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1.
过氧化氢诱导小麦悬浮细胞程序性死亡 总被引：2，自引：0，他引：2
为研究过氧化氢对小麦洛夫林10悬浮细胞的影响,分别采用溴酚兰染色、改良苯酚品红染色和琼脂糖凝胶电泳对不同浓度的过氧化氢处理小麦悬浮细胞后的细胞死亡率、细胞核形态变化及基因组DNA的完整性进行了观察和检测。结果表明:随着过氧化氢浓度的增加以及处理时间的延长细胞死亡率逐渐上升,并且伴随有细胞核染色质的凝集,琼脂糖凝胶电泳检测到DNA Ladder。证明过氧化氢能够诱导小麦悬浮细胞发生程序性死亡。 相似文献
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Parasiticein诱导烟草细胞凋亡的形态及生化特征 总被引：3，自引：0，他引：3
【目的】研究烟草细胞对parasiticein的反应,了解parasiticein诱导烟草细胞的PCD的发生机制。【方法】用浓度约100 nmol•L-1的parasiticein处理烟草悬浮细胞,相差显微镜下观察细胞的形态变化。【结果】发现烟草细胞的细胞膜收缩,与细胞壁间形成空隙,原生质浓缩等;用trypan blue 染色后观察到类似现象。对诱导处理的悬浮细胞经DAPI（4,6-diamino-2-phenylindole）染色后,通过荧光显微镜观察,发现细胞核先后表现染色质凝集、形成颗粒状等特征;对处理的悬浮细胞提取基因组DNA并进行琼脂糖凝胶电泳,可观察到梯状的DNA条带（DNA laddering）。研究还发现,parasiticein诱导的烟草细胞死亡可被蛋白激酶信号通路抑制剂K252-a部分抑制。【结论】parasiticein诱导的烟草细胞死亡具有细胞凋亡的典型形态及生化特征,是一种主动的细胞死亡过程。 相似文献
3.
为探讨10℃低温导致淡水白鲳尾鳍细胞系CBT死亡的原因及其可能机制.采用CCK-8试剂盒法检测细胞存活率,荧光染料H2DCFDA染色测定细胞内活性氧(ROS)含量,亚二倍体峰和Tunel分析检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段分析,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态变化,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率.结果表明随CBT细胞受10℃低温作用时间的延长,细胞存活率显著下降,细胞内ROS含量和LDH释放率显著增加(P＜0.01).低温处理3 d的CBT细胞经流式细胞仪检测出现亚二倍体峰,凋亡率为13%.再经32℃复温12 h后,琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯带;Tunel检测,低温处理3、4和5 d的CBT细胞分别有23.49%,27.72%和35.10%发生凋亡.低温处理5 d的CBT细胞核分裂成多个小核,呈现出典型的凋亡小体.因此10℃低温能诱导CBT细胞凋亡.ROS参与了10℃低温致CBT细胞损伤及凋亡过程. 相似文献
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杨树与叶锈菌互作中的细胞程序性死亡 总被引：1，自引：0，他引：1
用落叶松-杨栅锈菌(Melampsora larici-populina)菌系Gl052和Sb052分别接种抗病川杨(Populus szechuanica)与感病太白杨(P.purdomii)叶片,对叶肉细胞核进行荧光染色观察及基因组DNA Ladder条带检测,初步探讨杨树与锈菌互作过程中的寄主细胞程序性死亡进程.结果表明:抗病品种川杨受落叶松-杨栅锈菌侵染后有过敏性坏死现象,DNA Ladder检测发现有降解的DNA小片段,染色观察发现接种0.5 dpi细胞核开始发生变化,3～4 dpi细胞核裂解,7 dpi细胞核消失,表现出明显的细胞程序性死亡特征,在DNA电泳图谱上观察到明显的梯状DNA条带.感病品种太白杨受该叶锈菌侵染后未检测到降解的DNA小片段,荧光染色观察细胞核也未明显变化,未明显表现出PCD特征. 相似文献
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采用倒置相差显微镜、电子显微镜、琼脂糖凝胶电泳等技术研究水泡性口炎病毒诱导BHK-21细胞凋亡．形态学观察结果显示,水泡性口炎病毒感染BHK-21细胞的形态变化具有较典型的凋亡特征,如细胞膜内陷、核染色质凝集边聚等;琼脂糖凝胶电泳出现180-200bp整倍数的DNA梯形带．上述结果表明水泡性口炎病毒可诱导BHK-21细胞凋亡。 相似文献
6.
【目的】阐明氯化汞处理烟草悬浮细胞产生的细胞死亡具有细胞编程死亡（programmed cell death,PCD）的特征和分子机制。【方法】采用形态和生物化学方法观察氯化汞处理细胞后的变化,并采用药理学方法,通过添加抑制剂和抗氧化剂阐明氯化汞引发的信号转导途径。【结果】氯化汞诱导产生的细胞死亡具有PCD特征,包括染色质浓缩、细胞核的TUNEL检测呈阳性和DNA ladder的形成。氯化汞诱导烟草悬浮细胞过氧化氢积累,过氧化氢酶和抗坏血酸等抗氧化剂能降低细胞死亡率。蛋白激酶抑制剂、磷脂酶C和磷脂酶D的抑制剂能显著地降低氯化汞引起的细胞死亡和过氧化氢积累。【结论】氯化汞引起的细胞死亡是一种PCD,蛋白激酶和磷脂信号介导的过氧化氢积累参与细胞死亡过程。 相似文献
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8.
[目的]探讨干扰素(IFN)体外诱导肝癌细胞凋亡及其相关基因表达的作用。[方法]不同浓度的干扰素(IFN)处理肝癌细胞系CBRH-7919细胞不同时间后,光学显微镜下观察其形态学改变,用琼脂糖凝胶电泳检测作用不同时间干扰素对其细胞凋亡的影响,利用细胞免疫组化技术检测不同作用时间下BAX蛋白表达量的变化。[结果]干扰素作用肝癌细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡形态学变化:细胞体积缩小,变形,细胞膜完整;细胞核固缩,染色质凝集,核碎裂,染色质片段化,凋亡小体形成等。琼脂糖凝胶电泳测得随着干扰素浓度的增高,出现典型的DNA LADDER。随着时间的增加BAX蛋白表达量出现增加,尤以48 h较明显。[结论]IFN可以诱导肝癌细胞凋亡,可能是由于IFN上调了BAX蛋白的表达,从而增强了自身对肝癌细胞的凋亡作用。 相似文献
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盐胁迫诱导小麦根尖细胞的氧化伤害及死亡 总被引：2，自引：1，他引：1
采用200 mmol·L~(-1) NaCl溶液对小麦(Triticum aestivum L.)幼苗进行胁迫处理,然后对胁迫0、12、24、48和72 h的小麦根尖的H_2O_2含量、O_2~-产生速率、膜脂过氧化程度、质膜完整性和根尖DNA降解等进行分析研究。结果表明:在胁迫诱导的小麦根尖中,H_2O_2含量、O_2~-产生速率、硫代巴比妥酸反应物(TBARS)含量和细胞死亡数都随着胁迫时间的延长而逐渐增加。对胁迫诱导的根尖进行组织染色发现,膜脂过氧化和质膜完整性破坏的程度和分布范围都随着胁迫时间的延长而逐渐加重和扩大。用琼脂糖凝胶电泳研究根尖DNA的降解情况,在电泳图上观察到DNA梯状和弥散型拖尾带,表明在200 mmol·L~(-1) NaCl胁迫下,小麦根尖细胞可能同时发生细胞凋亡和细胞坏死。 相似文献
11.
利用流式细胞光度术对草莓３个二倍体、１个五倍体、２个八倍体试管苗的细胞核ＤＮＡ的相对含量进行测定。结果表明,随着倍性水平的增加,细胞核ＤＮＡ相对含量随之成倍增加,说明可利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量来进行倍性鉴定;利用这一技术对草莓几个杂交后代及诱变植株的倍性水平进行了鉴定,发现一诱变植株存在两群核ＤＮＡ相对含量相差近一倍的细胞,初步认为这一诱变植株为倍性嵌合体,该结果进一步证明这种方法的可靠性。 相似文献
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为探讨体细胞核移植技术用于种公猪的实际生产,复制优秀种公猪的可行性,精选优秀种公猪作为供体,取其耳组织成纤维细胞作核供体,体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎,胚胎体外培养后进行移植。试验先后移植了3 437枚1～4细胞期克隆胚胎到18头受体母猪的输卵管内,28d经B超检测,有16头受体母猪妊娠(88.89%),11头妊娠足月(68.75%)分娩产下53头仔猪,体细胞克隆猪的生产效率为2.80%(出生仔猪/移植胚胎)。早期生长性状测定结果显示,0和7d时克隆猪的体质量和体尺与普通公猪无显著差异(P>0.05)。利用体细胞核移植技术生产克隆种公猪,可以延伸种公猪的利用时间和空间,放大优秀种猪的利用价值。 相似文献
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应用活体取卵(OPU)技术采集遗传背景清晰的卵母细胞作为受体细胞,与不同来源的供体细胞核进行体细胞核移植(SCNT)。通过微卫星DNA及线粒体DNA检测,分别对5头克隆牛核内和核外DNA进行了分析。结果表明克隆牛的微卫星DNA与核供体牛完全一致,而线粒体DNA则全部来源于卵母细胞。 相似文献
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Curvilinear, three-dimensional motion of chromatin domains and nucleoli in neuronal interphase nuclei 总被引：4，自引：0，他引：4
The term "nuclear rotation" refers to a motion of nucleoli within interphase nuclei of several cell types. No mechanism or function has been ascribed to this phenomenon, and it was unknown whether nuclear structures in addition to nucleoli participate in this motion. Moreover, it was unclear whether nuclear rotation occurs independent of concurrent motion of juxtanuclear cytoplasm. The work reported here presents quantitative evidence, for three-dimensional intranuclear, tandem motion of fluorescently labeled chromatin domains associated with nucleoli and those remote from nucleoli. The results show that such motion is curvilinear, that it is not restricted to nucleoli, and, moreover, that it occurs independently of motion of juxtanuclear, cytoplasmic structures. These results suggest that this motion represents karyoplasmic streaming and its function is to transpose to nuclear pores those chromatin domains actively transcribed. 相似文献
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为研究延边黄牛体细胞核移植(SCNT)胚胎编码过氧化氢酶(CAT)、锰超氧化物酶(Mn-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的mRNA表达情况,以孤雌激活(PA)胚胎为对照,利用反转录PCR扩增延边黄牛SCNT胚胎编码CAT、Mn-SOD和GPx的mRNA,琼脂糖凝胶电泳后使用计算机软件进行半定量分析。结果显示:延边黄牛SCNT胚胎编码CAT的基因在2细胞期开始表达,且与PA胚胎存在显著差异(P0.05);编码Mn-SOD的基因在8细胞期开始表达,与PA胚胎在16细胞期以上时期差异显著(P0.05);编码GPx的基因在4细胞期开始表达,与PA胚胎在4细胞期差异显著(P0.05),8细胞期以上时期差异不显著(P0.05)。与孤雌激活胚胎的差异表明SCNT胚胎抗氧化酶表达的异常可能是由核移植操作过程所引起的。 相似文献
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经沼液浸种的早稻秧苗比对照组秧苗，具有较强的耐冷性，通过电镜对叶肉细胞超微结构动态观察证实，在低温（５°／５℃）下，叶绿体结构和细胞核结构，随着冷害天数的延长，伤害在不断加重，叶绿体结构会出现空洞，基质片断裂，直至崩溃。细胞核染色体凝集，核膜破裂，核内容物丧失等现象出现。而经沼液浸种的秧苗伤害程度有较明显的减轻。 相似文献
18.
Morphological variations of the nucleus in starchy endosperm cell were observed by the electron-transmisson microscope during endosperm development in rice. Along with the development of the starchy endosperm,the nuclei of the cells showed chromatin condensation,the typical feature of programmed cell death(PCD). The nuclei also showed nucleus deformation,disruption of nuclear envelope,nucleoplasm leaking into the cytoplasm and nucleus disintegration resulting in nuclear residue formation. From the nucleus deformation to the nucleus disintegration,the morphological changes of the nucleus were orderly progressive. This indicated that the cell death of starchy endosperm in rice was programmed cell death. Evans Blue staining observation showed that the cell death was initially detected in the central part of starchy endosperm in rice,then expanded outward. The activities of superoxide dismutase(SOD)and catalase(CAT)in rice starchy endosperm both descended continuously as development progressed. The analysis of DNA of rice starchy endosperm did not show the presence of DNA laddering. The above results showed that the cell death of starchy endosperm in rice was a special form of PCD. 相似文献
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为培育肌肉丰满绵羊品系,以前期试验中获得的干涉MSTN基因的转基因细胞株为核供体,进行核移植,将获得的重构胚进行体外培养和胚胎移植。结果表明:所获得的重构胚与绵羊成纤维细胞为核供体时的重构胚分裂比率(分别为44.6%和24.1%)及其发育至桑椹胚比率(分别为15.6%和33.0%)相比,差异无统计学意义;将重构胚移植23只受体后,获得1只流产胎儿,对其进行PCR鉴定,结果显示MSTN基因干涉序列已整合入流产胎儿的基因组中。 相似文献
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在白细胞图像中,由于白细胞细胞核的存在,直接应用分水岭算法时,往往达不到较好的效果。本文提出一种结合EM聚类的改进分水岭算法。通过将EM聚类获得的图像中细胞核区域替换,然后使用基于距离变换的分水岭分割,确定白细胞区域。对距离变换后的图像采用形态学处理减少了细胞分割中的过分割现象。同时使用细胞核位置的先验条件,合并分水岭分割区域,进一步减小过分割的影响。本文方法提供一种新的将分水岭算法应用于白细胞分割的思路。同时实验证明,方法在分割精度上有着良好的表现。 相似文献