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【目的】温州蜜柑一般表现为雄性不育、果实无核，收集国庆1号温州蜜柑（Citrus unshiu Marc.，简称G1）种子，用于培育珠心胚苗并发掘多倍体新种质，为其提纯复壮和珠心胚变异育种提供基础材料。【方法】从G1成熟果实剥取种子，浸泡消毒后离体播种至播种培养基；待幼苗长至有3～5枚真叶时，采用流式细胞仪分析倍性和SSR分子标记鉴定遗传来源。【结果】从约12 500个果实中剥取获得106粒种子，离体播种后41粒种子萌发，经培养获得62株实生幼苗；对所有幼苗进行倍性检测，获得四倍体1株，其余61株均为二倍体；用4对多态性SSR引物对获得的四倍体和随机筛选的38株二倍体植株进行分子鉴定，表明发掘的四倍体和35株二倍体的带型与亲本G1完全一致，推测其均为珠心胚来源，且四倍体为G1珠心细胞自然加倍而形成；其余3株二倍体在部分SSR位点与G1带型不一致，推测由G1与周边其他品种杂交而来。【结论】这些珠心胚苗二倍体及四倍体种质为国庆1号温州蜜柑提纯复壮、珠心胚变异育种及相关基础研究提供了珍贵的种质资源。 相似文献
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为了发掘酸橙Citrus aurantium L.同源四倍体种质,通过形态比较、根尖染色体压片法和SSR分子标记对播种培育的一批酸橙实生苗进行倍性鉴定和来源分析。从1620株酸橙实生群体中获得四倍体7株,群体四倍体自然发生率为0.43%;SSR分子标记分析显示,7株四倍体酸橙均由二倍体亲本珠心细胞自然加倍形成,为同源四倍体。与二倍体酸橙相比,四倍体酸橙植株明显矮化,主根粗且侧根少,叶片浓绿且较宽,气孔增大。四倍体的叶形指数、油胞密度和气孔密度分别为二倍体的61%、30.6%和54.9%,均极显著(p<0.01)低于二倍体,而叶片总厚度、上表皮厚度、下表皮厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度、栅栏组织与海绵组织厚度比和叶片组织紧密度均极显著大于二倍体。 相似文献
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《果树学报》2021,(5)
【目的】从衢州香橙(Citrus junos ‘Quzhou xiangcheng’)二倍体实生后代中发掘多倍体,希望获得一批四倍体新种质。【方法】秋季采摘衢州香橙果实,剥取种子并播种,种子萌发后,根据多倍体特征进行形态初选,筛选疑似四倍体植株,并用流式细胞仪和根尖染色体压片法对疑似四倍体植株进行倍性鉴定,最后对鉴定的四倍体和二倍体植株的形态、气孔和叶片解剖结构等特性进行评价。【结果】从衢州香橙400株实生群体中初步筛选出疑似四倍体植株13株,经流式细胞仪和根尖染色体压片法最终鉴定获得衢州香橙四倍体3株,筛选成功率为23.08%,群体四倍体自然发生率为0.75%。与二倍体衢州香橙相比,四倍体植株生长缓慢,矮化明显,主根粗、侧根少,叶片浓绿,叶较宽,气孔增大。四倍体的叶形指数、油腺点密度、气孔密度和叶片组织疏松度均显著小于二倍体,而叶片总厚度、上下表皮厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度、栅海比和叶片组织紧密度均显著大于二倍体。【结论】首次鉴定获得了衢州香橙的四倍体植株,并评价了其形态及解剖特性,为柑橘多倍体育种及相关基础研究奠定了种质基础。 相似文献
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三倍体葡萄柚实生后代多倍体的发掘与SSR遗传鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】从三倍体葡萄柚自然授粉的实生后代中发掘多倍体,希望获得一批多倍体新种质,并为探索三倍体遗传规律奠定基础。【方法】秋季采摘三倍体葡萄柚成熟果实,剥取种子,MT+1 mg·L-1GA3培养基播种,待种子萌发后,用流式细胞仪快速检测其倍性,并采用SSR(simple sequence repeat)分子标记鉴定其不同倍性后代植株的来源。【结果】获得了二倍体、三倍体、四倍体、五倍体、六倍体和疑似非整倍体等不同倍性的再生植株各172、52、7、1、1、18株。用13对多态性SSR引物鉴定其来源,结果表明,由二倍体可能三倍体母本所产生的1X配子与周边其他二倍体品种的花粉授粉而来,也可能由三倍体母本产生的重组型2X配子的无融合生殖而来;三倍体大部分由珠心细胞发育而来;四倍体为杂交起源的四倍体;五倍体和六倍体与母本(三倍体葡萄柚)的带型完全相同。【结论】上述活体材料的发掘为柑橘多倍体育种奠定了种质基础。 相似文献
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秋季采摘柑橘成熟果实并剥取种子,将小粒种籽和瘪籽播于MT培养基,待萌发长出2～3片真叶时,取其叶片检测倍性;将饱满种籽播种于露地,对其幼苗首先通过形态筛选获得似多倍体的植株,然后取其叶片用流式细胞仪进行倍性检测;最后对获得的多倍体植株进行SSR分子鉴定。试验结果表明,获得早金甜橙、卡特夏橙、塔罗科血橙、日辉橘、Ortanique橘橙、默科特橘橙、华农本地早橘、朱红橘和Flame葡萄柚等9个品种的四倍体分别为6、1、3、12、3、6、2、1和10株;获得早金甜橙、塔罗科血橙、Itabori甜橙和Ortanique橘橙等4个品种的三倍体分别为1、1、2、4株。用13对多态性SSR引物对胚抢救获得的三倍体和四倍体的来源进行鉴定,发现早金甜橙、Itabori甜橙的三倍体再生植株为异源三倍体;塔罗科血橙、Ortanique橘橙的三倍体可能为同源三倍体;早金甜橙和Ortanique橘橙的四倍体可能为同源四倍体;塔罗科血橙四倍体为异源四倍体。采用37对多态性引物对从饱满种籽中获得的8个品种四倍体的来源进行鉴定,发现均为同源四倍体。这些自然发掘的多倍体资源对柑橘无核育种和相关基础研究具有重要价值。 相似文献
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在山金柑自然群体中通过流式细胞术发掘到1株四倍体植株,对其叶片、花朵、花粉、果实、种子等性状进行鉴定,并利用该材料自交创制新的四倍体材料。鉴定结果表明:四倍体相对于二倍体,叶片更宽、更厚、叶形指数变小,叶片气孔密度变小、气孔器更大;四倍体的花直径、整花长度、花瓣长度、花丝长度、雌蕊长度、花粉粒均极显著大于二倍体,花粉外壁纹饰密度极显著小于二倍体;四倍体的果形指数变大,果皮厚度增大,色泽指数无显著差异;四倍体种子横径与二倍体无显著差异,纵径极显著大于二倍体;其种子胚类型为多胚。四倍体山金柑自交后代均为四倍体,可作为柑橘育种和基础研究的资源。 相似文献
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【目的】三倍体植物由于减数分离紊乱，难以形成可育的雌雄配子，属于天然的不育类型，配置以2x×4x多个杂交组合，旨在创制柑橘三倍体种质，丰富柑橘无核材料。【方法】以单胚性二倍体品种东试早柚为母本与四倍体柑橘材料ZP（纸皮，四倍体甜橙）、PT（四倍体葡萄柚）、NH（四倍体，诺瓦橘柚+HB柚体细胞杂种）为父本进行倍性杂交，授粉后85 d和100 d采摘幼果并对未成熟种子实施幼胚离体挽救培养，获得再生植株后用流式细胞仪和InDel标记对其倍性及遗传来源进行鉴定。【结果】从3个倍性杂交组合的168株再生植株中，通过倍性检测获得三倍体幼苗128株且均为双亲杂交后代，其中东试早柚×ZP共计60株、东试早柚×PT共计60株、东试早柚×NH共计8株。【结论】通过倍性杂交高效创制三倍体柑橘新种质，为柑橘早熟无核育种及相关基础研究提供了珍贵的育种材料。 相似文献
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苹果三倍体后代培养及倍性鉴定 总被引：3，自引：1，他引：2
以自然授粉的三倍体苹果品种乔纳金的种子为材料,研究了培养方式对苹果三倍体实生后代获得的影响及实生后代的倍性水平。结果表明,离体培养与常规播种在乔纳金种子成苗率上存在明显差异,其中离体培养的成苗率是48.1%,常规播种的成苗率是20.9%,离体培养获得的植株是常规播种获得的植株的2倍以上。本研究获得的690个乔纳金实生后代中以非整倍体植株占多数,共获得非整倍体452株,占植株总数的65.5%。在后代中有13个为多倍体,其中离体培养获得7株三倍体和4株四倍体,而常规播种只获得2株三倍体,表明离体培养可以获得较多的多倍体资源。乔纳金实生后代中不同倍性植株在形态上差异显著,根据植株形态和叶形指数,可以容易地将多倍体(三倍体、四倍体)植株与二倍体植株和非整倍体植株区分开来。 相似文献
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采用流式细胞仪分析柑橘愈伤组织的细胞周期 总被引：1，自引：0，他引：1
细胞周期分析可为研究柑橘愈伤组织理化诱变提供依据。试验以暗柳橙、长沙橘、澳洲指橘、纳维来特脐橙等4种培养多年的柑橘愈伤组织为试材,使用流式细胞仪分析其特定时间段的细胞周期,进而找到柑橘愈伤组织理化诱变的最佳时期即分裂最旺盛时期。结果表明,待测4种基因型柑橘愈伤组织在继代2周时处于分裂最旺盛时期,它们的S期时相比例分别为22.4%、21.9%、21.0%和22.9%。同时发现,待测的4种柑橘愈伤组织生长周期长短与再生能力有一定的相关性。极易再生的暗柳橙生长周期最短,易再生的长沙橘、澳洲指橘次之,丧失再生能力的纳维来特脐橙生长周期最长。 相似文献
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寄主凤凰柚对柑橘衰退病病毒甜橙分离株构成的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为研究不同柑橘类型对柑橘衰退病病毒构成的影响，将9个保存在新会橙上的引起甜橙茎陷点症状的柑橘衰退病毒强毒分离株嫁接接种到凤凰柚后，比较了接种前后p25基因的HinfⅠRFLP 和SSCP变化情况。分离株 CT90与CT20接种前后的RFLP组群没有发生变化；RFLP组群发生变化的分离株中有6个由混合组群变为单一组群。此外，除分离株CT90接种前后的SSCP谱带保持不变外，其余8个分离株从新会橙接种到凤凰柚后，SSCP谱带数均呈减少趋势。试验结果倾向于表明某些能在甜橙上增殖的CTV株系在凤凰柚上的增殖受到了抑制。 相似文献
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Sajjad Hussain Franck Curk Patrick Ollitrault Raphaël Morillon François Luro 《Scientia Horticulturae》2011
All commercial citrus rootstocks are polyembryonic and propagated by seeds. Although these seeds produce uniform plant material most of the time, zygotic or polyploid citrus seedlings may arise. The aim of this study was to understand how zygotic or tetraploid rootstock could affect a citrus rootstock selection field trial. A trifoliate orange selection field trial, which was planted in 1974 and grafted with clementine, was re-investigated with respect to the presence of rootstocks that were not true-to-type. Among the 288 trees investigated, flow cytometry identified 2.4% of rootstocks as tetraploid and SSR markers indicated that 6.6% were zygotic. Yield data showed that the presence of tetraploid rootstock dramatically decreased (by about 45%) clementine fruit production. However, zygosity did not always affect fruit production and a range of effects were observed, from a slight increase in production to a 24% decrease. Exclusion of non-true-to-type genotypes from the production analysis indicated that the best candidate for rootstock was a clone previously ranked in the middle of the 32 rootstocks under evaluation. However, the presence of zygotic rootstock did not appear to cause any significant differences in fruit quality during the first 5 years of the investigation, which suggests that non-true-to-type plants cannot be identified by fruit quality parameters. This study indicates that tetraploid and zygotic rootstocks have a strong impact on citrus fruit production in orchards, and removal of off-type seedlings is required prior to planting in any agronomic trial. 相似文献
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不同类型柑橘中黄脉病毒衣壳蛋白基因的保守性及复制水平 总被引：1，自引：0，他引：1
为研究不同柑橘品种对柑橘黄脉病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)变异的影响,将CYVCV毒株CQ01嫁接接种于4类共35个柑橘品种,对不同植株中CYVCV的衣壳蛋白(CP)基因进行分析,结果发现仅有少数位点发生了变异。运用RT-qPCR技术检测不同柑橘品种中CYVCV的相对含量,发现甜橙类品种中CYVCV的相对含量最高,墨西哥来檬中CYVCV的相对含量最低。植株中CYVCV的含量与其症状不存在明显的关联。 相似文献
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以‘伏令夏橙’实生苗为材料进行原位转化体系建立及优化。首先，研究侵染部位对原位转化效率的影响：使用带有PBI121载体的农杆菌分别侵染5周龄‘伏令夏橙’实生苗上胚轴切口、顶芽切口（保留/去除真叶）2次，共培养3 d后进行抗性筛选及暗处理，7周后提取叶片DNA用于转基因植株PCR鉴定；之后，以上胚轴切口作为侵染部位进一步研究苗龄对原位转化效率的影响。研究结果表明，5周龄上胚轴切口再生率为93.10%，转化率为20.68%；保留/去除真叶后侵染顶芽时，再生率分别为81.74%和94.55%，转化率分别为19.09%和17.82%；4周龄和6周龄上胚轴切口再生率为94.59%和91.50%，转化率为25.42%和19.36%。可见利用农杆菌介导的遗传转化法原位转化4周龄‘伏令夏橙’的上胚轴切口可获得较高的转化效率。原位转化操作简单、周期短、转化率高，在甜橙遗传育种研究中具有重要的应用价值。 相似文献
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《Scientia Horticulturae》2005,107(1):51-57
Interploid crosses of diploid Kinnow mandarin, Succari sweet orange and Sweet lime with tetraploid Kinnow were made reciprocally for the production of triploid plants. Low fruit set and occurrence of underdeveloped or empty seeds was common in all interploid crosses. The hybrid fruits harvested after 12–14 weeks or 7 months after pollination produced many underdeveloped and few developed seeds; however, tetraploid Kinnow as seed parent yielded more developed seeds per fruit. The under developed seeds were devoid of endosperm. Nucellar embryony was higher in the diploid than in the tetraploid strain of Kinnow. Immature embryos of seeds harvested 12–14 weeks after pollination were cultured in vitro on MS media supplemented with adenine sulphate (20 mg l−1) and malt extract (500 mg l−1). Maximum germination (75%) of hybrid embryos from underdeveloped seeds was obtained in 4× × 2× cross of Kinnow strains. The germinated plantlets were transferred into pots and noted 59–89.3% survival rate in various crosses. 相似文献
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类胡萝卜素裂解双加氧酶（CCD）可催化类胡萝卜素在特定位点氧化裂解生成多种生物活性化合物，其活性差异一定程度上决定了植物体内类胡萝卜素含量和组成变化。为了探讨柑橘中CCD1蛋白对类胡萝卜素积累的影响，从红肉脐橙（Citrus sinensis L. Osbeck）果实中克隆了CCD1 基因，将其特异片段通过重组反应连接到pHGRV 载体中，构建CCD1 的RNA 干扰载体pHGRV-CCD1。利用农杆菌介导的方法将其转入‘国庆1 号’蜜柑、‘伏令夏橙’和‘马叙’葡萄柚愈伤组织中，经PCR 鉴定分别获得6、4、4 个转基因干扰系。3 种柑橘材料转基因干扰系中CCD1 基因的表达水平均较野生型显著下调，其中‘马叙’葡萄柚转基因干扰系Rm2 的表达水平仅为野生型的8.4%，干扰效果最佳。CCD1 转基因干扰系愈伤组织外观多数呈现与野生型对照相近的色泽，仅Rm2 系可见较为明显的颜色变化；综合分析3种柑橘材料转基因前后类胡萝卜素含量变化，发现CCD1 基因抑制表达后，紫黄质、9–顺式–紫黄质的含量均较野生型显著增加，表明其可能是CCD1 在柑橘愈伤组织体内优先选择的裂解底物。 相似文献
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2011—2012年采用盆栽苗人工接种和田间调查相结合的方法,研究了贡柑产区近年为害严重的黑腐病(病原菌为Alternaria citri)的发生规律。结果表明:在人工接种条件下,其病原菌可以从没有伤口的叶面侵入,但更易从伤口入侵;贡柑和默科特桔最感病,其次是椪柑和南丰蜜桔,在有伤口和连续下雨的条件下马水桔、沙糖桔和温州蜜柑的嫩芽也偶被感染,橙类、柚类、柠檬和金柑抗病。在田间,贡柑、默科特桔最感病,其次是南丰蜜桔、椪柑,马水桔、沙糖桔、温州蜜柑未见发病。刚抽发的嫩梢和幼果易感病,组织越嫩越易感病,老叶、成熟果实感病少,幼树和刚结果树以及嫩梢多的树发病重。该病原菌孢子萌发需要高湿,下雨、高温、高湿有利于该病的发生和流行。夏梢发病最重,其次是春梢和幼果,秋梢发病轻。在人工接种条件下,只要下雨和温度达到15～30℃,1～3天即可显症,病斑沿着叶脉快速扩展。发病快、扩展快是其难防治的最大原因。 相似文献
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柑橘溃疡病抗性相关的SSR标记筛选 总被引：3，自引：0，他引：3
以抗柑橘溃疡病的‘宜昌橙2586’与易感病的‘岭南沙田柚’进行杂交,随机选取F1 代材料80 株,开展溃疡病抗性田间接种鉴定。鉴定结果表明,溃疡病抗性在F1 代分离明显,若将免疫和高抗类型均视为抗病,中抗、中感和感病类型均视为感病,则抗感的分离比例接近1︰1。采用集合分离分析法BSA (Bulked Segregant Analysis),结合SSR 分子标记技术,筛选到1 个与柑橘溃疡病抗性相关的分子标记CCR-110。利用F1 代分离个体和公认的抗感材料对标记进行验证分析,发现该标记表现较好的抗性相关性。F1 群体相关分析表明,该标记与柑橘溃疡病抗性的相关系数为0.79;采用最大似然法计算重组率为9.38%±3.5%,通过 Kosambi 函数将其转换成图距单位（cM）,遗传距离为9.11 cM;感病的甜橙类、柚类、枳类没有此标记,抗病的金柑类、宜昌橙类、香橙类、宽皮柑橘类的多数材料出现此标记。 相似文献