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《分子植物育种》2021,19(14):4726-4737
目前枸橼C-05 (Citrus medica L.)是已鉴定的抗溃疡病唯一柑橘属种质,但由于枸橼种质存在多样性,枸橼种质间对柑橘溃疡病的抗病性可能存在差异,且其抗病性与枸橼种质间的亲缘关系是否相关尚不清楚。通过分析枸橼C-05与其他枸橼种质的亲缘关系,期待对进一步解析枸橼C-05对柑橘溃疡病的抗性机理提供参考。本研究利用筛选的14对SRAP引物、16对SSR引物和1对cpSSR引物trnH-trnK,对14份枸橼种质和4份柑橘属非枸橼参照种质(沙田柚,冰糖橙,酸橙和椪柑)进行遗传多样性分析。结果表明:(1)枸橼与非枸橼种质遗传相似度很低,可以聚在不同的两大类;枸橼种质可以聚在7个亚类,除木里香橼和印度大果外的12个枸橼种质遗传相似度高,相互之间的相似系数均在0.8以上;与枸橼C-05亲缘关系最近的是美国枸橼,二者遗传相似系数为0.97;与枸橼C-05亲缘关系最远的枸橼种质是木里香橼,二者遗传相似系数为0.76。(2)在SRAP和SSR标记中筛选出65个种质特异性标记,除爪哇柠檬外,所有枸橼种质有1～8个特异性标记,可以把它们全部鉴别出来;爪哇柠檬没有特异标记,但其与丹娜香橼有1个二者共有的特异标记,结合丹娜香橼的特异标记,也可以把爪哇柠檬鉴别出来。(3)结合三种分子标记可以初步确定,木里香橼可能为杂种起源,父本为枸橼,母本为与柠檬(C. limon (L.) Burm. f)血缘相近的酸橙(C. aurantium L.);印度大果也可能为杂种起源,父本为枸橼,母本为大翼橙亚属小花橙(C. micrantha Wester)或近缘种的杂种起源。综上所述,通过分子标记,14份枸橼种质亲缘关系基本明晰,为探明不同枸橼种质与枸橼C-05亲缘关系提供了理论基础。 相似文献
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枸橼C-05是抗溃疡病的柑橘种质资源,柠檬是枸橼的后代,其自交后代可能继承枸橼的抗性基因。为分析柠檬自交群体对柑橘溃疡病的抗感性规律,本研究建立了433株的‘尤力克’柠檬自交后代群体,并利用SSR分子标记对合子胚实生苗进行了鉴定,观察合子胚实生苗和珠心胚实生苗叶片形态学的差异,对所有自交后代离体注射接种柑橘溃疡病菌,初步评价了实生后代对柑橘溃疡病的抗病性差异。结果表明‘尤力克’柠檬存在多胚性,从300对SSR引物中筛选到8对可用于‘尤力克’柠檬合子胚鉴定的引物,共鉴定出合子胚实生苗57株,确定珠心胚实生苗4株。叶形指数、叶尖指数、翼叶长、翼叶宽和叶柄长均不能作为区分‘尤力克’柠檬合子胚实生苗与珠心胚实生苗的形态学标记,但合子胚实生苗的翼叶长度变异幅度大于珠心胚。57株合子胚实生苗离体接种柑橘溃疡病菌后,5株表现为抗病,52株表现为感病;4株珠心胚实生苗均表现为感病;在372株未鉴定清楚的自交后代中,8株表现为抗病,364株表现为感病。本研究表明利用SSR分子标记还不能完全鉴定出‘尤力克’柠檬合子胚植株,可能需要更多的引物或更灵敏的分子标记才能把全部实生后代鉴定出来。利用合子胚自交后代接种鉴定,更有利于分析‘尤力克’柠檬对柑橘溃疡病的抗感性遗传规律,挖掘抗性基因,为柠檬的抗病育种提供种质资源。 相似文献
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以枸橼C-05叶片为材料,对枸橼C-05中HSP23.3基因的ORF进行了克隆,并对其生物学信息进行了分析。结果显示：HSP23.3基因在枸橼C-05中的ORF为615 bp,编码204个氨基酸。枸橼C-05的HSP23.3蛋白属于跨膜亲水不稳定蛋白,预测定位于细胞质,二级结构由α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲构成,其中,α-螺旋和无规则卷曲是其最主要的二级结构元件,且三级结构和二级结构预测结果高度相似。不同物种同源序列进化分析结果显示枸橼C-05的HSP23.3与漾濞槭的TXG74 151.1亲缘关系最近。含枸橼C-05种质HSP23.3基因的转基因拟南芥T2代株系接种丁香假单胞菌结果显示转基因拟南芥与野生型相比症状较轻且能抑制丁香假单胞菌的繁殖。本研究初步认为HSP23.3基因可能参与枸橼C-05抗溃疡病反应过程。 相似文献
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为解析柑橘R2R3-MYB转录因子家族成员CitMYB20基因的分子生物学特征及受柑橘黄龙病病菌和溃疡病病菌的诱导表达情况。本研究同源克隆了不同柑橘品种中CitMYB20基因的开放阅读框序列,利用生物信息学方法预测其生物学功能并分析比较该基因在不同品种间的序列差异。在洋葱表皮细胞中瞬时表达观察CitMYB20的亚细胞定位。利用qRT-PCR技术分析黄龙病病菌胁迫和溃疡病病菌胁迫时CitMYB20的表达量变化。研究结果显示柑橘CitMYB20基因在晚锦橙、酸柚、纽荷尔脐橙和四季橘中的相似度达到99.01%,高度保守。晚锦橙中该基因含有3个外显子和2个内含子,其开放阅读框为804 bp,编码267个氨基酸残基。CitMYB20蛋白的N端高度保守,具有两个R结构域,属于典型的R2R3类型的MYB转录因子家族的成员。洋葱表皮细胞亚细胞定位分析结果表明该基因定位于细胞核中。CitMYB20基因受黄龙病病菌胁迫时,在黄龙病敏感品种晚锦橙和耐性品种酸柚中均显著上调表达,其中在耐病品种酸柚中上调表达24倍,在感病品种晚锦橙中上调表达34倍;而在溃疡病病菌胁迫时,CitMYB20基因仅在溃疡病抗性品种四季橘中显著差异表达,感病后上调表达3倍。推测该基因对黄龙病和溃疡病的应答差异可能是因为不同的调控机制造成的,构建CitMYB20基因过表达载体拟对不同病原的应答情况进行深入研究。 相似文献
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<正>喜好高温、高湿环境的柑橘溃疡病,近年来随着沃柑等感病品种的北上,发病面积也随之扩展。但由于多数橘农的粗犷管理和防治技术不到位等原因,溃疡病近年来已发展成了仅次于黄龙病的第二大柑橘病害,日益制约柑橘产业的快速发展。浙江龙湾化工有限公司(下称龙湾化工)4月27在五十多位经销合作伙伴见证下,成功首发上市的噻菌铜新品嘉~?,不仅成为了防控溃疡病的新星,同时也成为了种植者心中应对多种细菌性病害时"杀菌治病和增产创收"的新利器。 相似文献
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《分子植物育种》2015,(7)
本研究采用常规PCR技术在黄瓜抗白粉病品种JIN5-508中克隆得到几丁质酶基因,并利用荧光定量PCR分析该基因在接种白粉菌后的表达变化。研究结果显示:接菌后几丁质酶基因表达量明显上升,在24 h达到最高值,是其对照的7倍;接菌24 h后,几丁质酶基因表达量迅速下降,最终与对照趋于一致。从具有不同抗白粉病特性的品种中克隆得到几丁质酶基因并进行同源性比对,获得4个多态性位点,对品种间几丁质酶基因开放阅读框(ORF)所编码的氨基酸序列进行了比对,发现了2个氨基酸差异位点,其中抗感白粉病品种在第557个碱基位点即第184个氨基酸位点上存在差异。进一步以抗病品种JIN5-508与感病品种D8杂交得到的F2代为材料,从苗期(2~3片真叶)人工接种白粉菌,1周后根据幼苗发病情况鉴定出F2代中表现为抗病的植株和感病的植株,并以此为材料克隆几丁质酶基因,成功克隆得到F2抗与F2感的几丁质酶基因,发现F2抗性植株中克隆到的几丁质酶基因差异氨基酸位点处的氨基酸与抗病品种一致,而从F2感病株中克隆得到的几丁质酶基因差异氨基酸位点处的氨基酸与感病品种一致。研究结果表明,几丁质酶基因与黄瓜的白粉病抗性密切相关,可利用此差异位点进一步发展与黄瓜白粉病相关的功能性分子标记。 相似文献
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大豆候选草酸氧化酶基因片段克隆与表达分析 总被引：1，自引：1，他引：0
为克隆大豆草酸氧化酶基因并初步鉴定其功能,根据双子叶植物的草酸氧化酶基因,设计简并引物,同源克隆大豆该基因片段,实时定量PCR分析基因表达情况。序列分析发现,基因片段大小504 bp,无内含子,编码168个氨基酸;Blastx同源比对发现,与大豆的germin基因和苜蓿、花生的草酸氧化酶基因高度同源;草酸诱导大豆耐病和感病种质叶片基因表达分析表明,基因的表达与草酸诱导有关,而且在耐菌核病种质与感菌核病种质间,表达量和表达时间差异明显。推断该基因片段可能是一具有草酸氧化酶活性的大豆germin基因片段。 相似文献
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元江普通野生稻(YP)是一份被称为植物活化石的种质材料，同时其也拥有大量的抗性(R)基因。为了鉴定元江普通野生稻中含有目前已知白叶枯病抗性基因的情况。以元江普通野生稻(YP)、渗入系后代(L214和G252)及其渗入系的感病亲本栽培稻合系35(HX35)作为供试材料，通过接菌鉴定、功能标记检测、同源克隆和实时荧光定量(qRT-PCR)技术来评价这些材料对白叶枯病的抗性。接菌鉴定结果显示，YP、L214、G252对供试的白叶枯病菌C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C9和PXO99A均表现出抗性且病斑长度均小于2 cm;而HX35对供试的9个菌株均表现出感病且病斑长度远超6 cm。白叶枯病抗性基因检测结果显示，YP中含有Xa10的同源基因，HX35、L214、G252中含有xa23的感病同源基因。序列比对结果显示，抗病基因Xa10与YP中的Xa10启动子的效应因子结合元件(EBEAvrXa10)区域序列差异较大。同样地，隐性感病基因xa23与HX35、L214和G252中的xa23启动子的效应因子结合元件(EBEAvrXa23<... 相似文献
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国槐DNA导入花生栽培品种选育抗叶斑病新种质的鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
为了培育抗花生叶斑病的新种质,利用花粉管通道技术将国槐DNA导入花生栽培品种79266,在变异后代筛选抗叶斑病材料,对选出的5个种质系进行叶斑病抗性和农艺性状的田间鉴定,并进行抗病种质系与受体DNA差异的SSR多态性分析。获得的主要结果如下:受体品种79266感染叶斑病(包含花生褐斑病、黑斑病和网斑病)病程曲线的线下面积(AUDPC值)为205.3,5个抗病种质系的AUDPC值极显著低于受体品种,其中05D1128的AUDPC值最小,为112.0,感病最轻;收获前7 d调查花生褐斑病和网斑病的发病程度,05D1148对花生褐斑病的抗性最强,其病级和病情指数均极显著低于受体品种,抗性比受体品种提高17.56%。05D1128对网斑病的抗性最强,其病级和病情指数均极显著低于受体品种,抗性比受体品种提高31.83%;叶斑病抗性最强的05D1128与受体品种相比,百果重和百仁重明显提高,但荚果产量和籽仁产量极显著降低。褐斑病抗性最强的05D1148与受体品种相比,二者所考察农艺性状间无显著差异;采用40对SSR引物进行PCR扩增,在05D106、05D1128、05D1144、05D1148、05D1172 5个新种质系与受体间检测到的多态性位点数分别是9,8,5,6和7。因此,利用国槐DNA导入花生栽培品种提高其对叶斑病的抗性的育种方法是有效的,所选育种质系中05D1148对叶斑病的抗性和农艺性状的综合表现最好,可以作为新的花生抗叶斑病种质材料加以利用。 相似文献
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麻阳冰糖橙果园营养状况与果实品质状况分析 总被引：4，自引：0，他引：4
为探讨冰糖橙园土壤养分对其树体营养及果实品质的影响,以湖南省麻阳县冰糖橙产区为研究对象,2011—2015年对该县9个代表性果园持续进行了土壤、叶片和果实矿质营养分析、果实品质的分析。结果表明:麻阳冰糖橙产区土壤pH接近适宜值,土壤中有机质、多数大量和微量矿质养分含量适宜或过量,而有效锌含量缺乏。麻阳冰糖橙产区树体氮、锰、铜、硼、钼含量适宜,磷、铁含量过量,而钾、锌、钙、镁含量缺乏,不同果园间树体养分差异较大;果实中氮和钾含量较高,且与土壤中、叶片中氮钾含量相对一致。麻阳冰糖橙果实大小差异明显,果实直径与果皮厚度呈明显的正相关,而与果实可溶性固性物和维生素C含量呈明显的负相关。土壤与叶片中磷含量呈极显著负相关,锰、钙呈极显著正相关;叶片与果实中钾含量呈极显著正相关。 相似文献
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陕南柑橘在近年来持续受到周期性大面积冻害,本研究对不同柑橘砧木幼苗抗冻性进行比较,为陕南地区抗冻柑橘砧木品种的选择提供理论参考。以‘枳壳’、‘大叶香橙’、‘香橼’3种柑橘砧木幼苗为试材,研究-7℃冷冻胁迫对柑橘砧木幼苗形态和相关生理指标的影响,并采用隶属函数法比较3种柑橘砧木的抗冻能力。结果显示:-7℃冷冻处理36 h后,3种柑橘砧木幼苗均出现不同程度的失水萎焉,与对照组相比,植株鲜重和干重、叶片鲜重和干重均显著降低。叶片的相对电导率显著升高,丙二醛和超氧阴离子含量均呈不同程度的升高,其中‘大叶香橙’增加最高,分别为1.28倍和1.59倍。另外,与对照组相比,渗透调节物质脯氨酸和可溶性糖含量均呈升高趋势,但脯氨酸含量均无显著性差异,‘枳壳’和‘香橼’叶片中可溶性糖含量均明显升高。隶属函数综合分析结果显示‘枳壳’抗冻能力最强,‘香橼’次之,‘大叶香橙’最弱。-7℃冷冻胁迫对柑橘砧木幼苗形态和生理指标均有明显的影响,根据综合分析结果,柑橘砧木‘枳壳’和‘香橼’品种可在陕南地区实践栽培中大力推广。 相似文献
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对青橘味(A)、甜橙味(B)、西柚味(C)、柠檬味(D)4种柑橘类酸奶的整体喜好度、感官特性进行评价。其中整体喜好度采用非参数Friedman检验和多重比较中的最小显著差数法(LSD),感官特性选择10个描述风味酸奶的感官描述词进行定量描述分析法(QDA)评价,同时采用偏相关性分析整体喜好度与感官特性关系。结果显示4种产品的整体喜好度评分排序为:C>B>A>D,即评价员最喜欢的是西柚味酸奶,其次是甜橙味酸奶、青橘味酸奶,最不喜欢的是柠檬味酸奶。在5%显著性水平上,C样品明显比A、D样品更受喜欢,B样品明显比D样品更受喜欢。将4种样品分为4组,通过QDA法分析,4种风味酸奶的感官特性各有特色。整体喜好度及感官特性的相关性结果显示,评价员喜欢总香气、奶香气、发酵味、果香气稍强,甜味稍强,稠厚,无苦味的产品,对带有涩感和有颗粒感的样品的喜好度不一致,对香气太强或太弱、稠厚度太强、酸味太弱的产品的喜好度有所下降。 相似文献
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Comparison of nuclear DNA content of citrus rootstock populations by flow cytometry analysis 总被引：2，自引：0，他引：2
Citrus species are widely grown in the world. Plant characteristics of the rootstock populations used for orange, lemon, mandarin and grapefruit cultivars should be known as well as those of the cultivars that help true‐to‐type nursery plant production. In this study, cell nuclei were isolated from leaf tissues of seedlings of trifoliate orange, sour orange, rough lemon,‘Volkamer’ lemon,‘Cleopatra’ mandarin,‘Hyokan’, ‘Sanbokan’, ‘Kinkoje’, ‘Carrizo’ citrange and ‘Swingle’ citrumelo, and then fluorescence intensities were measured on propidium iodide‐stained nuclei by flow cytometry. Nuclei isolated from the triploid ‘Tahiti’ lime with a known nuclear genome size were used as the internal standard to estimate the nuclear DNA content of Citrus seedling populations in absolute units. Results obtained from cytograms and histograms indicated that all seedlings analyzed were diploid. In addition, differences between the species for nuclear DNA content were also found to be significant. ‘Hyokan’ seedlings had the biggest genome size, 0.984 pg/2C, whereas trifoliate orange seedlings had the smallest genome size, 0.678 pg/2C. Flow cytometry analysis could be used for obtaining accurate and rapid results for cytological observations of seedling populations of Citrus. 相似文献
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为利用发酵冰糖脐橙皮渣生产菌体蛋白,采用统计学方法对固态发酵冰糖脐橙皮渣培养基配方进行优化。通过单因素试验,确定固态发酵培养基最优辅料、氮源、无机盐组合为麸皮、硫酸铵、ZnSO4和CaCl2。通过最陡爬坡试验,确定响应面试验的中心点为麸皮15%、硫酸铵3%、无机盐组合0.25%。通过Box-Behnken试验最终确定培养基最优配方为麸皮15%、硫酸铵3.3%、无机盐组合0.27%,在此基础上得到发酵终产物真蛋白含量为19.97%,与预测值相近,与培养基配方优化前相比提高35.20%。 相似文献
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本文是在先期研究工作的基础上,利用从柑桔与枳属间杂种的基因组DNA所获得的类受体激酶(RLK)的候选抗病基因序列,重新设计引物,对柑桔抗溃疡病材料和感病材料开展以PCR扩增为基础的对比分析,其中一对引物‘19h16/DdeI'的扩增产物经限制性内切酶DdeI酶切,揭示了抗性材料(Ichang Papeda,Meiwa kumquat,Maruhi kumquat and Nagami kumquat)和感病材料(Flying Dragon,Valencia orange and Palestine sweetlime)之间的多态性差异,同时,在C.Ichangensis的自交F1代和Palestine sweetlime× Ichang Papeda的杂交F1代群体中也见明显的多态性差异;对这些F1代个体进行溃疡病病原[Xanthomonas axonopodis pv.Citri(Xac)]接种作抗病性表型鉴定,结果表明,该分子标记‘19h16/DdeI'与柑桔溃疡病抗性密切相关;经纯化测序的结果进一步证明,抗性材料PCR扩增产物具有完全一致的序列和DdeI酶切位点,但感病材料缺少这一DdeI酶切位点;染色体步行(primerwalking)在BAC文库的对应单克隆中获得了一个完整的抗病基因序列,与以前获得的2个抗病基因序列‘17o6RLKP'和‘26m19RLKP'相比,‘19h16RLKP'也具有Xa21抗病基因蛋白的所有特征,包括含有一个信号肽、同样数目的亮氨酸重复序列、跨膜域和激酶域等.基于该序列的开放读码框,发展了特异性更强可靠性更高的另一分子标记,在今后的研究工作中具有较大的应用潜力. 相似文献
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不同加工过程对糖水橘子罐头橘瓣硬度的影响研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以糖水橘子罐头的橘瓣为研究对象,研究了加工过程中的工艺条件对糖水橘子罐头中橘瓣硬度的影响。采用质构仪对不同工艺条件下的糖水橘子罐头的橘瓣进行测定。结果表明,酸碱处理、杀菌条件、灌汤条件和冷却温度对糖水橘子罐头中橘瓣的硬度有影响。 相似文献
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为研究张家界地区不同砧木类型对红肉蜜柚树体和果实品质的影响,以2 种砧木和4 种中间砧类型的红肉蜜柚为试材,对植株生长势、果实内在和外在品质进行测定和比较。结果表明,不同砧穗组合红肉蜜柚植株生长势表现出较大差异,其中酸柚砧和菊花芯柚中间砧组合株高最高,温州蜜柑中间砧组合株高最低;酸柚砧亲和性较好,枳砧亲和性较差,存在明显“大脚”现象;椪柑中间砧的接穗粗度明显大于中间砧,其他组合均略小。不同砧穗组合对红肉蜜柚果实品质有明显影响。外在品质方面,酸柚砧和椪柑、菊花芯柚中间砧组合果实体积明显大,单果重也明显高;果实中心柱大小与果实大小有较高相关性;砧穗组合类型对果形指数影响不大。内在品质方面,椪柑中间砧组合果实可溶性固形物含量明显
低,而酸柚砧和菊花芯柚中间砧组合果实可滴定酸含量明显高于其他组合。以酸柚为砧木,树势旺盛、果实体积大、单果重更高,虽然可滴定酸稍高,但是可溶性固形物含量也不低,同时不存在与接穗品种不亲和的现象,所以酸柚的综合表现比较均衡,是目前比较适合用作红肉蜜柚砧木的类型。本研究为张家界地区发展红肉蜜柚产业,提高产量、改善品质提供了参考。 相似文献
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植物生长调节剂对3个柑橘品种形态建成的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
摘 要：本研究以墨西哥来檬、甜橙和香橼为材料,采用茎段培养方法,研究了植物生长调节剂不同配比对3个柑橘品种腋芽萌发、增殖和生根的影响,结果表明,以MT为基本培养基,3个柑橘品种在附加BAP 2.0 mg/L和IBA 0.1 mg/L的培养基中腋芽萌发效果最好,离体植株在附加BAP 1.0 mg/L和IBA 0.2 mg/L的培养基中增殖系数最大。此外,以1/2MT为基本培养基,附加NAA 2.0 mg/L 和IBA 0.25 mg/L时,适宜于墨西哥来檬和甜橙的生根,而单独使用NAA 3.0 mg/L则易于香橼的生根。离体小植株的移栽成活率均在90%以上。 相似文献