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相似文献
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1.
EGF对牛卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响   总被引:5,自引:0,他引:5  
在卵母细胞体外成熟液(含FSH)中分别添加10,30,50ng/ml表皮生长因子(EGF),24h检查成熟率,并进行孤雌激活。结果表明:添加10ng/ml、30ng/ml EGF组牛卵母细胞成熟率较对照组(未添加EGF)无显著差异(79.8% vs 71.5% vs 70.4%,p>0.05),但EGF添加至50ng/ml时牛卵母细胞第一极体排出率显著提高,达85.4%(P<0.01);在实验1的基础上,比较培养液中添加10ng/ml、30ng/ml 、50ng/ml EGF对牛孤雌激活胚胎体外发育的影响,结果发现在培养液中添加EGF并不能显著提高牛卵母细胞体外孤雌发育囊胚率(P>0.05),但可显著提高其囊胚孵化率(P<0.01)。  相似文献   

2.
针对奶牛胚胎体外生产环节,对体外受精和培养等技术进行了研究,旨在建立奶牛性控胚胎体外生产技术体系。结果表明,卵母细胞外周卵丘细胞至少保持3层以上,在成熟基础液中添加10 ng/ml的EGF,利于核质成熟;在精子获能液中添加咖啡因降低精子的存活时间;牛胚胎前3 d用CR1aa+BSA培养,再用SOFaa+5%FBS培养,获得高的囊胚发育率,并且添加50 ng/ml IGF-I后胚胎的发育得到了很大的改善。利用性控精液进行体外受精,受精率有轻微下降,但对生产的胚胎发育质量无明显(P>0.05)影响,胚胎移植后受胎率为40%左右。  相似文献   

3.
取泌香期成年麝鼠香囊腺或对非泌香期麝鼠进行人工诱导香腺发育后取材,在形态学观察的基础上,分离香囊腺上皮细胞并进行体外初步培养。结果显示,用1mg/ml Ⅳ型胶原酶和0.25mg/ml胰蛋白酶分次于37℃下消化组织块5h和15min,可得到大量的分散单细胞用于原代培养;用含10%胎牛血清和双抗的DME/F12培养液为基础液,在培养液中添加10ng/ml表皮生长因子(EGF),对麝鼠香囊腺上皮细胞的存活和生长具有较明显的促进作用;腺上皮细胞可进行传代培养,也可用常规方法进行冷冻保存和复苏;体外传代培养到第5代的上皮细胞仍增殖旺盛,细胞内有丰富的脂滴,细胞分泌活动旺盛。提示,通过体外分离培养麝鼠香囊腺上皮细胞,建立香囊腺干(前体)细胞系,进而用细胞工程方法大量生产人工麝鼠香是可能的。  相似文献   

4.
摘 要:通过研究添加不同的肝素浓度(0、5、10、20、50μg/ml)及不同作用时间(0、30、45、60、90、120min)对绵羊精子体外获能、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添加10μg/ml肝素作用45min时,其获能率最高,顶体反应率最低(40.92%和16.59%)(P<0.05),存活时间18h,能够提高受精卵的囊胚发育;单独使用咖啡因或与10μg/ml肝素联合使用,其获能效果均不如单独使用10μg/ml肝素。说明绵羊精子获能时肝素的适宜浓度是10μg/ml,作用时间是45min,咖啡因无协同肝素促进获能的作用。  相似文献   

5.
研究不同浓度的表皮生长因子对牛输卵管上皮细胞生长、增殖和凋亡的影响,目的是建立高质量的牛体外胚胎共培养细胞系。牛输卵管上皮细胞体外培养技术结合血球计数法检测细胞增殖,并利用流式细胞仪进行细胞周期和凋亡的检测,通过Lysis软件对数据进行分析。结果表明,EGF在0~50 ng/mL浓度范围内,其促增殖、抑制凋亡作用随浓度的增加而增大,呈剂量依赖性;当浓度持续增高时,其促增殖、抑制凋亡能力降低;此外,S期细胞数量明显增加,G2-M期细胞数量有下降趋势。表皮生长因子在一定浓度范围内具有促进牛输卵管上皮细胞增殖和抑制其凋亡的作用,并使其细胞周期发生变化。  相似文献   

6.
Caffeoyl Glycoside对小鼠免疫细胞功能的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
本实验室从胡黄连根茎分离到1,6-di-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside单体Caffeoyl Glycoside(CG),体外试验测定其对小鼠免疫细胞功能的影响。通过MTT法检测CG对Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖,NK细胞对K562细胞杀伤活性的影响,以及小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)能量代谢水平;CG对PMΦ吞噬中性红能力的影响。CG在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原(Con A或LPS)作用均能够显著增强小鼠脾淋巴细胞、PMΦ的增殖能力(P〈0.05或P〈0.01),CG单独作用就能显著提高NK对K562细胞的杀伤活性(P〈0.05或P〈0.01)。CG在体外对小鼠主要免疫细胞的增值和功能方面具有显著的促进作用(P〈0.05或P〈0.01)。研究结果显示CG具有特异性与非特异性的免疫增强作用。  相似文献   

7.
家兔子宫内膜细胞炎症模型的建立   总被引:3,自引:0,他引:3  
摘要:胶原酶消化法分离和培养家兔子宫内膜细胞,大肠杆菌细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞的形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准。以不同浓度的LPS作用于细胞,收集不同时段培养上清液,ELISA法测定TNF-α、IL-1β的含量。结果表明,100ng/mL LPS是体外培养的子宫内膜细胞诱导炎症的最适浓度。炎症模型组培养上清液中TNF-α、IL-1β的含量比同期空白组高(P<0.01),表明炎症模型建立成功。  相似文献   

8.
外源性孕酮对牛卵母细胞体外核成熟的影响   总被引:1,自引:1,他引:0  
了研究外源性孕酮对牛卵母细胞体外核成熟的作用,通过向成熟培养液中添加10 μg/mL FSH +10 μg/mL LH(对照组)和0 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL、1000 ng/mL的外源性孕酮,对牛卵丘卵母细胞复合体进行体外成熟培养,在培养8 h后用醋酸地衣红染色观察各自的生发泡破裂率,然后在成熟22 h统计第一极体率,体外受精后7~8天统计囊胚率。结果表明,对照组卵母细胞的生发泡破裂率(75.0%)和极体率(79.6%)均明显高于添加不同浓度孕酮的各处理组(P<0.05),而囊胚率各组之间均无显著差异(P>0.05)。因此,外源性孕酮不能促进牛卵母细胞的核成熟,单独添加外源性孕酮不能起到与内源性孕酮相同的作用。  相似文献   

9.
为了研究大豆异黄酮对奶牛脾脏与肠系淋巴结中淋巴细胞增殖与活化的影响,并揭示大豆异黄酮提高奶牛免疫性能的作用机理。试验采用6×2(浓度×时间)实验设计,各浓度梯度的大豆异黄酮 (100.00、25.00、5.00、1.00、0.25、0.05 μg/mL)与淋巴细胞共育培养48 h和60 h后,用酶标仪在570 nm处测得各孔的OD值。结果表明:(1)添加0.05~25 μg/mL大豆异黄酮能够促进奶牛肠系淋巴结中淋巴细胞的增殖,在添加量为5 μg/mL时达到极显著的促进作用,但大豆异黄酮添加剂量达100 μg/mL时显著抑制肠系淋巴结淋巴细胞的增殖;(2)100 μg/mL和25 μg/mL大豆异黄酮添加组极显著抑制奶牛脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.01),而1 μg/mL浓度组则显著促进奶牛脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.05),其余各浓度组对奶牛脾脏淋巴细胞有抑制作用,但差异不显著。  相似文献   

10.
山羊卵母细胞的体外成熟研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
1.比较了在卵母细胞成熟液中添加相同浓度(10ng/ml)的表皮生长因子(EGF),胰岛素样生长因子(IGF),EGF IGF后,不同生长因子对卵母细胞体外发育率的影响。结果表明,在成熟培养液中添加EGF后,其卵母细胞的成熟率(70.9%)与对照组(67.3%)相比有所提高,但差异不显著;在成熟培养液中分别添加IGF、EGF IGF,其卵母细胞的成熟率分别为80.0%,82.4%,显著高于对照组卵母细胞的成熟率(67.3%)。2.比较了不同季节采集的卵母细胞在体外成熟的情况。结果发现,12月份到来年的1月份,采集的卵母细胞,其体外成熟率最高,为81.0%;11月份采集的卵母细胞,其体外成熟率次之,为74.1%;3—5月份和9—10月份采集的卵母细胞,其体外成熟率为66.0%、69.6%;6—7月初采集的卵母细胞,其体外成熟率最差,为54.7%。3.比较了OM液pH值对卵母细胞体外成熟的影响。当OM培养液的pH值为7.2和6.8 ̄7.0时,卵母细胞成熟率的为66.2%和61.0%,显著高于pH≥7.5时的成熟率(50.9%,P<0.05)。  相似文献   

11.
兰州百合微繁的研究   总被引:1,自引:2,他引:1  
以兰州百合的鳞茎增殖为基础,进行了离体微繁研究。鳞茎增殖的适宜激素组合为0.9 mg/L BA +0.1~0.2 mg/L NAA。培养基中总离子浓度和氮浓度过高或过低都会影响兰州百合增殖,3种基本培养基N6、MS、和1/2MS以N6增殖效果最好。适当提高糖浓度对鳞茎增殖有促进作用,在各处理中以蔗糖浓度为40 g/L增殖倍数高。兰州百合的适宜生根培养基为1/2MS+IBA0.1 mg/L,生根率达100%,生根苗移栽成活率达90%。  相似文献   

12.
日本晚樱组培快繁技术研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
进行了日本晚樱的组培快繁试验。试验结果表明,日本晚樱最佳的增殖培养基是MS/ML + 6-BA 0.5 mg/L + NAA0.05 mg/L +白糖40g/L +琼脂4.5g/L,增殖系数为2.47~2.56;最佳生根培养基为ML+IBA0.05mg/L +NAA0.05 mg/L +白糖20g/L +琼脂4.5g/L,生根率为100%;炼苗12~17d后移栽至草炭土中,成活率达90%。  相似文献   

13.
药剂防治苹果腐烂病优化方案研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
用福美胂40%wp与多菌灵50%wp两种杀菌剂以不同浓度混配及不同时期喷雾防治苹果腐烂病。结果表明:福美胂和多菌灵单独使用时,防治苹果腐烂病作用相当。福美胂高浓度与多菌灵低浓度配合或福美胂低浓度与多菌灵高浓度配合使用时对苹果腐烂病有80%以上的防效。两药剂配合使用的优化方案为福美胂40%wp50~75倍液,多菌灵50%wp100~200倍液;在青海苹果产区,喷药期在3月下旬至4月中旬,防效最佳。  相似文献   

14.
本实验利用弗式完全佐剂和弗式不完全佐剂,乳化病毒,制备免疫抗原,对BALB/c小鼠进行三次免疫。将免疫效价达到1:10000以上的免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法对阳性杂交瘤细胞株进行筛选,并通过有限稀释法将呈强阳性的杂交瘤细胞亚克隆3~4次,直到杂交瘤细胞阳性率达到100%。得到阳性株命名为2E3,对阳性株细胞进行扩大培养,并将细胞注入腹腔,提取腹水,测定细胞上清及腹水的效价,分别为10×25,10×26。利用亚类鉴定试剂盒测定单抗的亚类。鉴定结果为IgG1型。  相似文献   

15.
给昆明种雌性小白鼠经口灌服飞机草水提物,用改良寇氏法测定了飞机草全草的急性LD50;另取一批小白鼠,每隔3d分别用浓度为5g/ml、2.5g/ml、1.25g/ml和0.625g/ml的飞机草水提物经口灌服一次,共灌服5次,进行试验期为35d的飞机草亚急性毒性试验。结果发现,飞机草全草水提物对昆明种雌性小白鼠的急性LD50为227091.02mg/kg,95%可信限为227090.96-227091.07mg/kg,即飞机草水提物对昆明种雌性小白鼠实际无毒。但飞机草具有亚急性毒性作用,供试小白鼠出现中毒体征和病理学变化,且亚急性毒性作用随着飞机草水提物浓度的增大和试验时间的延长而增强。  相似文献   

16.
适宜控制培养基用量,能稳定威廉斯B6香蕉组培苗生长量、繁殖率,减少原料投入。30ml的用量其增殖率最高、培养基利用率较高,超过30ml的用量其增殖率相对下降,培养基利用率降低,但单苗增重量最大,综合考虑培养基损失、蕉苗耐SO2性等因素,认为培养基用量应控制在25~30ml/瓶。威廉斯B6在封闭的15g/100ml Na2SO3环境下表现出比粉蕉、大蕉较高的SO2敏感性,但与巴西蕉类似。此为香蕉组培苗标准化生产及不同品种香蕉苗的抗SO2逆境管理提供部分依据。  相似文献   

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