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【目的】基于香蕉细菌性枯萎病病原(Ralstonia solanacearum)2号生理小种的特异保守引物和LAMP技术建立一种实时荧光定性检测方法,解决常规PCR定性检测特异性低、灵敏度低、耗时长等问题,实现在1 h内能进行准确高效的定性检测,为加强该病害防控检测和检疫工作提供技术支持。【方法】确定被测基因靶序列,利用Primer软件设计两对内外引物。由两对引物、具有链置换特性的DNA聚合酶、模板DNA、甜菜碱、Mg_2SO_4、反应缓冲液、荧光染料等组成LAMP反应体系,采用不必在反应完开管盖检测的实时荧光LAMP方法,针对该方法对于样品DNA定性检测的灵敏度、特异性及可重复性进行试验。【结果】设计的引物能顺利扩增目标基因,实时荧光LAMP检测体系对于香蕉细菌性枯萎病病原生理2号小种有良好的灵敏度、特异性,该方法可重复性强,灵敏度比普通PCR高10倍以上。【结论】香蕉细菌性枯萎病菌荧光LAMP检测体系检测特异性强、灵敏度高、耗时短、不易污染,效果较好。 相似文献
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季铵盐类消毒剂的质量检测 总被引：1，自引：0，他引：1
李晓旭 《山西农业大学学报(自然科学版)》2007,27(1):99-102
对季铵盐类消毒剂进行定性定量检测以获取其质量信息。定性检测采取紫外分光光度法,定量检测采取两相滴定法。结果表明:除原料外的其他六种产品,中五种季铵盐含量达标。可见市场上流通的季铵盐类消毒剂存在不合格产品。 相似文献
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以滨州市县乡两级农业推广体系为研究对象,采用实地调研、问卷调查、资料查阅、定性与定量相结合的研究方法,对滨州市现行农业推广体系的不同层面进行了研究,得出如下结论:滨州市县乡两级农业推广体系在体制和机制等诸多方面与市场经济不适应,进而提出了改革与创新的具体措施,以期为滨州市乃至全国建立与市场经济相适应的县、乡农业推广体系提供参考. 相似文献
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为评估两种常用口蹄疫O型抗体检测试剂盒的性能差异,本实验室对2020年春季随机抽检的三家规模养殖场提供的60份猪血清分别用液相阻断ELISA和固相阻断ELISA两种试剂盒进行了检测,并比较了两种试剂盒检测结果的阳性检出率和符合率。结果表明,两种方法检测结果总符合率为91.67%,符合率高。在基层畜牧兽医部门日常定性检测中,推荐使用固相阻断ELISA检测试剂盒。 相似文献
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为建立CpTI基因定性PCR检测方法,通过数据库查询和测序获得CpTI基因序列,设计特异性定性PCR引物,对引物、PCR反应条件和反应体系进行优化,并对检测方法的特异性、灵敏度等进行分析试验。结果表明,CpTI基因特异性定性PCR检测方法选择退火温度为58℃,引物浓度为0.4μmol/L较好,该方法能够特异性检测样品中CpTI基因,检测灵敏度达0.05%(质量比)。该方法符合农业转基因生物产品成分检测标准对特异性、灵敏度、重复性的要求,可为抗虫转CpTI基因植物生物安全管理提供技术支撑。 相似文献
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《仲恺农业工程学院学报》2017,(3)
采用胶体金免疫层析试纸条法与高效液相色谱-飞行时间串联质谱法(High performance liquid chromatography-quadrupole time of flight-mass spectrometry,HPLC-QTOF-MS)检测保健品中的那非类药物,并对这两种方法进行了比较.结果表明:胶体金免疫层析试纸条法对豪莫西地那非的检测限为30μg/mL,对硫代艾地那非、红地那非、那红地那非及伪伐地那非的检测限均为60μg/mL;HPLC-QTOF-MS法对豪莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伪伐地那非的检测限为0.2μg/mL.两种方法对实际样品的定性检测结果一致.与HPLC-QTOF-MS相比,胶体金免疫层析试纸条具有操作简便、快速、直接的特点,可作为样品的快速定性筛查,HPLC-QTOF-MS法可作为阳性样品的进一步确证和精确定量. 相似文献
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转基因玉米种子的PCR检测 总被引：2，自引：2，他引：0
以PCR技术为基础,建立了检测玉米种子中转基因成分的方法。对提取的基因组DNA进行PCR以扩增玉米内源基因zSSIIb,设计了常见的CaMV 35 S启动子、NOS终止子、Bar终止子、Bt,进行了初步的定性筛选,并用Bt176对阳性结果进行验证,结果表明:这是一套转基因玉米定性PCR检测方法,具有较高的准确性、可靠性,可以用于转基因玉米种子及其产品的筛查、抽检。 相似文献
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抗虫棉抗虫性表达检测方法及其在育种中的应用 总被引：1，自引：1，他引：1
转基因抗虫棉抗虫性检测是抗虫品种选育和指导抗虫棉生产上合理补充施用农药的必要手段。本文分别从定性检测和定量检测、快速检测和常规检测角度研究与总结了现阶段转基因抗虫棉抗虫性表达的检测方法及其特点。定性检测法主要包括PCR检测法、Southern和Northern杂交法、生物学检测法以及形态检测法、卡那霉素检测法和GUS基因表达检测法;定量检测法主要包括蛋白质印迹法(W estern B lot)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)。对抗虫棉品种选育及生产上安全补充施用农药具有指导意义。 相似文献
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通过对2年来蔬菜有机磷农药残留定性检测数据的整理分析和安全监管工作开展情况的总结,探讨如何从加强蔬菜病虫害监测预报,指导农民适时对症防治、加强蔬菜病虫害综合防治技术培训普及、加强蔬菜生产投入品监管、开展放心菜检测示范基地建设、推进蔬菜生产开展无公害、绿色、有机农产品认证、建设定性、定量检测相结合的蔬菜检测体系、加强蔬菜从农田到餐桌全程监控等方面入手,降低蔬菜农药残留的预防措施。 相似文献
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施善清 《四川农业大学学报》1989,(2)
<正> 猪瘟间接血凝抗原试剂简称“猪瘟血凝抗原,”由醛化血球吸附纯化抗原制成,可用于检测猪瘟抗体与抗原。抗原定性或定量均用血凝抑制试验。抗体定性,以两滴试剂能将检料分为性质不同的三个等级:保护性阳性、无保护阳性和阴性。抗体定量用常规倍比稀释梯度凝集法,可查猪、兔血清效价, 相似文献