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1.
《动物营养学报》2015,(9)
本文旨在探讨L-肉碱对热应激大鼠机体脂质代谢的影响。选用48只成年健康雄性SD大鼠,以大鼠在43℃烘箱内每次热处理60 min建立热应激模型。将试验大鼠均分为对照组、热应激组、热应激+L-肉碱组,每天热应激处理前1h灌胃1次,热应激+L-肉碱组灌胃300mg/kg体重的L-肉毒碱,对照组和热应激组灌胃等量生理盐水,共14d。检测大鼠的体重、平均日采食量、肛温、血浆脂质含量、腓肠肌脂肪代谢酶活性的变化。结果显示:1)与对照组相比,热应激组和热应激+L-肉碱组大鼠8~14d平均日增重极显著下降(P0.01),料重比极显著升高(P0.01),1、7、14d肛温极显著升高(P0.01)。2)热应激+L-肉碱组大鼠7d腓肠肌激素敏感脂酶、14d腓肠肌脂蛋白脂酶活性显著高于对照组(P0.05),而热应激组相应时间点这2个指标与对照组没有显著差异(P0.05)。3)热应激组大鼠14d血浆游离脂肪酸含量极显著高于对照组(P0.01),而热应激+L-肉碱组大鼠14d血浆游离脂肪酸含量与热应激组相比极显著下降(P0.01)。4)其他所测指标(体重、平均日采食量、血浆甘油三酯和总胆固醇含量、腓肠肌肉碱脂酰转移酶和脂肪酸合成酶活性)3组间没有显著差异(P0.05)。由此可见,在热应激条件下,L-肉碱能通过脂类分解酶(激素敏感脂酶、脂蛋白脂酶)途径缓解大鼠机体脂肪代谢的异常,使血浆游离脂肪酸含量趋于正常,从而减少热应激对机体代谢的影响。 相似文献
2.
为了探究家蚕滞育发动期间呼吸耗氧量下降与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)含量变化的关系,用高效液相色谱法和分光光度法分别检测在25℃条件下产下后12～72 h的二化性家蚕滞育性卵与非滞育性卵中的还原型NAD(NADH)含量、氧化型NAD(NAD+)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性和胞质苹果酸脱氢酶(cMDH)活性。滞育性卵中的NADH+NAD+含量、NADH/NAD+值及LDH活性分别在产下后18、36、24 h达到峰值,而cMDH活性处于波动中。在产下后24～72 h,非滞育性卵中的NADH/NAD+值极显著低于滞育性卵,而LDH和cMDH活性极显著高于滞育性卵。据此可以推测,滞育发动期间家蚕滞育性卵的NAD+降解增强和NAD+再生下降共同导致呼吸耗氧量下降。 相似文献
3.
《动物营养学报》2021,33(5)
本试验旨在研究金华猪和长白猪各肠段主要产丁酸菌相对丰度及丁酸代谢的相关性。选取相同条件下饲养的240日龄金华猪和长白猪各10头,分别取不同肠段内容物,采用高通量测序技术分析不同肠段主要产丁酸菌的相对丰度,实时荧光定量PCR法测定产丁酸关键功能基因丁酰-CoA:乙酰-CoA转移酶和丁酸激酶相对表达量的变化,气相色谱法测定丁酸含量。结果表明:1)金华猪空肠和回肠布劳特氏菌属(Blautia)、丁酸球菌属(Butyricicoccus)、丁酸单胞菌属(Butyricimonas)、粪杆菌属(Faecalibacterium)和真杆菌属([Eubacterium] hallii group)相对丰度显著低于长白猪(P0.05),而颤螺旋菌属(Oscillospira)和罗斯伯里氏菌属(Roseburia)相对丰度显著高于长白猪(P0.05)。在金华猪和长白猪中,布劳特氏菌属、丁酸球菌属、粪杆菌属和真杆菌属相对丰度间均呈极显著正相关(r=0.48～0.88,P0.01)。2)金华猪回肠和结肠中丁酰-CoA:乙酰-CoA转移酶和丁酸激酶基因相对表达量显著低于长白猪(P0.05)。3)金华猪空肠、回肠、结肠中丁酸含量均显著低于长白猪(P0.05)。4)金华猪和长白猪肠道中丁酰-CoA:乙酰-CoA转移酶和丁酸激酶基因相对表达量与丁酸含量呈极显著正相关(r=0.570 4～0.722 1,P0.01);2个品种对比发现,长白猪相关系数均高于金华猪。由此可见,金华猪空肠和回肠产丁酸菌相对丰度显著低于长白猪,同时金华猪结肠产丁酸关键功能基因丁酸激酶和丁酰-CoA:乙酰-CoA转移酶相对表达量显著低于长白猪,与之相对应的是金华猪空肠、回肠和结肠中丁酸含量显著低于长白猪,这也在一定程度上解释了长白猪肠道丁酸含量高于金华猪的原因。 相似文献
4.
旨在研究磷酸二羟基丙酮对小鼠脂肪细胞三酰甘油及其关键代谢酶的影响。将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞,在诱导培养第14天,分别加入含0μmol·L~(-1)(ck组)、20μmol·L~(-1)(试验Ⅰ组)、50μmol·L~(-1)(试验Ⅱ组)、200μmol·L~(-1)(试验Ⅲ组)磷酸二羟基丙酮的完全培养基培养细胞,于0、36、72h收集细胞并进行ELISA及后续检测;利用双抗体夹心法检测三酰甘油(TG)代谢中关键酶含量,如乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、激素敏感脂肪酶(HSL)等。结果表明:1)在36和72h,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组合成的TG量极显著高于对照组(ck组)(P0.01);试验各组葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、二硫辛酰胺转乙酰基酶(DLAT)、二硫辛酸脱氢酶(DLD)和脂肪酸合成酶(FAS)含量均极显著高于对照组(P0.01);2)在36和72h,试验各组激素敏感脂肪酶(HSL)、肉碱脂酰转移酶1(CPT1)和游离脂肪酸(FFA)含量均极显著低于对照组(P0.01)。磷酸二羟基丙酮能够促进小鼠脂肪细胞三酰甘油的合成和沉积;磷酸二羟基丙酮还能极显著提高TG合成代谢中G6PD、DLAT、DLD、FAS的含量;能够极显著降低TG分解代谢中HSL、CPT1的含量。 相似文献
5.
本试验旨在研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控猪肠上皮细胞能量代谢的机制。用含不同浓度精氨酸(Arg)(100、350μmol/L)和雷帕霉素(RAP)(0、10 nmol/L)的DMEM-H培养基培养猪肠上皮细胞72 h后,采用Searhorse XF Analyzers检测细胞线粒体呼吸代谢指标,实时荧光定量PCR检测能量代谢相关酶的mRNA表达量,流式细胞术检测活性氧(ROS)的百分含量以及代谢组学检测代谢物的相对含量。结果表明:1)与仅含100μmol/LArg的培养基相比,添加10 nmol/L RAP至含100或350μmol/L Arg的培养基中后,细胞线粒体呼吸代谢指标基础呼吸、质子渗漏、最大呼吸、储备呼吸率和ATP生成的耗氧率均极显著降低(P0.01)。培养基中Arg浓度由100μmol/L提高到350μmol/L,除极显著提高ATP生成耗氧率(P0.01)以外,对细胞线粒体呼吸代谢其他指标无显著影响(P 0. 05)。2)与仅含100μmol/L Arg的培养基相比,在含100或350μmol/L Arg的培养基中添加10 nmol/L RAP极显著降低了糖酵解过程中相关酶的mRNA相对表达量,包括己糖激酶、丙酮酸脱氢酶、磷酸烯醇式丙酮酸激酶、柠檬酸合酶和异柠檬酸脱氢酶(P0.01),同时显著降低了脂肪酸代谢过程中脂肪酸合成酶和肉碱棕榈酰转移酶的mRNA相对表达量(P 0. 05)。培养基中Arg浓度由100μmol/L提高到350μmol/L对上述指标没有显著影响(P 0. 05)。3)与仅含100μmol/LArg的培养基相比,在含100或350μmol/L Arg的培养基中添加10 nmol/L RAP极显著降低了细胞内ROS的百分含量(P0.01),而不同浓度Arg之间则没有显著变化(P0.05)。4)与仅含100μmol/L Arg的培养基相比,在含100μmol/L Arg的培养基中添加10 nmol/L RAP显著或极显著降低了细胞提取物中丙氨酸、琥珀酸、柠檬酸、胆碱、肌醇和苏氨酸的相对含量(P0.05或P0.01),显著或极显著提高细胞提取物中亮氨酸、β-羟基异丁酸、Arg、赖氨酸、醋酸、糖蛋白和甲酸的相对含量(P0.05或P0.01)。综合上述结果可知,抑制mTOR信号通路显著抑制细胞呼吸代谢,即使增加Arg浓度也无法得到缓解,因此mTOR信号通路是Arg调控猪肠上皮细胞能量代谢的关键通路。 相似文献
6.
本试验旨在研究柠檬酸对小鼠脂肪细胞甘油三酯(TG)及其代谢产物含量的影响。将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞作为研究对象,在诱导培养第14天,加入含0(对照组)、20(试验Ⅰ组)、50(试验Ⅱ组)、200μmol/L的柠檬酸完全培养基(试验Ⅲ组)培养细胞,于0、36、72 h收集细胞检测TG合成和分解代谢中关键限速酶及代谢产物的含量。结果表明:在36和72 h,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组TG含量显著高于对照组(P0.05);各试验组醛缩酶(FDA)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和脂肪酸合成酶(FAS)含量均显著或极显著高于对照组(P0.05或P0.01);各试验组激素敏感脂肪酶(HSL)、肉碱脂酰转移酶1(CPT1)、游离脂肪酸(FFA)及乙酰辅酶A含量均极显著低于对照组(P0.01)。结果提示,柠檬酸能够促进小鼠脂肪细胞TG的合成和沉积,能显著或极显著提高TG合成代谢中FDA、ACC、FAS产物的含量,极显著降低TG分解代谢中HSL、CPT1、FFA及乙酰辅酶A产物的含量,20μmol/L为最佳剂量。 相似文献
7.
旨在探讨瞬时电位受体M2离子通道(TRPM2)在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)导致线粒体损伤过程中的作用。在已建立TRPM2 shRNA PMVEC的基础上,采用5MOI H9N2猪流感病毒感染细胞,在病毒作用后24和48 h提取各组细胞的线粒体进行蛋白定量,检测各组细胞线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮合成酶(NOS)、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性和ATP酶水平;利用激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化(JC-1染色)及细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI双染色法)情况。结果表明:H9N2-SIV感染后TRPM2 shRNA PMVEC内SOD活性、GSH水平和Na~+-K~+-ATP、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性显著高于对照shRNA PMVEC(P0.05或P0.01);mtNOS活性则极显著低于shRNA PMVEC(P0.01)。JC-1染色显示TRPM2-siRNA PMVEC线粒体膜电位水平高于对照shRNA PMVEC,但是AnnexinV-FITC/PI染色显示细胞凋亡则低于H9N2感染对照shRNA PMVEC。结果提示:TRPM2基因沉默有效减缓H9N2感染导致NOS产生,显著降低SOD、GSH、线粒体呼吸链复合物Ⅳ、Na~+-K~+-ATP的消耗以及线粒体膜电位的下降程度,进而有效缓解PMVEC线粒体损伤及细胞凋亡。 相似文献
8.
体外原代培养犊牛肝细胞,添加0、16、64和128μg/L脂联素（adiponectin,ADPN）,分别培养4、8h后,提取细胞总RNA。应用实时荧光定量PCR方法,检测脂氧化关键酶脂酰辅酶A氧化酶（ACO）、肝脏脂肪酸结合蛋白（L-FABP）、肉碱脂酰转移酶-Ⅰ（CPTⅠ）、肉碱脂酰转移酶-Ⅱ（CPTⅡ）mRNA表达变化。结果显示,在ADPN作用4h后,ACO、L-FABP、CPTⅠ、CPTⅡ基因mRNA水平均随ADPN浓度的增加而增加,且均显著高于对照组,呈剂量依赖关系;作用8h时,ACO表达也增加,但差异不显著,L-FABP在中高剂量组显著高于对照组,CPTⅠ和CPTⅡ在各ADPN处理组均显著高于对照组。结果表明,ADPN可显著促进脂氧化关键酶的表达,增强肝脏脂氧化作用,减少肝脂储存。 相似文献
9.
本试验旨在研究肌和β-丙氨酸对地塞米松诱导的C2C12细胞能量代谢损伤的调节作用。将C2C12细胞接种于6孔培养板中,待细胞分化5～6 d形成可收缩的肌管后,分为对照组(Control组,正常孵育36 h)、应激组(DEX组,正常孵育24 h+10μmol/L DEX孵育12 h)、肌肽组(Car组,10 mmol/L肌肽孵育24 h+10μmol/L DEX孵育12 h)和β-丙氨酸组(β-Ala组,10 mmol/Lβ-丙氨酸孵育24 h+10μmol/L DEX孵育12 h)。细胞培养结束后,收集细胞,测定细胞内ATP、钙离子(Ca2+)含量以及糖酵解代谢和线粒体相关酶活性。结果表明：与Control组相比,DEX组细胞内ATP、葡萄糖、乳酸含量及Ca2+-ATP酶、乳酸脱氢酶、丙酮酸激酶活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),糖原、Ca2+含量及己糖激酶、线粒体呼吸链复合酶IV活性显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。与DEX组相比,Car组细胞内葡萄糖、ATP含量及... 相似文献
10.
为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染对鸡细胞模式识别受体(PRRs)及天然免疫抗病毒基因转录的影响,本实验分别采用IBDV弱毒感染DT40细胞和强毒感染SPF鸡,以荧光定量RT-PCR(q RT-PCR)检测感染细胞和法氏囊组织中PRRs(TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、MDA5和LGP2)及天然免疫抗病毒基因(IPS-1、IRF3、PKR、OAS、Mx)的m RNA转录变化。在IBDV感染DT40细胞的2 h到24 h内,ch MDA5、ch TLR3、ch LGP2、IRF3、PKR、OAS、Mx的转录水平显著上升,分别为324、22、61、29、16、225 000和18 700倍。当采用si RNA分别敲除DT40细胞中ch MDA5、ch TLR3和ch LGP2时,IPS-1、IRF3、PKR、OAS和Mx在IBDV感染后的2 h到24 h差异变化不显著。在IBDV感染SPF鸡法氏囊组织细胞中,ch MDA5和ch TLR3的表达显著降低,而ch LGP2表达无显著差异,IRF3、PKR、OAS和Mx的转录水平显著上升。TLR4和TLR7在IBDV的体外和体内感染试验中均未检测到,而IPS-1在IBDV的体外和体内感染试验中均变化不显著。本实验结果表明,ch MDA5、ch TLR3和ch LGP2在识别IBDV的感染中起着关键作用,IBDV感染严重抑制了PRRS ch MDA5和ch TLR3的转录,并且提示其抑制作用在体内与体外可能存在不同的分子机制。 相似文献