。 相似文献
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白桦组织培养技术研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以白桦树种子和腋芽为外植体,通过研究培养基中不同植物生长调节剂配比对外植体诱导、芽苗增殖和生根等环节的影响,筛选出适合白桦组织培养的培养基配方.结果表明:以MS为基本培养基,附加蔗糖30 g/L、琼脂6 g/L,适合于白桦种子萌发生长的植物生长调节剂配比为BA 0.2 mg/L NAA 0.05 mg/L,而BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L适合腋芽诱导,诱导率高达87.0%,而且苗形态好,长势强,BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L的植物生长调节剂配比利于芽苗的增殖,繁殖系数可达到每4周4~5倍,适于芽苗生根的培养基为1/2 MS NAA 0.05 mg/L,平均生根数为4.5条,最多根数为8条,根系发达,移栽后成活率达90%以上. 相似文献
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薯蓣茎段组织培养的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以薯蓣的单芽茎段为外植体,采用不同种类、浓度的植物生长调节剂进行离体培养。研究结果表明,以MS为基本培养基(蔗糖30g/L、琼脂6g/L),附加0.2 mg/L BA 0.01 mg/L NAA作为芽诱导培养基效果最好,诱导率高达83.2%,芽苗长势良好,叶片较大,叶色浓绿;继代增殖培养以MS 0.5 mg/L BA 0.05 mg/L NAA为最佳培养基,培养25d后增殖系数达4.38;诱导生根的最佳培养基为1/2 MS 0.2 mg/L IBA,生根率为86.7%,组培苗根系粗壮,长势旺盛。 相似文献
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无籽西瓜的组织培养及快速繁殖试验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
WU Wenyong 《长江蔬菜》2008,(8)
以无籽西瓜顶芽为外植体,以MS为基础培养基,通过不同激素配比对离体顶芽的分化、增殖和生根效果进行试验研究。结果表明,无籽西瓜组织培养适宜的诱导培养基为:MS 6-BA 2.0 mg,L NAA 0.05 mg/L 30 g/L蔗糖 4 g/L琼脂;适宜的增殖培养基为:MS 6-BA 0.25 mg,L NAA 0.01 mg/L;适宜的生根培养基为:1,2 MS IBA 0.5 mg/L。 相似文献