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农杆菌介导的杜仲叶片愈伤组织遗传转化体系 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】优化杜仲叶片愈伤组织的再生体系,研究愈伤组织对抗生素和抑菌剂的敏感性,探索影响农杆菌介导杜仲愈伤组织遗传转化的最适转化因子水平,构建农杆菌介导的杜仲愈伤组织瞬时转化体系,使杜仲成年植株外植体为受体的遗传转化成为可能,为杜仲基因功能的研究与定向改良奠定基础。【方法】以杜仲成年植株叶片为材料诱导愈伤组织,通过添加不同浓度植物生长调节剂与大量元素的MS培养基进行不定芽的诱导与增殖,确定最适培养基。在此基础上,在培养基中添加不同浓度抗生素及抑菌剂,研究愈伤组织对其敏感性。以获得的叶片愈伤组织受体系统为基础,通过L_(16)(4~5)的正交试验,探索不同转化因子对农杆菌介导叶片愈伤组织遗传转化的瞬时转化效率的影响,建立最适瞬时转化体系。使用获得的瞬时转化体系对愈伤组织进行遗传转化操作,筛选抗性芽,对抗性芽进行GUS组织化学染色与PCR检验。【结果】再生体系优化的结果表明,3/4大量元素浓度的MS培养基能够促进杜仲愈伤组织不定芽的诱导及生长;愈伤组织诱导不定芽的最适培养基为3/4MS+0. 27μmol·L~(-1)NAA+4. 4μmol·L~(-1)6-BA,诱导率为83%±10. 0%;不定芽复壮的最适培养基为3/4MS+0. 054μmol·L~(-1)NAA+4. 4μmol·L~(-1)6-BA,平均伸长长度为(2. 47±1. 33) cm。抗生素与抑菌剂敏感性试验表明,遗传转化的选择培养基中,抑菌剂头孢霉素的最适浓度为200 mg·L~(-1),筛选用的抗生素卡那霉素最适浓度为70 mg·L~(-1)。转化因子的正交试验表明,最适的农杆菌介导杜仲叶片愈伤组织遗传转化的转化因子组合为:预培养5天、侵染10 min和共培养3天。使用最适瞬时转化体系对约200个愈伤组织进行遗传转化操作,共筛选获得3个抗卡那霉素的抗性芽; GUS组织化学染色显示GUS基因在抗性芽中得到了表达,PCR检测证明这些抗性芽中存在NPTⅡ基因。【结论】杜仲叶片愈伤组织诱导不定芽的最适培养基为3/4MS+0. 27μmol·L~(-1)NAA+4. 4μmol·L~(-1)6-BA,不定芽复壮的最适培养基为3/4MS+0. 054μmol·L~(-1)NAA+4. 4μmol·L~(-1)6-BA。农杆菌介导的杜仲叶片愈伤组织瞬时转化体系为:预培养5天、侵染10 min和共培养3天,筛选培养基为3/4MS+0. 054μmol·L~(-1)NAA+4. 4μmol·L~(-1)6-BA+200 mg·L~(-1)Cef+70 mg·L~(-1)Km。利用此体系共获得3个抗性芽,PCR分析和GUS组织化学染色都表明T-DNA已整合到抗性芽基因组中。 相似文献
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以黑果枸杞成熟种子为外植体,萌发无菌苗后诱导愈伤组织及不定芽分化获得再生植株,建立黑果枸杞组织培养体系。结果表明,MS培养基适合黑果枸杞种子萌发与生长,诱导种子萌发成无菌苗的培养基为MS+6-BA1. 0 mg/L+GA_3 0. 5 mg/L;无菌苗脱分化形成愈伤组织适宜的培养基为MS+6-BA 1. 0 mg/L+NAA 0. 1 mg/L,诱导率80%,平均丛生芽数25株;诱导愈伤组织分化和生长适宜的培养基为MS+6-BA 0. 4 mg/L+NAA 0. 1 mg/L;适宜的生根培养基为1/2 MS+IBA 0. 3 mg/L+NAA 0. 2 mg/L. 相似文献
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以水稻品种日本晴DNA为模板,用PCR的方法从水稻胚特异性表达基因OsESG上游序列扩增出特异性条带,克隆出种子胚特异性启动子,长度为1.1kb,且已知的功能部位序列没有发生改变。用它构建了带动报告基因GUS表达的双元载体,并用农杆菌介导法转化水稻得到了转基因植株。对GUS基因的表达检测表明,由该启动子序列引导的GUS基因仅在胚中特异性表达,而其它组织中都未表达,证实该启动子具有胚特异性表达的功能。 相似文献
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栓皮栎体胚的增殖、成熟和萌发 总被引：1，自引：0，他引：1
以栓皮栎实生苗叶片为外植体诱导体细胞胚胎发生,调查碳水化合物、渗透剂和植物生长调节剂对体胚增殖、成熟和萌发的影响,建立体胚增殖、成熟和萌发的培养基方案.叶片外植体在附加1.0 mg·L-1NAA和0.5mg·L-1BA的起始培养基上诱导形成前胚性团块.这些胚性团块在增殖培养基上培养6周,在附加1 mg·L-1BA、0.25 mg·L-1NAA和3%蔗糖的MS培养基上增殖效果最好.将单个体胚转接到成熟培养基上进行培养,蔗糖浓度对栓皮栎体胚成熟以及后续的萌发有显著影响.成熟培养基中附加5%的蔗糖,体胚成熟率和萌发率分别达到63.5%和33.8%.虽然在成熟培养基中附加ABA有利于体胚成熟,但对体胚的进一步萌发没有促进作用.为了提高萌发率,成熟体胚在附加植物生长调节剂的萌发培养基上进行培养,以及进行预冷处理.成熟体胚4℃冷处理没有促进胚根和上胚轴的发育萌发.在附加0.5 mg·L-1BA和0.25 mg·L-1 IBA的1/2 MS萌发培养基上,体胚萌发率达到65.9%,再生植株转化率达到9.4%. 相似文献
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通过研究不同基本培养基及植物生长调节组合对沟叶结缕草丛生芽诱导、增殖和愈伤组织诱导、分化的影响,建立起沟叶结缕草试管无性系。以地下匍匐根状茎的顶芽为外植株,在MS 6-BA 2 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1培养基上诱导丛生芽形成,以MS KT 3 mg.L-1 NAA 0.1 mg.L-1作为继代增殖培养基,建立起丛生芽苗→不定芽发生→丛生芽苗速生试管无性系;以丛生芽苗基部为外植体,以MS 2.4-D 4 mg.L-1作为愈伤组织诱导培养基,以MS基本培养基作为愈伤组织分化培养基,建立起丛生苗→愈伤组织→愈伤组织分化→丛生苗试管无性系。试管无性系室外移栽成活率达95%以上。沟叶结缕草试管无性系的建立为细胞工程育种和基因转化的研究奠定了基础。 相似文献
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利用叶片和茎段为外植体,研究了毛泡桐和白花泡桐胚性愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生情况。结果表明,白花泡桐叶片和茎段胚性愈伤组织诱导的最适培养基分别为MS+0.3mg/L NAA+14mg/L BA和MS+0.3mg/L NAA+8mg/L BA,毛泡桐叶片和茎段胚性愈伤组织诱导的最适培养基皆为MS+0.3mg/LNAA+17mg/L BA。从体细胞胚胎发育所需时间来看,2种泡桐叶片的体细胞胚胎发育能力均高于茎段。 相似文献
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圣诞树组织培养快速繁殖技术研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以圣诞树的茎段为外植体,研究其再生植株在不同外源激素配比下的适宜培养基。试验结果表明：圣诞树茎段启动培养基中以MS培养基附加6-BA2.0㎎/L、NAA1.0㎎/L较好,继代培养基以MS培养基附加6-BA1.0㎎/L、NAA0.5㎎/L较为合适。生根培养基为1/2MS＋NAA0.3㎎/L＋IBA0.1㎎/L最佳,生根率高达98﹪ 相似文献
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法官,这个承担国家审判的重要职责、肩负着法律赋予的神圣使命的人,每当他们站在庄严而圣洁的审判台上时,他们便化身为公平和正义的使者,用一颗公正之心、为民之心来给予当事人最公正的审判。在遥远 相似文献
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法官,这个承担国家审判的重要职责、肩负着法律赋予的神圣使命的人,每当他们站在庄严而圣洁的审判台上时,他们便化身为公平和正义的使者,用一颗"公正之心"、"为民之心"来给予当事人最公正的审判.在遥远的壮乡,就有这样一位坚持公正司法、一心为民的大法官--广西自治区高级人民法院院长罗殿龙. 相似文献
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从计算和几何分析两条途径,讨论尺寸链计算中对称度误差的处理方法,为类似计算提供参考意见。 相似文献
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普通带式输送机与大倾角挡边带式输送机的对比 总被引：2，自引：0，他引：2
通过对普通带式输送机和大倾角挡边带式输送机的应用效果,阐述了两种机型运行中的特点,总结出了各机型的性能参数及经济对比,肯定了大倾角挡边带式输送机的可行性。 相似文献
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On May 18, 2006, CWI attended the flooring seminar organized by Shanghai Representative Office of American Hardwood Export Council （AHEC） and had a face to face talk with the famous experts Mark Scheller and Daniel Boone to discuss about SinoUS flooring trade. 相似文献
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机制砂高强度砼配合比设计 总被引：1，自引：0，他引：1
针对云南省高等级公路施工特点,结合昭(通市)———麻(柳湾)线的实际情况,选择高质量的原材料配制C50砼,提高桥梁上部构造的质量,降低成本。 相似文献
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李克恩 《绿色中国(A版)》2004,(16):63-63
铜铃山国家森林公园位于浙江省文成县境内,距温州市区170公里,公园总面积2755公顷,森林覆盖率95.3%,有浙南保存最好的阔叶丛林,占森林总面积45%。森林公园内山峦叠翠,峡谷幽深,溪流潺潺,空气清新,共有景点50多处,由铜铃峡、铜铃寨、小瑶池三大景区组成。铜铃山峡长达3公里,峡谷 相似文献
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大尺寸防火集成材(Moen-Wood(R))已经引起公众的关注,因为它使大幅面木结构在耐火要求高的市区得到应用,并且满足建筑标准法的要求.该材料正用于横滨的一幢名为Southwood的建筑中(该建筑的建设方为横滨城市未来创造有限公司,建筑商为CIA集团,设计者为Yukiharu Takematsu).该建筑的主体部分已经建造完毕,木柱和横梁已经安装.JLJ与Takenaka Corporation公司工程部门的Shinya Igarashi及技术部门的Kotaro Toyama就该公司研发的Moen-Wood(R)产品进行了访谈. 相似文献
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张小云 《绿色中国(综合版)》2011,(12):30-32
＂2010绿色中国年度焦点人物＂评选出年度特别贡献奖,获奖人分别是：中共贵阳市委书记李军,中国工程院院士、著名生物学家、森林培育学家尹伟伦。 相似文献