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农杆菌介导法将热激转录因子8基因转入大豆 总被引：4，自引：0，他引：4
植物转化是开展基因工程育种和鉴定基因功能的重要途径。本研究的目的在于向大豆受体导入热激转录因子8（heat shock factor 8,hsf8)基因,以加强目的基因hsp70的表达和增加转基因大豆的抗逆性,同时探索提高大豆转化率的途径。本文以大豆子叶节为外植体,通过农杆菌介导法将hsf8基因转入栽培大豆品种科新3号中,获得了13株抗卡那霉素的转化植株。PCR检测表明,其中的9株呈阳性反应,证明hsf8基因已整合到大豆基因组中。本实验获得的实际转化率为2．39％。文中讨论了选择适宜的种子灭菌方法和大豆受体品种对提高转化率的有效作用。 相似文献
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农杆菌介导热激转录因子8基因转化大豆 总被引：2，自引：0，他引：2
环境胁迫严重影响作物的生长和发育,热激转录因子(heat shock factor 8,HSF)是一类在热应激反应中起重要作用的蛋白质,主要功能是在热休克基因的表达过程中与相应热激元件结合,启动基因的转录过程,最终促进热休克蛋白(HSP)基因的表达.本文将热激转录因子8(hsf8)基因构建在植物表达载体pCAMBIA3300中,以大豆子叶节作为受体,通过农杆菌介导法将hsf8基因导入品质性状优良的两个高产大豆新品系哈交5337和哈交5489中,最后获得转基因植株.在开展大豆遗传转化过程中,探讨了农杆菌介导大豆子叶节转化体系的影响因素,优化了转化条件.在共培养后,采用延迟筛选的方法来提高选择效率.并确定草胺磷筛选浓度为3.5 mg/L.获得转化质粒pCAMBIA3300-HSF8的转基因植株,其中T1代PCR阳性植株17株.采用Real-time PCR的方法对T1代抗性植株进行hsf8基因的转录水平的相对定量分析,确定9株较非转基因植株哈交5337表达量明显提高.有1株明显低于哈交5489的hsf8基因表达量. 相似文献
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陕油8号是西北农林科技大学农学院经济作物研究所用自育的南方生态型且育性稳定的胞质雄性不育系212A与北方生态型恢复系116C杂交选育的优质双低杂交油菜新品种，2001年6月通过国家审定，是黄淮区第一个国审双低品种。1特征特性1.1产量表现1998年参加国家黄淮区域试验，比对照秦油2号增产5.18%，达极显著水平。1999年续试，较对照秦油2号增产3.52%，达极显著水平，居参试品种（系）第一位。两年平均较对照秦油2号增产4.27%，位居参试品种（系）第一位。2000年国家黄淮区生产试验，平均亩产185.2kg，比对照秦油2号增产5.74%，具有较强的稳产… 相似文献
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植物果实特异性启动子E8基因的克隆 总被引：2，自引：0，他引：2
采用高盐低pH值法、分步离心法、SDS法、CTAB法、改良CTAB法提取毛粉802番茄幼苗基因组DNA,其中改良CTAB法提取的DNA效果最好,以此DNA为模板,用特异性引物进行PCR扩增,得到了预期大小的片段,将目的片段回收,克隆进pMD18-T Simple Vector载体,经PCR及酶切检测具有与目标片段长度相符的插入片段,构建的重组pMD18-E8载体经测序结果分析显示,番茄果实特异性E8启动子序列具有高度保守性,与GenBank上发表的E81.1启动子同源性为99.1%,说明成功获得了果实特异性E8启动子基因,为实现外源基因在转基因桃果实中特异性表达做准备。 相似文献
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灵芝LZ-8在烟草中的表达及产物特性的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
将从灵芝中克隆的LZ-8基因构建成原核表达质粒pET-30a-lz8,在大肠杆菌BL21中表达。SDS-PAGE表明其分子量约为14kD,与推算出的氨基酸分子量相似。经金属镍离子螯合柱纯化后的原核表达产物为单一条带,纯化产物免疫兔子获得了高效价的抗血清。将该基因亚克隆到植物双元表达载体中,用农杆菌介导的方法转化烟草。经ELISA实验定量测定,重组LZ-8达到了烟草可溶性蛋白的0．18％（每克新鲜叶片约含149．82μgLZ-8重组蛋白）。体外活性检测表明,重组蛋白能有效地提高VeroE6细胞中肿瘤坏死因子（TNF-α）基因的mRNA转录水平,具有免疫调节相关功能。 相似文献
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bHLH类转录因子TT8具有调控植物类黄酮合成的功能。本研究采用同源克隆法,在芥菜型油菜紫叶芥中获得了2个TT8拷贝,分别命名为BjA09.TT8和BjB08.TT8,它们分别编码521和517个氨基酸。定量表达分析表明,这2个拷贝在叶中的表达量均显著高于茎和根中,且都响应茉莉酸(JA)信号,在50μmol L–1的茉莉酸甲酯处理0.5 h后表达量均达到峰值;利用毛状根体系过表达发现,BjA09.TT8和BjB08.TT8分别可使紫叶芥和绿叶芥菜型油菜四川黄籽的毛状根中总黄酮含量升高,同时对类黄酮合成基因Bj.CHS的表达具有促进作用,说明二者在功能上具有冗余性。分别在野生型拟南芥和拟南芥tt8突变体中过表达BjA09.TT8和BjB08.TT8发现,过表达拟南芥植株叶片颜色变紫,植株总黄酮和原花色素含量显著升高。本研究表明,BjA09.TT8和BjB08.TT8基因能够促进芥菜型油菜类黄酮的合成,为进一步解析芸薹属植物原花色素合成的调控机制提供了参考。 相似文献
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8份新引优质烤烟品种资源综评 总被引：3，自引：0，他引：3
8个从美国、巴西引进的烤烟新品种,经检疫合格后在大田进行品种比较试验,对照为K326。试验结果表明：除OX414属多叶型的品种,栽后68d现蕾外,其他品种现蕾期、中心花开放期等与对照相近。各品种都没发黑胫病和根结线虫病,赤星病和TMV较轻。公顷产量最高的是OX414,其次是NC72“Primed”,第三是NC71。公顷产值最高的是K326,其次是OX414,NC72“Primed”第三,这些品种间无显著差异。NC100、K326、NC72“Primed”等品种上等烟比例、均价、级指和产指4号较高。综合起来看,OX414产量高,K326、NC100、NC71公顷产值、上等烟、均价、级指等较高。COM烟和RGH61各项经济指标都较低。 相似文献
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高油高产大豆新品种石豆8号的选育 总被引：2，自引：0，他引：2
石豆8号是由石家庄市农林科学研究院以化诱5号为母本,冀豆7号为父本经有性杂交选育而成的大豆新品种.2011-2012年参加河北省夏播大豆区域试验,平均产量3184.2 kg/hm2,较对照冀豆12号增产5.15％;2013年参加河北省夏播大豆生产试验,平均产量2 910.6 kg/hm2,较对照冀豆12号增产5.30％.2014年5月通过河北省农作物品种审定委员会审定,准予推广.石豆8号的主要特点是高油(22.11％)、高产、抗倒伏,适宜在河北省中南部夏播种植. 相似文献
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一株拮抗放线菌NMG8-2的抑菌特性 总被引：4，自引：0，他引：4
为研究拮抗放线菌NMG8-2的抑菌活性,评价其在植物病害防治中的开发应用价值,对该菌株及其发酵液的抑菌活性、发酵液稳定性进行了研究。试验采用平板对峙法、抑制菌丝生长速率法和杯碟法测定拮抗放线菌NMG8-2菌株及其发酵液对18种植物病原真菌和6种细菌的抑制作用。结果表明:NMG8-2菌株及其发酵液对苜蓿茄镰孢根腐病菌、立枯丝核菌等16种植物病原真菌和胡萝卜软腐欧文氏菌、马铃薯环腐棒杆菌、青枯雷尔氏菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌5种细菌具有较强的抑菌作用;发酵液能抑制苜蓿茄镰孢根腐病菌的分生孢子萌发和芽管伸长。不同条件下的稳定性测定结果表明:该菌株发酵液的抑菌作用对碱、紫外线、高温和蛋白酶均比较稳定,但在强酸条件下稳定性较差;连续传接10代,抑菌活性仍然稳定。 相似文献
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水稻豫粳8号蛋白水解酶复性电泳分析 总被引：5，自引：2，他引：3
采用复性电泳（SDS—G—PAGE）技术,分析了豫粳8号、亲本苗期和孕穗期叶片中蛋白水解酶的表达差异,结果表明：①185kD蛋白水解酶是母本遗传给子代的一条重要酶带,它可能与母本遗传给子代的某种性状有关。②74kD蛋白水解酶在苗期和孕穗期pH4．5、pH7．0和pH8．5时亲本间均检到,它是水稻的一种保守蛋白水解酶。③孕穗期蛋白水解酶活性显著高于苗期、酶带种类多于苗期。④子代一些蛋白水解酶条带的活性介于父母本之间．与某些介于亲本之间的性状遗传类似。⑤检出108kD蛋白水解酶是一种中性和酸性酶：123kD蛋白水解酶苗期时仅pH8．5条件下检到．孕穗期在pH7．0和pH8．5时均检到。这一结果说明用复性电泳技术研究水稻蛋白水解酶．可以发现新的具有蛋白水解酶功能的蛋白．为从分子水平揭示亲本间遗传机理提供重要数据． 相似文献