共查询到19条相似文献，搜索用时 312 毫秒
1.
[目的]采用时间分辨荧光技术建立氯霉素（CAP）直接竞争免疫检测法（CAPTRFIA）。[方法]以羊抗鼠IgG二抗为固定相,游离CAP与生物素化的CAP人工抗原（CAP—BSA）共同竞争限量的CAP抗体;用铕标记的链霉亲和素示踪。[结果]该方法的灵敏度为0．016ng／ml。用于牛奶样品检测的添加回收率为89．6％,批内和批间变异系数分别为5．5％和10．1％,与甲砜霉素的交叉反应率〈0．01％。[结论]CAPTRFIA直接竞争法灵敏度高、特异性好、性能稳定,适于高通量筛查,有良好的应用前景。 相似文献
2.
通过合成氯霉素完全抗原,制备氯霉素的多克隆人工抗体,建立氯霉素(CAP)的免疫学检测方法。采用重氮法合成氯霉素完全抗原,以氯霉素牛血清白蛋白(CAP-BSA)免疫大耳白家兔,用ELISA方法进行鉴定和特性分析。结果显示,该抗血清与链霉素、青霉素、四环素等常见抗生素的交叉反应率均小于2.1%,IC50为13.65 ng/ml,检测限达到1.01μg/L。获得了选择性好、特异性较高的氯霉素特异抗体,可用于氯霉素的快速定量检测。 相似文献
3.
将氯霉素(CAP)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,间接ELISA测定多抗(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,CAP-HS与BSA合成成功,其分子结合比为15.6∶1,获得了高价、敏感、特异的CAP pAb,为CAP残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。 相似文献
4.
Zhang@yahoo.com.cn。 《勤云标准版测试》2006,(5)
将氯霉素(CAP)中的羟基(-OH)与琥珀酸酐反应引入活性基团羧基形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与BSA和OVA偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被抗原OVA-CAP-HS,采用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术制备氯霉素单克隆抗体(CAPmAb),并对其效价、亲和性和特异性等进行鉴定。结果表明,BSA与CAP-HS偶联成功,分子结合比为1∶15.6;筛选出1A10、2B5、4F9共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1∶6.4×102、1∶3.2×102、1∶1.28×103,腹水分别为1∶1.6×105、1∶8×104、1∶6.4×105,同种型分别为IgG1/κ、IgG2a/λ、IgG2a/κ,亲和常数(Ka)分别为2.14×108、1.68×109、1.84×1010(L/mol);亲和力最高的4F9株对CAP的IC50为7.54ng/ml,经WestGold鉴定与CAP特异性结合,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应分别为150%,与其它CAP类药物和抗菌素无交叉反应性。通过试验获得了抗CAP高价、敏感、特异的mAb,可用于CAP残留检测的免疫学试验。 相似文献
5.
抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立 总被引：5，自引：0，他引：5
以BSA-CAP-HS免疫Balb／C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1．84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0．88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0．5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100％;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。 相似文献
6.
将氯霉素(CAP)化学修饰引入羧基活性基团,形成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS),用混合酸酐法制备免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用UV,SDS-PAGE进行鉴定;BSA-CAP-HS免疫BALB/C小鼠,细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CAPmAb,并鉴定其免疫学特性;应用CAP mAb研制CAP残留快速检测ciELISA试剂盒(CAP-Kit),并测定其性能.结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,分子结合比为1:15.6;筛选出3株杂交瘤,其中最好的4F9株间接ELISA效价细胞上清为1:1.28×103,腹水为1:6.4×105,亲和常数(Ka)为1.84×1010L·mol-1,半教抑制浓度(IC50)为2.4 μg·L-1,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR)为150%,与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应;CAP-Kit的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,线性范围为0.1～128 μg·L-1,灵敏度为0.053 μg·L-1,检测限为0.1 μg·L-1,奶样、肉样的平均添加回收率为88.5%,82.7%,平均批内和批间变异系数<15%.CAP-Kit在4 ℃可保存180 d. 相似文献
7.
将氯霉素(CAP)进行化学修饰引入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的氯霉素半琥珀酸酯(CAP-HS);采用混合酸酐(MA)法将CAP-HS与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成人工免疫原BSA-CAP-HS和包被原OVA-CAP-HS,用红外(IR)、紫外(UV)、凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用BSA-CAP-HS免疫新西兰白兔和SPF鸡制备多克隆抗体(pAb),间接ELISA测定其效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,琼脂双扩散试验、WestGold膜杂交试验和交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,BSA-CAP-HS偶联成功,其分子结合比为15.6∶1,获得了高价、敏感、特异的CAPpAb,为CAP残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。 相似文献
8.
氯霉素废水可生物降解性研究 总被引：2，自引：0，他引：2
研究结果表明：（１）氯霉素废水ＣＯＳ浓度达２９８５８－４９６１３ｍｇ．Ｌ＾－１,ＢＯＤ５／ＣＯＤＣｒ比值为０．４２,,属可生物降解废水,因为其中的氯霉素和氯化物对生物处理较强的抑制作用,故宜适当的稀释处理,（２）用好氧生物法处理时,平均进水ＣＯＤ浓度为８８６ｍｇ．Ｌ＾－１,平均ＣＯＤ去除率６４．５％,用厌氧生物法处理时,平均进水ＣＯＤ浓度为４５３９．５ｍｇ．Ｌ＾－１,平均ＣＯＤ去除率７８％,（３） 相似文献
9.
【目的】建立一种简便、快速、精确的氯霉素（CAP）残留检测方法。【方法】在常规两步式化学发光酶免疫法（CLEIA）的基础上,同时加入一抗和二抗,并进一步优化抗原包被条件、抗体工作浓度、竞争反应时间等试验参数,建立了检测CAP残留的一步式CLEIA。【结果】该方法最佳检测范围为0．045．128μg/L,检测灵敏度达3．16μg／L,最低检测限为0．01μg/L,可检出国际规定的CAP残留标准底限值以下的残留量。与常规两步法相比,在不影响检测限和灵敏度的前提下,可缩短反应时间1．5h。【结论】采用一步式CLEIA检测CAP残留,与常规两步式CLEIA的检测效果相近．日．耗时短．更符合怏涑柃测的要求。 相似文献
10.
用人工合成的氯霉素-卵清蛋白(CAP-OVA)免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术筛选出1株能稳定传代并分泌抗氯霉素(CAP)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞4C9,并以此制备腹水单抗.经间接竞争ELISA(ciELISA)检测,该单抗亚类重链类型是IgG1,轻链为κ类型,单抗腹水效价为1∶1×106,与甲砜霉素、氟甲砜霉素以及其他常见抗生素的交叉反应率小于0.01%.用过碘酸钠氧化法合成CAP酶标记单抗,建立了CAP直接竞争ELISA(cdELISA)方法.此法检测的线性范围为0.1~100 ng·mL-1,半数抑制浓度(IC50)为5.81 ng?L-1.添加回收实验表明所建立的CAP cdELISA方法检测限达到0.1 ng·L-1,对比试验表明其检测灵敏度与商品试剂CAP ELISA基本相当. 相似文献
11.
12.
以陕西省秦巴山区为研究对象，采用层次分析法（AHP），分别构建影响山茱萸生长和药效品质形成的生态因子适宜性评价指标体系，应用ANUSPLIN气象要素精确空间插值、地统计学和GIS空间叠置等方法，探讨研究区山茱萸生长适宜性和药效品质种植适宜性的空间分布特征。结果表明，1）山茱萸生长的高度适宜区主要分布于研究区中部偏南区域，占总面积的19.45%，适宜区主要分布于汉中市西部、安康市中部和商洛市中南部，占总面积的44.28%，勉强适宜区主要分布于汉中市、安康市北部和商洛市西北部区域，占总面积的29.13%，不适宜区主要分布于研究区北部和西部，占总面积的7.14%；2）山茱萸药效品质的高度适宜区主要分布于研究区中南部和东部区域，占总面积的24.66%，适宜区与高度适宜区相邻并交错分布，占总面积的31.34%，勉强适宜区主要分布于汉中市西部和北部、安康市南北两端和商洛市西部，占总面积的25.43%，不适宜区主要分布于研究区北部和西部，占总面积的18.57%；3）研究区山茱萸生长的适宜性程度南北方向变化趋势明显，药效品质的适宜性程度东西方向变化趋势明显。该研究可为秦巴山区发展中药材产业种植提供参考。 相似文献
13.
14.
毛细管电子捕获气相色谱法同时测定水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留 总被引：4，自引：1，他引：3
采用乙酸乙酯提取目标物,正己烷脱脂,微波辅助衍生化,建立了能同时测定水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留量的毛细管电子捕获气相色谱法（GC—ECD）。加标回收实验结果显示,氯霉素在1．0-200．0μg／L范围内、甲砜霉素和氟甲砜霉素在5．0～200．0μg/L范围内成良好的线性,相关系数均大于0．996;氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的检出限分别为0．1、0．2和0．2μg／kg,回收率在79．2％-88．0％之间,相对标准偏差在2．0％-4．1％之间。表明该方法定性定量准确、检出限低、重现性好、省时省力,可以满足水产品中3种氯霉素类药物的多残留安全检测。 相似文献
15.
16.
17.
‘Extended spectral angle mapping (ESAM)’ for citrus greening disease detection using airborne hyperspectral imaging 总被引：1，自引：0，他引：1
Hyperspectral (HS) imaging is becoming more important for agricultural applications. Due to its high spectral resolution, it exhibits excellent performance in disease identification of different crops. In this study, a novel method termed ‘extended spectral angle mapping (ESAM)’ was proposed to detect citrus greening disease (Huanglongbing or HLB), which is a very destructive disease of citrus. Firstly, the Savitzky–Golay smoothing filter was used to remove spectral noise within the data. A mask for tree canopy was built using support vector machine, to separate the tree canopies from the background. Pure endmembers of the masked dataset for healthy and HLB infected tree canopies were extracted using vertex component analysis. By utilizing the derived pure endmembers, spectral angle mapping was applied to differentiate between healthy and citrus greening disease infected areas in the image. Finally, most false positive detections were filtered out using red-edge position. An experiment was carried out using an HS image acquired by an airborne HS imaging system, and a multispectral image acquired by the WorldView-2 satellite, from the Citrus Research and Education Center, Lake Alfred, FL, USA. Ground reflectance measurement and coordinates for diseased trees were recorded. The experimental results were compared with another supervised method, Mahalanobis distance, and an unsupervised method, K-means, both of which showed a 63.6 % accuracy. The proposed ESAM performed better with a detection accuracy of 86 % than those two methods. These results demonstrated that the detection accuracy using HS image could be enhanced by focusing on the pure endmember extraction and the use of red-edge position, suggesting that there is a great potential of citrus greening disease detection using an HS image. 相似文献
18.
香气提取方法对绿茶主要生化成分的影响 总被引：7，自引：0，他引：7
分别对同时蒸馏萃取法（SDE法）、顶空吸附法（HSA法）和减压蒸馏萃取法（VDE法）提取绿茶香气后茶汤的主要生化成分进行了分析研究。结果表明：香气提取方法不同程度地影响绿茶和速溶绿茶主要生化成分的含量，其中SDE法和HSA法的影响较大，SDE法引起儿茶素异构和降解，HSA法影响可溶性单糖和游离氨基酸的含量，但VDE法对绿茶主要生化成分的影响较小，感官审评结果也表明，经SDE法提取香气后的茶汤已完全没有原休的滋味，其次是HSA法，而VDE法提取香气后的茶汤尚有茶的滋味。 相似文献