氯霉素全抗原的合成与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

宋砚斋  杨柳  张淑萍  滑静 《北京农学院学报》2009,24(3):24-27

利用重氮化法合成氯霉素全抗原,将氯霉素的对位苯硝基构造成芳香氨基,并氧化使其与牛血清白蛋白偶联,构成氯霉素全抗原。此外,利用紫外光谱、红外光谱与酶联免疫等方法对合成的全抗原进行鉴定。结果表明,氯霉素全抗原合成成功,并免疫原性良好。其偶联比为1∶0.959,蛋白质浓度达2.799 mg/mL。  相似文献   

氯霉素人工抗原的合成与鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

方伟  胡鲲  姜有声  黄宣运  杨先乐 《华中农业大学学报》2009,28(3)

采用重氮化法和碳二亚胺(EDC)法合成了氯霉素人工抗原.经紫外光谱法、电泳鉴定表明偶联成功;采用三硝基苯磺酸法测得载体蛋白ε-NH3+残基利用率分别为31.02%、22.27%,偶联物的结合比为18.9、13.6;制备的抗原分别免疫小白鼠获得多克隆抗体,血清效价可达10-6以上.经比较,碳二亚胺法更适于氯霉素人工抗原的制备.  相似文献   

食品中残留喹乙醇人工抗原的制备与鉴定   总被引：3，自引：0，他引：3  

张景艳  杨志强  李建喜  王学智  孟家仁  张凯  张艳 《安徽农业科学》2009,37(5)

[目的]合成喹乙醇人工抗原。[方法]通过化学合成方法,将喹乙醇与琥珀酸酐反应,合成半抗原喹乙醇半琥珀酸酯(OLA-HS),通过活泼酯化法将半抗原与载体蛋白偶联制备喹乙醇全抗原。[结果]TLC、紫外光谱法的鉴定结果表明,目标半抗原合成成功;紫外光谱法鉴定结果表明,全抗原合成成功。[结论]建立了一种喹乙醇半抗原及全抗原的合成方法,为进一步制备喹乙醇抗体奠定基础。  相似文献   

恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体的制备     

邹晓楠  龚云飞  奚茜  李沐洁  张晓峰  方结红  陈宗伦  王唯芬  张明洲 《安徽农业科学》2012,(27):13415-13417

[目的]制备恩诺沙星人工抗原及多克隆抗体。[方法]采用活性酯法合成恩诺沙星的人工抗原,并通过紫外光谱扫描和SDS-PAGE电泳对其进行鉴定。利用免疫原(ENR-BSA)免疫新西兰大白兔,制备抗恩诺沙星的高亲和力和高特异性的多克隆抗体。[结果]恩诺沙星成功地偶联到载体蛋白上。通过动物免疫,获得了高效价的抗血清,最高效价达到1∶100 000,说明人工抗原成功地诱导机体产生免疫应答。[结论]恩诺沙星的人工抗原合成路线简单易行,可为进一步建立恩诺沙星的免疫检测方法奠定了基础。  相似文献   

二氟沙星抗体的制备     

梁淑珍  孙秀梅  魏东 《安徽农业科学》2012,(13):7742-7743,7754

[目的]制备二氟沙星(DIF)抗体。[方法]采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS)法,将二氟沙星分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原DIF-BSA和检测抗原DIF-OVA,并用DIF-BSA免疫小鼠以获得高效价的抗体。[结果]免疫抗原DIF-BSA的紫外光谱具有药物和蛋白的叠加特性,其最大吸收峰在波长277 nm处,说明载体蛋白BSA与DIF成功偶联,可用于动物免疫。检测抗原DIF-OVA的最大吸收峰在波长276 nm处,说明载体蛋白OVA与DIF成功偶联,可用作检测抗原进行包被。间接ELISA检测结果表明所得小鼠抗血清效价较高,均达1∶32 000以上,说明有特异性抗体产生。[结论]成功制备了抗二氟沙星抗体,也进一步证明了药物偶联成功。  相似文献   

抗阿莫西林多克隆抗体的制备     

魏东  徐彤  赵月平  黄智鸿  李秀娟 《安徽农业科学》2008,36(9):3692-3693

[目的]为研究阿莫西林残留的免疫学检测方法奠定基础。[方法]采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS)法将阿莫西林分别与牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,制备免疫抗原AMX-BSA和检测抗原AMX-OVA,用AMX-BSA免疫成年兔以获得高效价的多克隆抗体。[结果]免疫抗原AMX-BSA紫外光谱具有药物和蛋白的叠加特征,其最大吸收峰在276 nm处,说明载体蛋白BSA与AMX成功偶联,可用于动物免疫。检测抗原AMX-OVA最大吸收峰在275 nm处,说明载体蛋白OVA与AMX成功偶联,可用作检测抗原进行包被。间接ELISA检测结果表明,2只兔抗血清效价较高,均达1∶32 000以上,说明有特异性抗体产生。[结论]该研究成功制备了抗阿莫西林多克隆抗体,也进一步证明药物偶联成功。  相似文献   

有机磷农药三唑磷人工抗原合成及鉴定     

黄魁英  雷红涛  孙远明 《安徽农业科学》2011,39(32):19843-19844

[目的]合成并鉴定有机磷农药三唑磷人工抗原。[方法]采用活泼酯法将三唑磷半抗原（TZPM-Hap）与牛血清蛋白（BSA）和卵血清蛋白（OVA）偶联,制备出免疫抗原（TZPM-A-BSA）和包被抗原（TZPM-A-OVA）,并通过紫外扫描和动物免疫试验对其进行了鉴定。[结果]紫外扫描和动物免疫试验结果表明人工抗原合成成功。[结论]为制备单抗及开发快速、简便的三唑磷ELISA试剂盒奠定了基础。  相似文献   

西维因人工抗原的合成与鉴定     

《山西农业大学学报(自然科学版)》2017,(10)

[目的]制备西维因农药小分子的抗体,为建立免疫分析方法提供保障。[方法]制备6-(1-萘氧基甲酰胺基)己酸及其活化酯,将其与生物大分子偶联得到人工免疫抗原和包被抗原。[结果]通过对CNH及其活化酯的偶联物进行质谱、核磁共振、红外线鉴定,证实合成的产物为目标人工标原。[结论]成功制备了西维因人工抗原,为西维因农药残留免疫分析的方法研究奠定了基础。  相似文献   

溴氰菊酯人工抗原的合成及偶联比的测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

王静  魏朝俊  赵建庄  王文娟  王春娜 《北京农学院学报》2006,21(4):71-74

溴氰菊酯农药分子的人工抗原合成是酶联免疫分析技术的关键,利用重氮化法将合成的溴氰菊酯半抗原(±)α-氰基对氨基苯氧基苄基(1R,3R)-2,2-二甲基-3-(2,2-二溴乙烯基)环丙烷羧酸酯分别偶联到牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)上制得两种人工抗原。合成的两种溴氰菊酯人工抗原用于动物免疫及免疫后抗体的检测,测得它们的偶联比分别为6∶1和7∶1。  相似文献   

甲氧苄氨嘧啶人工抗原的合成及鉴定     

职爱民  刘庆堂  邢广旭  杨继飞  张改平 《河南农业科学》2010,(3)

用重氮化方法将甲氧苄氨嘧啶(TMP)偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成了免疫抗原BSA-TMP和包被抗原OVA-TMP,并用紫外扫描、SDS-PAGE和动物免疫试验进行了鉴定。结果表明,半抗原TMP和载体蛋白偶联成功。人工抗原BSA-TMP的成功合成,为TMP单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了基础。  相似文献   

氟苯尼考胺人工抗原的合成与鉴定     

常超  张怡  伍金娥 《安徽农业科学》2014,(13):4029-4031

[目的]合成并鉴定氟苯尼考胺人工抗原.[方法]采用水解的方法制备了氟苯尼考胺,并通过紫外、红外、质谱鉴定氟苯尼考胺水解成功.采用戊二醛法合成了氟苯尼考人工抗原,并通过紫外光谱进行鉴定.免疫大白兔制备了氟苯尼考胺高特异性抗体.[结果]通过紫外、红外、质谱鉴定氟苯尼考胺水解成功,抗体效价达6.4×104.[结论]氟苯尼考胺人工抗原合成成功,为建立FFA免疫化学方法奠定了技术基础.  相似文献   

兔抗双酚A多克隆抗体的制备     

石春红  姚卫蓉  孙秀兰  纪丽君 《安徽农业科学》2010,38(8):3886-3888

[目的]通过动物免疫制备抗双酚A多克隆抗体。[方法]采用双酚A半抗原（BPAH）和双酚酸（DPA）分别与牛血清蛋白（BSA）偶联制备免疫抗原,免疫新西兰白兔获得抗血清;采用间接竞争ELISA法测定抗血清的效价。[结果]经紫外扫描及红外光谱分析,完全抗原BPAH-BSA及DPA-BSA制备成功;供试3只阳性大白兔的抗血清效价分别为〉51200、25600和12800,完全抗原BPAH-BSA免疫的大白兔抗血清效价高于DPA-BSA免疫的大白兔抗血清效价。[结论]该研究成功制备了高效价抗双酚A多克隆抗体。  相似文献   

抗双酚A多克隆抗体的制备     

匡华  刘丽强  胡拥明  宋珊珊  李伟峰  胥传来 《安徽农业科学》2011,39(34):21353-21354,21356

[目的]制备可以识别双酚A（BPA）的多克隆抗体。[方法]通过双酚酸（DPA）与载体蛋白牛血清白蛋白（BSA）以及卵清白蛋白（OVA）偶联制备免疫抗原DPA-BSA和包被抗原DPA-OVA,以DPA-BSA免疫新西兰大白兔获得抗血清,并采用间接竞争酶联免疫吸附（ELISA）检测方法对抗体进行鉴定。[结果]经紫外光谱分析,DPA-BSA和DPA-OVA制备成功。抗血清效价最高达到1∶256 000,50%抑制率（IC50）达17.2 ng/ml。[结论]该研究为建立双酚A的快速筛选方法奠定了基础。  相似文献   

间接酶联免疫吸附法测定大鲵凝集素     

王晓龙  佟长青  李伟 《安徽农业科学》2016,44(33)

[目的]建立基于大鲵凝集素多克隆抗体酶联免疫定量分析的方法。[方法]以大鲵凝集素为抗原,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体,建立间接非竞争酶联免疫检测方法,并对该方法的精密度及准确度进行了测试。[结果]获得的抗血清效价为1∶16 000,多克隆抗体血清的最佳稀释度为1∶3 000,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗最佳稀释度为1∶30 000,抗原浓度在31.25~1 000.00 ng/m L范围内呈良好的线性关系,相关系数R~20.99,板内及板间变异系数范围分别为2.50%~9.88%和2.69%~11.59%,回收率为91.5%~109.5%。分布结果显示,大鲵凝集素在躯干部肌肉组织中的含量较高。[结论]成功建立了大鲵凝集素间接非竞争酶联免疫检测方法,该方法灵敏度高,重复性好,可用于实际检测大鲵肌肉组织中的凝集素含量。  相似文献   

光引发氯霉素分子印迹聚合膜的原位合成及性能测试     

张贤珍  余盛禄  孙德四 《安徽农业科学》2011,39(12):7253-7254,7290

[目的]寻求检测氯霉素的简单方法。[方法]用紫外光引发,在压电传感器电极上原位合成氯霉素分子印迹聚合膜。分析功能单体的种类、用量对聚合膜的影响,考察传感器对氯霉素的作用。[结果]在氯霉素作模板分子、甲基丙烯酸二乙氨基酯作功能单体、氯霉素与甲基丙烯酸二乙氨基酯用量1∶2时,分子印迹聚合膜的响应最佳。在30～160μg/L时传感器对氯霉素的响应呈线性关系,检测下限为30μg/L。[结论]氯霉素分子印迹聚合膜可以用作压电传感器的识别元件。  相似文献