应用SS-PCR技术建立番石榴实蝇快速鉴定方法     

《江西农业学报》2022,(2)

应用种特异引物PCR(Species-specific PCR, SS-PCR)技术,基于mt DNA COⅠ线粒体基因系列,设计了1对能够准确鉴定番石榴实蝇Bactrocera(Bactrocera)correcta(Bezzi)的种特异性引物FR447和FF463-486,选用番石榴实蝇作为阳性对照,以杨桃实蝇B.carambolae Drew&Hancock等其他19种实蝇作为阴性对照,进行PCR扩增并将PCR产物进行电泳检测。结果表明:仅番石榴实蝇能够在约645 bp位置扩增出1条清晰且单一的目的条带。将本实验建立的SS-PCR鉴定方法应用在实际检疫工作中,得到了验证。  相似文献   

应用SS-PCR技术设计种特异性引物快速鉴定瓜实蝇     

《安徽农业科学》2020,(6)

[目的]为了促进果蔬进出口贸易和快速通关,防止瓜实蝇[Bactrocera cucurbitae(Coquillett)]进一步传入扩散,迫切需要开展适合实蝇快速鉴定技术的研究。[方法]应用SS-PCR技术,基于mtDNA COⅠ序列,设计了1对能够准确鉴定瓜实蝇的种特异性引物GF85和GR531。选用瓜实蝇作为阳性对照,南瓜实蝇[B.tau(Walker)]、具条实蝇[B.scutellata(Hendel)]等其他19种待测实蝇作为阴性对照,提取供试虫样基因组DNA,并进行PCR扩增和电泳检测。[结果]仅虫样瓜实蝇能在约447 bp位置扩增出一条清晰且单一的条带,其余的虫样未出现条带。[结论]将该试验建立的SS-PCR鉴定方法应用于实际进出境果蔬截获和疫情监测的虫样的鉴定,并得到验证,表明该方法具特异性、稳定性强,可在实际的实蝇鉴定工作中应用。  相似文献   

利用物种特异性PCR技术快速鉴定南瓜实蝇     

黄振  侯有明  郭琼霞  陈韶萍 《福建农业学报》2021,(2):215-220

[目的] 快速鉴定我国进境植物检疫性害虫南瓜实蝇Bactrocera tau(Walker),防止该虫传入扩散.[方法] 基于物种特异性PCR(SS-PCR)技术,选取20种形态近似的常见实蝇,将南瓜实蝇作为阳性对照,提取基因组DNA模板,选用mt DNA COⅠ序列,检查同源系列,设计筛选1对可快速准确鉴定南瓜实蝇的...  相似文献   

基于种特异引物(SS-COI)快速鉴定锈红果实蝇     

黄振  郭琼霞  侯有明 《安徽农业科学》2021,49(21):164-166,206

[目的]开展不受虫态限制的实蝇快速鉴定技术研究.[方法]基于mtDNA COⅠ基因序列,筛选设计了一对能够准确鉴定锈红果实蝇的种特异性引物XF29和XR293,选用锈红果实蝇作为阳性对照,颜带实蝇B.cilifer(Hendel)、瘤胫实蝇B.tuberculata(Bezzi)等19种实蝇作为阴性对照,进行PCR扩增和电泳检测.[结果]仅阳性种锈红果实蝇在约265 bp的位置扩增出一条清晰且单一的条带,其余实蝇均未出现任何条带.[结论]采用SS-PCR技术,基于mtDNA COⅠ基因序列筛选设计的特异引物种特异性和稳定性强,可为进出境果蔬检疫、疫情早期预警和有效监测防治提供快速鉴定的依据.  相似文献   

4种寡毛实蝇属（Dacus）幼虫酯酶同工酶的研究     

杨国海  梁广勤 《江西农业大学学报》1992,14(1):82-85

作者应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分析了芒果实蝇Dacus(Bactrocera)occipitalis Bezzi,番石榴实蝇Dacus(Bactrocera) correctus Bezzi,南瓜实蝇 Dacus(Zeugodacus) tau Walker和瓜实蝇 Dacus(Zeugodacus) cucurbitae Coquillett 4种寡毛实蝇属 (Dacus) 幼虫的酯酶同工酶,从而建立了利用酯酶同工酶电泳方法,鉴定和鉴别实蝇幼虫,结果证明,每种实蝇均有其特定的酶谱,据此,可利用这一技术,将上述4种实蝇幼虫加以鉴别。  相似文献   

利用DNA条形码技术的两种实蝇鉴定研究     

王溪桥  尤佳  王军平  文朝慧  满岳 《农业与技术》2018,(10)

实蝇类昆虫遍布世界的热带、亚热带和温带地区,多为国内外重点关注的重要农业检疫性害虫。目前,针对实蝇的检疫鉴定多依据成虫的形态特征进行,但对残缺虫体、幼虫、蛹等,则无法进行有效鉴定。DNA条形码技术是一种近些年来发展迅速的物种鉴定分子生物学方法 ,作为传统形态学物种鉴定方法的补充,它利用一个短的DNA片段做标记,以帮助确定某一物种。本研究利用传统形态学方法,结合DNA条形码技术,利用一对通用引物,对具条实蝇Bactrocera scutellata和南瓜实蝇Bactrocera tau 2种实蝇类害虫DNA的COI基因进行扩增,扩增PCR产物经测序后同NCBI及BOLD数据库比对进行物种鉴定。结果表明,传统昆虫形态鉴定方法以DNA条形码技术为辅助,既能对实蝇类昆虫进行准确鉴定。  相似文献   

五种寡毛实蝇幼虫的染色体组型鉴别研究     

梁帆  梁广勤 《江西农业大学学报》1992,14(2):129-136

枯小实蝇 Dacus(Bactrocera) dorsalis,芒果实蝇 Dacus(Bactrocera) occipitalis,番石榴实蝇 Dacus(Bactrocera) correctus,南瓜实蝇 Dacus(Zeugodacus) tau,和瓜实蝇 Dacus(Zeugodacus) cucurbitae 等5种寡毛实蝇3龄幼虫的脑细胞染色体组型,其染色体数目为12者居多,可配染色体均分别为5对,另1对为性染色体。根据试验结果显示,5种实蝇3龄幼虫的染色体组型有不同。  相似文献   

我国南方常见的6种寡毛实蝇PCR-RFLP快速鉴定研究   总被引：10，自引：0，他引：10  

吴佳教  梁帆  胡学难  赵菊鹏  梁广勤 《江西农业大学学报》2004,26(5):770-773

应用PCR—RFLP技术，对我国南方发生和诱捕到的6种寡毛实蝇开展了快速鉴定方法研究，结果表明，设计出的2组引物对6种供试实蝇线粒体DNA(mtDNA)的PCR扩增片断大小分别约为350bp和450bp。用限制性内切酶MSEI和DRAI对PCR扩增产物进行酶切，得到的酶切位点可将供试的6种实蝇区分开来。该方法不受供试实蝇食物源的影响，对各种虫态(卵、幼虫、蛹)和不同性别的成虫均适用，可用于实蝇的快速鉴定。  相似文献   

桔小实蝇等五种实蝇的SSR鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

姚廷山  胡军华  冉春  李鸿筠  刘浩强  雷天刚  雷慧德  马丽娜 《西南农业学报》2009,22(3)

桔小实蝇Bactrocera (Bactrocera) dorsalis (Hendel)是一种为害多种水果、瓜类、茄类蔬菜的检疫性害虫,食性杂、寄主范围广泛,直接威胁水果和蔬菜的安全生产.采用改进的CTAB法提取单头实蝇的基因组DNA,从20对引物中筛选出2对重复性好、多态性高的引物,运用微卫星标记(SSR)技术,初步构建了桔小实蝇和重庆市常见南亚果实蝇B.(Zeugodacus) tau (Walker)、宽带果实蝇B.a(Z.) scutellata (Hendel)、瓜实蝇 B.(Z.) cucurbitae (Coquillett)、黑颜果实蝇B.(Z.) diaphora (Hendel) 5种实蝇的指纹图谱.通过这些图谱可容易区分重庆市常见4种实蝇和桔小实蝇,实现了采用2对引物1次扩增的简单快速有效方法将桔小实蝇与其他4种实蝇区分开.这为重庆市桔小实蝇非疫区的建设提供了快速、准确的鉴定方法.  相似文献   

四种实蝇幼虫蛋白质电泳分析初报     

梁广勤  杨国海 《江西农业大学学报》1991,13(2):134-136

用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,区别寡毛实蝇属(Dacus)的两个亚属(Zeugodacus和 Bactrocera)和4种实蝇幼虫即南瓜实蝇 Dacus(Zeugodacus)tau,瓜实蝇 Dacus(Zeugodacus)cuccurbitae,桔小实蝇 Dacus(Bactrocera)dorsalis 和番石榴实蝇 Dacus(Bactrocera)correctus,结果显示,两个亚属和4种幼虫可用此法分开.  相似文献