共查询到20条相似文献，搜索用时 15 毫秒
1.
2.
《畜牧与兽医》2016,(4):112-115
旨在建立一套准确性好、特异性高的检测呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮(AMOZ)的快速检测方法。试验通过优化抗原与抗体稀释倍数、封闭液的选择等试验条件,建立了间接化学发光酶免疫分析方法 (ic-CLEIA)检测AMOZ,并对该方法进行了方法学评价。通过线性方程y=0.268x-0.004表明,IC_(50)值为0.079 ng/m L,最低检测限(IC_(10)值)为2.44 pg/m L,变异系数为6.56%,该法除与呋喃它酮有一定交叉,与其他结构类似物药物并无交叉,表明该法特异性良好。通过添加回收试验,测得回收率在86%~106%,其准确度符合快速检测要求。结果表明,本研究所建立的间接化学发光酶免疫法可以准确测定呋喃它酮代谢物的残留量。 相似文献
3.
在常规酶联免疫法(ELISA)的基础上,用辣根过氧化物酶标记氯霉素与牛血清白蛋白偶联后免疫小鼠制得的单克隆抗体,并优化抗体工作浓度、反应时间等试验参数,建立了一种简便、快速、准确的氯霉素(CAP)残留一步式化学发光酶联免疫检测方法。结果表明:该方法最佳检测范围为20～1620 pg/mL,IC50值达59.911 pg/mL,检测限为9.3 pg/g,可检出国际规定的CAP残留标准限量值以下的残留量。与常规ELISA检测方法相比,不仅提高了检测限和灵敏度,而且反应时间缩短了60 min。采用一步式化学发光酶联免疫检测氯霉素残留,可以大幅度缩减检测时间,更符合快速检测的要求。 相似文献
4.
《黑龙江畜牧兽医》2017,(1)
为了检测中兽药散剂中喹诺酮类药物的非法添加情况,试验利用超高效液相色谱-串联质谱技术,采用ACQUITY UPLCTM C18色谱柱(2.1 mm×100 mm)进行分离,以乙腈(A)和0.2%甲酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,多反应监测(MRM)扫描,电喷雾电离正离子模式(ESI+),流速为0.4 m L/min,外标法定量。结果表明:4种喹诺酮药物在1~100 ng/m L浓度范围内,药物浓度与吸收峰面积呈现良好的线性关系,相关系数(r)≥0.997。检出限为0.3 ng/m L,定量限为1 ng/m L。该方法可以同时定量检测中兽药散剂中是否添加4种喹诺酮类药物,具有快速、准确、灵敏、成本较低、节省时间、可以应用于高通量的实际检测样品等优点。 相似文献
5.
家禽饲料中玉米赤霉烯酮化学发光酶联免疫分析方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
为了建立比较间接竞争化学发光酶联免疫分析法(ic-CLEIA)与直接竞争化学发光酶联免疫分析法(dc-CLEIA)检测家禽饲料中玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的方法,采用二因子交叉试验优化确定最佳包被原浓度和抗体稀释度,建立ic-CLEIA和dc-CLEIA。结果显示:icCLEIA在0.05~5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.383 5x+0.417 9(R2=0.994 6),灵敏度(IC50)为0.611 ng/m L,检出限(LOD)为15 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.79%和1.02%,家禽饲料添加样品回收率为91.9%~112.1%,变异系数小于10.5%;dcCLEIA在0.025~5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.386 5x+0.334 1(R2=0.991 8),灵敏度(IC50)为0.372 ng/m L,检出限(LOD)为3 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.16%和1.20%,添加样品回收率为87.3%~119.3%,变异系数小于9.8%。结果表明:两种方法精确,灵敏度高,均可作为定量检测ZEN的有效手段;与ic-CLEIA相比,dc-CLEIA更适用于检测家禽饲料中的ZEN。 相似文献
6.
7.
应用PCR技术检测鹿流行性出血病病毒 总被引：1，自引：0，他引：1
对PCR (包括PCR/化学发光杂交检测、抗体亲和捕获套式PCR检测、原位PCR检测、PCR/RFLP检测 )检测在最近几年鹿流行性出血病病毒 (EHDV ,包括EHDV 1 ,EHDV 2等 )临床诊断的应用和研究成果进行了论述 ,认为该技术为EHD的诊断、流行病学调查、疫情监控及防制等提供了一种更灵敏、特异和快速的方法 相似文献
8.
《中国预防兽医学报》2015,(10)
为探索基于便携式电流型葡萄糖传感器对致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌(S.aureus)的快速检测新技术的可行性,本研究选择和制备了适用于该检测系统,并具有对目标菌严格选择性的培养基,优化培养物中葡萄糖(Glc)初始浓度、培养检测时间、p H值和温度等参数,依据培养前后培养物中Glc含量差值的变化直接对新鲜牛乳样品中的目标菌进行定性和定量检测分析。结果显示,对6 h培养物进行检测时,即可获得Glc消耗量与培养物中S.aureus浓度的对应线性关系,实现对菌液浓度为103cfu/m L~107cfu/m L培养物的初步快速检测,最低检出限为2.6×102cfu/m L;对不能获得判别结果的培养物需要继续培养至24 h时再测定,即可实现对菌液浓度为101cfu/m L~102cfu/m L培养物的检测;对照国标方法确定标准曲线并进行验证试验;特异性和抗干扰试验表明该方法具有良好的特异性和抗其他细菌污染干扰的特性。本研究建立的方法可以直接检测牛的新鲜乳样,具有简便、经济、快速及灵敏等方面具有显著优势,为我国中、小型奶牛场和基层兽医站提供了一种初步快速检测致奶牛乳腺炎S.aureus的方法。 相似文献
9.
本研究采用快速溶剂萃取和系统固相萃取净化的前处理方法和气相色谱串联质谱联用仪(Gas chromatography-mass spectrometry-mass spectrometry,GC-MS-MS),建立了测定蛋及其制品中16种多溴联苯醚类持久性有机污染物残留的测定方法。采用快速溶剂萃取仪进行快速提取,有效缩短样品前处理时间,结合质谱多反应监测采集方式,可有效减少基质干扰,提高方法的选择性。样品经正己烷∶二氯甲烷(1∶1,V/V)混合溶剂提取,分散基质固相萃取方式净化后,采用质谱多反应监测(MRM)模式检测,内标法定量。经方法学验证,16种多溴联苯醚质量浓度在0.01～20.0 ng/m L范围内呈现良好的线性关系,r0.99;样品平均回收率为67.5%～112.2%;相对标准偏差为2.6%～17.3%;方法检出限为0.2~50 pg/g,将该方法应用于实际20批样品的检测,结果显示20批样品中ΣPBDEs含量中位数为529.2 pg/g湿重。实际样品检测结果表明,本方法可实现蛋及其制品中16种多溴联苯醚灵敏、准确的定性定量分析。 相似文献
10.
采用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了一种快速、灵敏、高度特异的副猪嗜血杆菌(Hps)检测方法。针对Hps16S rRNA基因保守区域设计6条引物,在Bst大片段聚合酶的作用下,对模板DNA进行梯状等温扩增,并且优化LAMP的反应体系,检验其灵敏性与特异性。结果表明:该方法对Hps的最小检测限为0.2pg/μL,灵敏性高于常规PCR方法103倍;完成反应仅需65min。该方法灵敏度高、特异性好,能够作为Hps的快速诊断方法,对于基层和实验室应用均具有良好前景。 相似文献
11.
己烯雌酚属于二苯乙烯类,并具有雌性激素的作用,是有效的促蛋白合成类固醇,在家禽或鱼类的肉产品中过量残留己烯雌酚会对消费者造成危害,为此己烯雌酚已经被禁止在食品生产中使用。但肉类食品中的过量残留,主要是由于被饲喂动物的饲料中非法添加含高含量的己烯雌酚所致,所以要使食品中己烯雌酚得到有效控制,对饲料中的己烯雌酚进行监测也很重要。经试验:利用高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测饲料中己烯雌酚的含量,试样中的己烯雌酚经用甲醇溶解试样后,离心过膜后,采用负电喷雾离子源,在多反应监测(MRM)模式下进行分析,外标法定量,三对定性离子对分别为:m/z320.90>151.85、320.90>256.92和320.90>193.90,定量离子对为320.90>151.85。在1μg/L～500μg/L浓度范围内,呈良好的线性,相关系数≥0.99995。在鸡用配合饲料、鸡用浓缩饲料、鱼用配合饲料、鱼用浓缩饲料中,平均回收率≥93.0%,回收率标准偏差≤0.85%,检测限为0.01mg/kg,定量限为0.02mg/kg。该方法分析饲料中的己烯雌酚,前处理方法操作简便、快速、净化效果好,可同时定性和定量,方法的回收率、重复性、检测限均能满足饲料中己烯雌酚残留检测的要求。 相似文献
12.
《中国预防兽医学报》2015,(5)
为建立一种禽流感病毒(AIV)的快速检测方法,本研究根据环介导等温扩增技术(LAMP)原理,设计了针对AIV M基因4个不同区段的特异性引物,并对反应条件和反应体系进行优化,建立了AIV的RT-LAMP方法。结果表明,该方法对AIV H1~H16亚型的检测结果均为阳性,而对其他禽类病毒的扩增均为阴性,具有良好的特异性。对AIV的最低检测限为13.43 EID50/m L,灵敏度为普通一步RT-PCR的10倍;扩增反应可以在恒温水浴内60 min内完成;在反应体系中添加荧光染料后,肉眼即可判定检测结果。该检测方法与RT-PCR方法和荧光定量RT-PCR方法对临床样品检测的符合率均为81.8%。该方法能够简便、快速、灵敏、特异地检测AIV。 相似文献
13.
14.
《中国预防兽医学报》2015,(8)
为建立一种鱼类鳗弧菌的快速检测方法,本研究以鳗弧菌的tox R基因为靶基因设计特异性引物,并对反应条件和反应体系进行优化,建立了基于赖解旋酶DNA恒温扩增技术(HDA)的鳗弧菌快速检测方法。结果显示,该方法对鱼类鳗弧菌检测为阳性,而对其他鱼类病原菌的检测结果均为阴性,具有良好的特异性;标准菌株菌体基因组DNA最低检测限为30 ng/m L,人工污染模拟样品的最低检出限为2.1×102cfu/m L;利用该方法与普通PCR方法对临床120份鱼类样品进行检测,符合率为100%,检出率均高于细菌培养法。本研究建立的检测鳗弧菌的HDA法具有快速、简便、特异、灵敏等特点,适合基层实验室使用,具有广泛的应用前景。 相似文献
15.
高效液相色谱法检测6种中兽药散剂中违规添加的泰乐菌素和替米考星 总被引：1，自引：0，他引：1
《饲料研究》2015,(6)
建立了检测止痢散、银翘散、健胃散、白头翁散、荆防败毒散和苍术香连散6种中兽药散剂中违规添加的泰乐菌素和替米考星的高效液相色谱法。样品直接用乙腈提取;采用Waters SymmetryC18 5μm,4.6 mm×150 mm色谱柱,以乙腈-0.04 mol/L磷酸氢二钠溶液(p H=6.5)(70∶30)为流动相,检测波长为285 nm,流速1 m L/min,温度为室温。结果显示:2种大环内酯类药物在0.2~100μg/m L范围内,线性关系良好,R2均大于0.99,该方法平均回收率为89.0%~97.9%,批内相对标准偏差(RSD)均小于10%,该方法检测限为0.05和0.08 mg/g,定量限均为0.1和0.16 mg/g。结论:试验建立的方法灵敏、简单、快速且准确,可用于该6种中兽药散剂中违规添加的泰乐菌素和替米考星的测定。 相似文献
16.
本研究旨在建立一种特异、灵敏、快速的ASFV-G-ΔI177L实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法。针对ASFV I117L基因的保守区域设计特异性引物/探针对，通过优化反应条件和反应程序，从而提高检测方法的灵敏性，并验证检测方法的重复性和特异性。对170份临床样品进行了检测，并与OIE推荐的检测方法进行对比。结果表明，基于ASFV I117L基因所设计的特异性引物/探针对，能扩增2.2×101～2.2×1010copies·μL-1的pMD18-I177L标准质粒，建立的标准曲线R2可达0.995 7,最低检测模板浓度为2.2×101copies·μL-1;该方法扩增反应采用一步法，耗时35 min,批内、批间变异系数均<1.8%;针对ASFV I177L基因特异性扩增，但对其他5种常见猪病毒核酸样品及无酶水未见阳性扩增；用该方法对170份临床样品进行检测，本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了一种特异、灵敏、快速AS... 相似文献
17.
为了建立一种快速的乙型脑炎病毒(JEV)病原检测方法,根据GenBank上登录的JEV基因组序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测JEV的套式RT-PCR方法。结果:该方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是100 pg,第2次扩增的敏感性是1 pg,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。研究表明建立的套式RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性,可以准确快速检测出极低含量的JEV,将为JEV感染的临床诊断、病料检测和分子流行病学调查等提供一种高效、快速、特异、灵敏的检测方法。 相似文献
18.
黄曲霉毒素B化学发光免疫检测方法的建立 《畜牧与饲料科学》2015,36(10):29-29
在利用化学法合成吖啶酯标记的黄曲霉毒素B1(AFB1)抗原(AFB1-BSA-AE)的基础上,建立了化学发光免疫分析法(CLIA)检测样品中的黄曲霉毒素B1(AFB1)含量。结果表明,该方法对应的回归线方程为y=-16.995Ln(x)+166.06,R2=0.9996,AFB150%竞争抑制浓度(IC50)为0.924 ng/m L,检测的线性范围为0.1~5.0 ng/m L。在黍米样品中的加标回收率为75%~115%,变异系数为0.36%~1.20%。 相似文献
19.
《中国预防兽医学报》2017,(2)
为建立同时检测非洲猪瘟病毒(ASFV)、水疱性口炎病毒(VSV)、猪口蹄疫病毒(FMDV),猪瘟病毒(CSFV)以及猪伪狂犬病病毒(PRV)的多重RT-PCR检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的参考病毒株序列,选择各病毒的保守序列设计5对特异性引物,通过优化反应条件,建立了一种可以同时快速检测以上5种病毒的多重RT-PCR检测方法。结果显示,该方法对不同的细菌或病毒模板扩增结果均为阴性,特异性强;敏感性试验表明该方法对PRV、CSFV、ASFV、VSV和FMDV的核酸最少检出量分别为8.82×10~3拷贝/μL、6.87×10~4拷贝/μL、5.71拷贝/μL、4.93×10~4拷贝/μL和4.32×10~2拷贝/μL。以上结果表明该方法快速、灵敏、特异性强,对以上5种猪病病毒能够进行快速鉴别检测,为其临床诊断与流行病学调查提供了有效的检测方法。 相似文献