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转il-4基因番茄的分子检测及田间分析 总被引：2，自引：0，他引：2
通过花粉管通道介导il-4基因转化番茄L402、中疏4号、强力米寿和大黄4个品种.利用PPT抗性筛选、PCR扩增、PCR-Southern杂交和Western技术,对il-4基因转化番茄的后代进行检测,并对il-4基因在T3代番茄中的传递规律、T3代植株的田间表现进行调查.研究结果表明,T3代植株中il-4基因的分离情况不符合阳性植株数:阴性植株数=3:1的孟德尔分离规律,转il-4基因阳性植株数偏低.与非转基因植株(对照)相比,转il-4基因阳性植株的开花期延迟、田间抗病性下降、植株高度变矮、结实数/株减少、单株结果数减少,生长势和结实能力等综合农艺性状明显降低.而转基因阴性植株的综合农艺性状与非转基因植株(对照)相比,则差异不显著.花粉管通道法可以介导il-4基因转化番茄,il-4基因可以在转化后代中遗传. 相似文献
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为完善转il-4基因番茄的筛选及鉴定工作,本实验比较了il-4基因在PPT抗性筛选与非PPT抗性筛选植株中的阳性率,对il-4基因在T6代及杂交F1代番茄中的传递规律和植株表现型进行调查。本文对L402、‘中疏4号’、‘大黄’三个品种的T6代及杂交F1代植株进行PPT抗性筛选及非PPT抗性筛选,特异性的PCR扩增、PCR-Southern杂交。研究结果表明,il-4基因在非PPT抗性筛选植株中的阳性率高于PPT筛选植株,T6代及F1代植株中il-4基因的分离情况不符合孟德尔分离规律,其分离情况远远低于3:1的分离比率。转il-4基因番茄与非转基因植株（对照）相比发现,转基因植株在一至多个性状上发生了不同程度的变异,杂交F1代与亲本T6代植株相比,杂交F1代有少数组合存在杂种优势。 相似文献
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利用根癌农杆菌介导法,以白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)基因转化中甘11号甘蓝.本研究对可能影响il-4转化率的外植体类型、外植体的预培养时间、农杆菌的侵染时间以及外植体与农杆菌的共培养时间进行了优化.试验结果表明:il-4基因对带1～2 mm子叶柄的子叶的转化率显著高于下胚轴;带柄子叶在预培养1 d、侵染3 min、共培养1 d时,转化效果最好,转化率达23.3%;下胚轴在预培养1～3 d,侵染3～5 min,共培养1～2 d时,转化效果较好,转化率最高可达13.3%.经PCR检测及PCR-Southern杂交,初步证明目的基因il-4已经转入甘蓝的再生植株.转il-4基因甘蓝的PCR阳性再生植株已经开花并产生了后代. 相似文献
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利用花粉管通道法将BcWRKY2抗旱基因导入玉米的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
利用花粉管通道法将含有PPT抗性筛选标记的BcWRKY2转录因子基因导入优良玉米自交系.采用正交设计对玉米品种、导入时间及DNA浓度等条件进行了优化.对T0代种子进行了除草剂抗性筛选,结果表明玉米品种龙抗11授粉后16h进行导入及DNA导入浓度为200ng/μL时效果最佳.对获得的除草剂抗性植株进行PCR及PCR-Southern检测,得到PCR阳性植株71株,初步证明了外源目的基因已整合到玉米基因组中. 相似文献
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利用大白菜小孢子胚状体获得抗除草剂转基因植株 总被引：20，自引：0，他引：20
大白菜小孢子培养获得的子叶期胚状体,经粉碎的玻璃碴摩擦后,与农杆菌共培养,在加筛选剂Ｂａｓｔａ（和ｐｈｏｓｐｈｉｎｏｔｈｒｉｃｉｎ ５ｍｇ／Ｌ）的培养基上,再生出数株绿苗。自交留种后,对其后代苗期进行的Ｂａｓｔａ抗性鉴定显示,有４株抗此除草剂。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果显示,抗性植株的基因组中各有一个ｂａｒ基因插入位点。对转化株的小孢子进行再培养,后代小孢子植株对Ｂａｓｔａ抗性的分离比显示,此转基因 相似文献
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对导入马铃薯蛋白酶抑制剂基因（pinⅡ）的大白菜和菜心植株当代和自交后代进行了菜青虫（Pieris rapae L．）和小菜蛾（Plutella xylostella L．）的抗性筛选。室内生物测定表明：取食转基因植株的1,2龄幼虫死亡率显著高于对照;取食转基因T1大白菜的菜青虫生长发育受到明显抑制,转化株老叶对菜青虫幼虫的毒杀作用明显高于嫩叶;取食转基因T2大白菜和菜心不同转化株的小菜蛾生长发育受到不同程度的抑制,转基因大白菜比菜心对小菜蛾有更好的抗虫效果,取食转基因菜心2—24植株小菜蛾的幼虫死亡率最高达64％,取食转基因大白菜2-6小菜蛾幼虫死亡率最高达90％;取食转基因植株小菜蛾的化蛹率、蛹重和羽化率亦有不同程度的降低。 相似文献
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以成熟胚盾片作为受体的籼稻基因枪法遗传转化 总被引：2，自引：0，他引：2
以水稻成熟种子的盾片用作基因枪(PDS-1000/He)轰击的外植体, 将包含hph和gus基因的质粒pILTAB227导入籼稻Basmati-1, 在靶组织轰击后8周, 获得抗性再生植株, 经点杂交和Southern杂交证实外源基因整合到水稻基因组, 在后代中观察到外源基因呈单一位点的孟德尔式分离。 本文还探讨了有关因子对基因瞬时表达的影响, 寻求 相似文献
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利用大白菜抗感干烧心病F2群体构建AFLP遗传连锁图 总被引：7，自引：0，他引：7
大白菜(BrassicacampestrisL.ssp.pekinensis)原产于中国,是我国蔬菜栽培中分布最广、种植面积最大的蔬菜作物之一,也是我国的主要出口创汇蔬菜之一。但是近年来大白菜干烧心病却严重影响了其内部质量和出口创汇。此病是由于缺钙引起的生理性病害,不同品种间在抗干烧心病特性上表现出明显的差异,选育抗干烧心病品种值得引起关注。本实验利用大白菜离体叶片扦插方法,结合多年青岛农科院研究人员的田间观察对大量的大白菜品种进行广泛筛选,得到了抗病品种和感病品种。以大白菜抗干烧心病品种F1-6-5-2-2-2-3和感干烧心病品种P14-2-1-15杂交的F2代115个单株作为构建遗传图谱的群体,通过对192对引物组合的筛选,利用32对引物得到了280个AFLP多态性位点,经Jionmap3.0软件处理,得到了一张含105个标记位点、11个连锁群、覆盖长度为669.7cM的连锁图。每个连锁群上的标记数在4￣27之间,平均图距在3.3￣12.5cM之间,连锁群长度在23.4￣98.9cM之间。105个AFLP位点中偏离孟德尔遗传规律的比率为39.0%。为大白菜干烧心QTL定位和分析奠定了基础。 相似文献
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Junjie Zhang Fan Liu Lei Yao Chen Luo Yue Yin Guixiang Wang Yubi Huang 《Breeding Science》2012,62(2):105-112
Lepidopteran larvae are the most injurious pests of Chinese cabbage production. We attempted the development of transgenic Chinese cabbage expressing the potato proteinase inhibitor II gene (pinII) and bioassayed the pest-repelling ability of these transgenic plants. Cotyledons with petioles from aseptic seedlings were used as explants for Agrobacterium-mediated in vitro transformation. Agrobacterium tumefaciens C58 contained the binary vector pBBBasta-pinII-bar comprising pinII and bar genes. Plants showing vigorous PPT resistance were obtained by a series concentration selection for PPT resistance and subsequent regeneration of leaf explants dissected from the putative chimera. Transgenic plants were confirmed by PCR and genomic Southern blotting, which showed that the bar and pinII genes were integrated into the plant genome. Double haploid homozygous transgenic plants were obtained by microspore culture. The pinII expression was detected using quantitative real time polymerase chain reaction (qRT-PCR) and detection of PINII protein content in the transgenic homozygous lines. Insect-feeding trials using the larvae of cabbage worm (Pieris rapae) and the larvae of the diamondback moth (Plutella xylostella) showed higher larval mortality, stunted larval development, and lower pupal weights, pupation rates, and eclosion rates in most of the transgenic lines in comparison with the corresponding values in the non-transformed wild-type line. 相似文献
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Summary An efficient transformation system for Chinese cabbage cotyledon explants was developed using Agrobacterium tumefaciens strains LBA4404 harbouring the plasmid pMOG 411 and the plasmid pBinΩSCK respectively. Various factors affecting the transformation efficiency and subsequent regeneration were identified. The age of seedlings, growth conditions and status of Agrobacterium suspension, preculture of explants, cocultivation time, ratio between Agrobacterium and explants, acetosyringone and concentration of kanamycin had a significant influence on transformation frequency and plant regeneration. The presences of the antibacterial peptide gene and the cowpea trypsin inhibitor gene in those selected shoots in kanamycin medium were confirmed by PCR, Southern blotting and Northern blotting, The frequency of regeneration from cotyledons was analyzed in eight parental lines of Chinese cabbage and five lines were suitable for obtaining transformed plants, among which Qingmaye C and Qingmaye D were more responsive than other lines. 相似文献
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以白菜为试材,研究了不同浓度氯化钙对其生长特性及货架寿命的影响。结果表明:(1)低浓度钙处理能促进白菜的生长发育,提高其产量,其中以0.25?Cl2处理效果最好;(2)钙处理可明显降低白菜腐烂率,增加组织中钙的含量,抑制白菜的膜脂过氧化作用,降低质膜透性和呼吸强度,延长白菜的货架寿命。其中以1.0?Cl2处理延缓组织衰老腐烂效果最好。 相似文献
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授粉方式与蜂群群势对杂交大豆授粉效果的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为提高大豆不育系的异交结实率,研究了授粉方式与蜂群群势对杂交大豆产量与品质的影响。采用人工授粉、自然授粉和蜜蜂授粉3 种方式,小蜂箱蜂脾1 脾、2 脾、3 脾3 种蜂群的群势对网室杂交大豆进行授粉。统计分析大豆花期采集蜂数量、采集蜂出勤规律、不同节位的结荚率、父母本大豆产量性状,比较3 个处理方式的授粉效果。随着网室内蜜蜂脾数的增加,出勤采集蜜蜂数量也随之增加,蜜蜂访花最活跃的时间均集中在9:00—13:00。不论是自然授粉还是蜜蜂授粉,都表现为母本中上部节位的结荚率高于下部。与自然授粉相比,蜜蜂授粉杂交大豆母本的单株结荚率、单株粒数、十株产量显著提高(P＜0.01),百粒重有所减少。蜜蜂授粉方式优于自然授粉和人工授粉方式,1 脾蜜蜂授粉区内单株荚数为49.4 个,单株粒数为96.1 个,百粒重为20.8 g,十株产量为196.6 g。蜜蜂授粉提高了母本的大豆结籽产量,小蜂箱1脾（即标准脾0.5脾）蜜蜂即可满足20 m2网室杂交大豆的授粉。 相似文献
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为研究不结球白菜[Brassica campestris L. ssp. chinensis (L.) Makino var. communis Tsen et Lee]叶片紫色性状的遗传规律,选用紫色和绿色不结球白菜亲本纯系各一个配制正反交组合,并构建该杂交组合的6 个世代群体（P1、P2、F1、B1、B2和F2）,利用分光光度计在540 nm处测定6 世代家系的不结球白菜叶片花青素相对含量,最后花青素相对含量的遗传规律采用多世代联合的数量性状分离分析方法研究。结果表明：不结球白菜杂交组合后代的花青素相对含量介于2 个亲本之间,呈现出多峰或单峰偏态分布,且偏向于紫色亲本。其遗传模式符合2 对加性-显性-上位性主基因+加性-显性-上位性多基因模型（E-0模型）;其中F2 的主基因遗传率为59.17%,多基因遗传率为27.58%,环境方差占表型方差的比例为19.48%;B1（F1×紫）的主基因遗传率为74.12%。环境因素对不结球白菜花青素相对含量存在一定的影响,因此建议在光照充足及温度适宜的秋季,且在分离早期世代进行不结球白菜紫叶性状的遗传选择,其中B1的遗传效率较高。 相似文献
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以抗除草剂Bar基因稳定转化谷子技术研究 总被引：1，自引：0，他引：1
农杆菌介导的谷子遗传转化效率一直是制约谷子功能基因研究及转基因育种效率的主要因素。本研究以冀谷11谷子幼穗为外植体, 选取0.5~1.0 cm的幼穗, 切成0.5 cm左右的小段, 置改良后的MS培养基上诱导15~20 d形成胚性愈伤组织3120块。愈伤组织侵染转化前用侵染液悬浮浸泡, 并经45°C热激预处理3 min, 可以有效提高26.1%的瞬时遗传转化效率。将转化后的愈伤组织经草丁膦(PPT)筛选后获得513块抗性愈伤组织, 抗性愈伤组织获得率为16.4%。抗性愈伤组织经分化、壮苗培养后获得7株抗性植株, 经PCR和Southern杂交检测得到6株T0代转基因阳性株, 对T3代转化植株叶片进行PPT抗性分析, 并结合Bar蛋白抗体试纸条鉴定, 表明Bar基因已稳定整合到谷子基因组中。本研究建立了农杆菌介导转化谷子优良品种的遗传转化体系, 对提高谷子转基因育种效率和谷子模式研究系统的建立有重要意义。 相似文献