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酶联免疫技术检测植物病原真菌 总被引：4，自引：1，他引：3
７０年代初期Ｃｌａｒｋ和Ａｄａｍｓ将酶联免疫吸附检测（Ｅｎｚｙｍｅ－ＬｉｎｋｅｄＩｍｍｕｎｏｓｏｒ－ｂｅｎｔＡｓｓａｙ,简称ＥＬＩＳＡ）用于植物病毒分析［１］。随着进出口贸易发展,迫切需要一种快速检测农产品中植物有害真菌的方法,常规的形态学分类检测方... 相似文献
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以莴苣花叶病毒（Ｌｅｔｕｃｅｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ）及其单克隆和多克隆抗体为试材，以直接ＥＬＩＳＡ、生物素抗生物素ＥＬＩＳＡ和异种动物双抗体夹心ＥＬＩＳＡ为方法，分别用酶联放大系统进行比较，发现酶联放大系统比常规的方法灵敏度高３～１０倍，其中以生物素抗生物素酶联放大系统效果最好，灵敏度达１ｎｇ 相似文献
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几种危险性病毒抗血清的制备及检测方法的建立 总被引：1，自引：2，他引：1
番茄环斑病毒、烟草环斑病毒和南芥菜花叶病毒用改进的方法提纯后免疫兔子，制备出高质量的抗血清。琼脂扩散效价为１／３２０，用ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ方法检测病汁液可达１０－３～１０－４。３种血清之间无交叉反应，与健康寄主和常见的自然寄主蛋白也无反应。应用３种血清分别对２３种植物１００多个采集的样品和进口种子进行了ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测，未发现有上述３种病毒存在 相似文献
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浅谈植物病毒ELISA检测试剂盒中阳性对照问题 总被引：1，自引：1，他引：0
在植物病毒的血清学检测技术中,阴性和阳性对照的设立是必需的。由于ＥＬＩＳＡ试验本身的优点,使得它在血清学检测技术中应用最为广泛,随着技术的发展,现在有多种商品化的试剂盒出现。就ＥＬＩＳＡ试剂盒而言,毫无疑问需要给用户提供相应的对照,包括阴性和阳性对照... 相似文献
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用从猪传染性胃炎病毒（ＴＧＥＶ）强毒Ｍｉｌｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株的重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓｐｉｋｅ，Ｓ）建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群中抗ＴＧＥＶ抗体。实验表明，用重组病毒Ｒ２－２接种昆虫传代细胞系Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（ｓｆ９），所表达的重组蛋白量在接种后第７２小明达到最高值；该重组蛋白能与抗ＴＧＥＶ Ｓ蛋白Ａ 相似文献
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斑点免疫金和免疫金/银染色法检测烟草环斑病毒 总被引：11，自引：4，他引：7
在硝酸纤维素膜上进行的斑点免疫胶体金检测烟草环斑病毒技术已经建立.免疫金染色检测提纯病毒的灵敏度为25ng,检测病汁液可稀释10倍.使用免疫金/银染色则灵敏度更进一步提高. 相似文献
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梨中AVERMECTIN B1残留的酶联免疫吸附测定 总被引：2，自引：0，他引：2
本文建立了检测梨中Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的间接竞争酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）。以结合物４″－Ｏ－（单）琥珀酰Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１－ＢＳＡ免疫家兔，制备特异性针对Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的多克隆抗体。梨样本经甲醇提取后用ＥＬＩＳＡ检测。在６．０￣６０ｍｇ／ｋｇ添加浓度范围内，Ａｖｅｒｍｅｃｔｉｎ Ｂ１的回收率为８６％￣１０５％，变异系数（ＣＶ）为４％￣８％。样本检测限为０．１ｍｇ／ 相似文献
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免疫荧光技术和固相酶联免疫吸附法检测稻细条病菌的比较研究 总被引：1，自引：0，他引：1
比较免疫荧光技术和固相酶联免疫吸附法对稻细条病菌的检测灵敏度，前者为１０＾３ｃｆｕ／ｍｌ，后者为１０＾４ｃｆｕ／ｍｌ。通过与５属９种常见病原细菌和１１株来自不同地区的稻细条病菌的反应，二者均未发生交叉反应，表现出较好的特异性。对１８份不同带菌材料的检测结果：ＩＦＴ法检出符合率的６６．６７％，ＥＬＩＳＡ法检出符合率为３３．３３％，相比而言，在定性检测方面ＩＦＴ是比ＥＬＩＳＡ操作更简便，更灵敏的快速检 相似文献
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一种新型病毒检测技术 总被引：1，自引：0，他引：1
一种新型病毒检测技术（河北农业技术师范学院河北昌黎０６６６００）刘品贤有关植物病毒的诊断和鉴定方法是很多的，常用的有免疫扩做法、凝聚法、酶联免疫鉴定法（ＥＬＩＳＡ）、荧光抗体法、直接荧光诊断法（ＤＦＤ）、免疫吸附电镜法等。应用上述方法对病毒进行检测，... 相似文献
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在常规ＥＬＩＳＡ间接法的基础上，应用单克隆抗体检测感染棉铃虫核型多角体病毒的棉铃虫幼虫体内病毒粒子。３龄幼虫饲喂表层涂有ＨａＮＰＶ人工饲料后９小时，即可在幼虫抽提液中检出病毒辣粒子抗原，而典型病虫显症需５－６天后才出现。因此本法是一种灵敏、快速、特异性强的检测昆虫杆状病毒辣的方法。利用单克隆抗体结合ＥＬＩＳＡ试验分别检测来自江苏和山东不同地区棉田自然死亡的棉铃虫幼虫，表明在江苏和山东不同棉区可检测 相似文献
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棉花枯萎病菌的血清学研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究以棉花枯萎病菌公安菌株为材料，用Ｄ．Ｉａｎｎｅｌｉ法提取菌丝孢子蛋白抗原，按改进的Ｊ．Ｅ．Ｄｅｖａｙ免疫方案制备抗血清。琼脂双扩散测得效价达１／６４，用琼脂双扩散、（比较）对流免疫电泳、间接ＥＬＩＳＡ及ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ测定抗血清的特异性和灵敏度。结果表明４种检测方法基本上均能鉴别到尖孢镰刀菌种的水平，但不能鉴别到种以下的分类单位，４种方法检测所达的灵敏度依次为４．８６２５×１０－２，６．０７８×１０－３，３．７９９×１０－４，３．７９９×１０－４ｍｇ×ｍｌ－１。除此之外，本研究对琼脂双扩散法在真菌血清学上的应用上作了摸索 相似文献
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黄瓜细菌性角斑病免疫胶体金检测试纸条的研制 总被引：2，自引：0，他引：2
应用免疫胶体金技术进行黄瓜细菌性角斑病(Pseudomonas syringae pv.lachrymans)的快速检测研究。为了研制黄瓜细菌性角斑病的免疫胶体金检测试纸条,通过柠檬酸三钠还原法制备胶体金,选择25 nm胶体金标记黄瓜细菌性角斑病菌多克隆抗体(CMb)。采用双抗夹心法,将CMb-胶体金复合物包被在胶体金结合垫上,将羊抗兔二抗和CMb包被在硝酸纤维素膜上,分别作为质控线(C)和检测线(T),组装成试纸条。该试纸条检测灵敏度为106 cfu/mL,与唐菖蒲疮痂病菌(Pseudomonas fluorescens biovarⅡ)等26个菌株无交叉反应,特异性强,检测时间为15 min。稳定性试验表明试纸条在37℃条件下放置15 d可保持检测结果的可靠性。用试纸条对田间采集的病叶进行检测,C线和T线清晰可见,缓冲液对照呈阴性反应。本试纸条可应用于生产上黄瓜细菌性角斑病早期快速检测,进而指导病害防治。 相似文献
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用特异性抗血清制备的抗血清纸片应用于酶联免疫吸咐实验（ＥＬＩＳＡ），取得了良好的结果。目前已将抗血清纸片用于南芥菜花叶病毒（ＡｒＭＶ）、番茄环斑病毒（ＴｏｍＲＳＶ）、烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）、南方菜豆花叶病毒（ＳＢＭＶ）等进境植物危险性病毒的检测，取得与使用冻干保存抗血清相同的效果。应用抗血清纸片方便、经济、便于保存和邮寄。 相似文献
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用单克隆抗体结合酶联免疫吸附试验检测棉铃虫幼虫体内的核多角体病毒 总被引：1，自引：0，他引：1
在常规ＥＬＩＳＡ间接法的基础上，应用单克隆抗体检测感染棉铃虫核型多角体病毒的棉铃虫幼虫体内病毒粒子。３龄幼虫饲喂表层涂有ＨａＮＰＶ人工饲料后９小时，即可在幼虫抽提液中检出病毒粒子抗原，而典型病虫显症需５～６天后才出现。因此本法是一种灵敏、快速、特异性强的检测昆虫杆状病毒的方法。利用单克隆抗体结合ＥＬＩＳＡ试验分别检测来自江苏和山东不同地区棉田自然死亡的棉铃虫幼虫，表明在江苏和山东不同棉区均可检测到ＨａＮＰＶ病毒粒子，但地区间棉铃虫核型多角体病毒检出频率有显著差异 相似文献
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利用已经制备的大豆疫霉菌的抗血清，对大豆疫霉菌的纯培养和大豆病组织进行检测。结果表明，间接法（Ｉ－ＥＬＩＳＡ）和夹心法（ＤＡＳ－ＥＬＳＩＡ）能较好地检测纯培养的大豆疫霉菌，但在检测病组织时，夹心ＥＩＳＡ的特异性较强，能够可靠地检测到大豆病组织内的病原菌。 相似文献
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为建立蓝莓样品中百菌清残留快速筛查方法，以农药百菌清为目标分析物，系统研究了胶体金标记参数及样品前处理方法对胶体金免疫层析方法 (colloidal gold immuno-chromatographic assay, GICA)的影响。结果表明：以25 nm的胶体金颗粒标记百菌清单克隆抗体作为检测探针，分别将包被原百菌清-BSA (1 mg/mL)和羊抗鼠IgG抗体(0.1 mg/mL)包被于硝酸纤维膜(NC膜)，形成检测线(T线)和质控线(C线)，组装成百菌清胶体金免疫层析检测试纸条。蓝莓样品经酸化乙腈提取，双蒸水(dd H2O)稀释后，应用该纸条对蓝莓中百菌清残留肉眼观察检出限(LOD)为0.1 mg/kg (T线完全消线)，可实现15 min内蓝莓中百菌清的定性与半定量分析，同时，试纸条对样品中4-羟基百菌清、五氯硝基苯、多菌灵和腐霉利的检测不存在交叉反应。蓝莓中百菌清添加回收试验的胶体金免疫层析检测试纸条测试结果与超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱仪(UPLC-MS/MS)方法的检测结果一致。这两种方法都可以成功地应用于蓝莓中百菌清的检测，胶体金免疫层析检测试纸条有助于现场检... 相似文献
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从木本植物分离的苹果褪绿叶斑病毒（ａｐｐｌｅｃｈｌｏｒｏｔｉｃｌｅａｆｓｐｏｔｖｉｒｕｓ，Ｔｒｉｃｈｏｖｉｒｕｓ组）的ＰＢＭ１毒株能引起李品种“Ｈａｕｓｚｗｅｔｓｈｅ”的假痘病，将其繁殖在昆诺藜（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍｑｕｉｎｏａ）上。感染ＰＢＭ１毒株的昆诺藜叶组织用两次蔗糖梯度离心提纯。每１００ｇ叶组织的病毒产量平均为１．６８ｍｇ。在电镜下可观察到弯曲状病毒颗粒上的螺纹结构。通过ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，病毒外壳蛋白的分子量为２１．５ｋＤａ。用提纯的病毒免疫家兔制备的抗血清和ＥＬＩＳＡ法，对感染ＰＢＭ１的昆诺藜叶片和桃花进行了灵敏的检测。 相似文献