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提高农杆菌介导番茄遗传转化效率的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
利用农杆菌介导法对番茄进行遗传转化,比较了不同的农杆菌种类、农杆菌侵染时间、外植体种类及番茄品种对农杆菌侵染效率的影响.转化后得到的再生植株,利用PCR、Southern杂交检测GUS基因是否整和进入基因组.结果表明:农杆菌介导法成功介导了GUS基因导入番茄.农杆菌EHA105侵染番茄的效率明显高于LBA4404,侵染时间3 min较好.子叶外植体的转化明显优于下胚轴,黄色串珠樱桃番茄的遗传转化效率高于中蔬5号;优化的转化条件可以使番茄获得较高的遗传转化效率. 相似文献
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根癌农杆菌介导的西瓜遗传转化研究 总被引：8，自引：1，他引：7
利用带有内含子的GUS基因的瞬时表达,研究影响根癌农杆菌介导的西瓜遗传转化的若干因素。结果表 明:西瓜子叶块外植体对潮霉素较为敏感,15 mg/L是适宜的筛选浓度,可明显抑制非转化组织的生长;脱菌过程中 采用500 mg/L的头孢霉素,对外植体生长影响较小;农杆菌菌株EHA105对西瓜子叶块的侵染能力较强;预培养有 利于转化;共培养3-4 d有利于提高转化频率并避免了农杆菌的过度生长;OD600值为0.3的菌液侵染10min效果最 佳;共培养培养基中添加乙酰丁香酮可提高转化频率。 相似文献
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《果树学报》2017,(7)
西瓜是我国重要的经济作物,其面积和产量居世界水果前列。由于西瓜资源的遗传背景相对狭窄,对于一些重要病害缺乏可利用的抗性材料,采用转基因手段有助于创制新种质。转基因技术是生物遗传改良和基因功能验证的重要方法,而组织培养和遗传转化是植物转基因成功与否的2个前提条件。西瓜遗传转化采用的方法有多种,而农杆菌介导法应用最广泛。大量的研究表明,西瓜是被公认比较难于转化的作物,目前为止转化效率低仍然是阻碍西瓜转基因的主要瓶颈。本文分析了西瓜组织培养的影响因素,如西瓜的种子贮存时间、基因型、苗龄、外植体类型、激素组合、培养条件;同时分析了农杆菌介导法影响西瓜遗传转化效率的主要因素,包括筛选标记基因、农杆菌菌株类型、预培养时间、农杆菌侵染时间和浓度、共培养时间;探讨了目前西瓜组织培养和遗传转化体系所存在的问题,提出了今后的研究方向。 相似文献
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匍匐小菊遗传转化过程中选择压力的确定 总被引：1，自引：0，他引：1
该试验以北京农科院生物中心新近培育的匍匐小菊品种"粉地毯"为材料,以叶片为外植体,建立"粉匍"的高效再生体系.试验共进行了6种不同培养基的筛选,研究了6-BA对于再生频率的影响,最终确立了6-BA的最佳浓度.在MS 6-BA(0.5 mg/L) NAA(0.1 mg/L)培养基上获得91%的再生率,在1/2 MS NAA(0.1 mg/L)培养基上诱导生根.在获得高效叶盘再生体系的基础上,又研究了植物遗传转化过程中常用的2种选择标记卡那霉素(Km)和除草剂(PPT)对菊花不定芽分化的影响.结果表明:大于8 mg/L的Km和大于0.4 mg/L 的PPT能够完全抑制试验材料的不定芽分化.试验最终确定了匍匐小菊对卡那霉素、草丁膦的适宜筛选浓度,分别为5 mg/L 和 0.2 mg/L,为以后进行匍匐小菊的基因工程工作奠定了基础. 相似文献
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通过PPT质量浓度的梯度试验,筛选出番茄子叶出愈、芽分化和再生植株生根的最适宜PPT浓度均为1.0 mg/L.pCPGO和pCBGO两个植物表达载体转化8个番茄自交系材料的试验结果表明,不同番茄自交系对这两种表达栽体的遗传转化效率存在较大的差异;相同的载体转化不同的番茄自交系,其遗传转化率也存在较大的差异;同一番茄品系,由于转化载体不同,遗传转化率也不同.pCPGO和pCBGO转化率最高的分别为Pr5 76.47%和Pr1 72.4%;而低的分别仅为Pr3 13.89%和Pr4 2.7%. 相似文献
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非洲菊组织培养中La3+的应用初探 总被引：4，自引：0，他引：4
以非洲菊‘Sunbird’品种的花托、幼叶、幼芽为外植体, 研究不同浓度La3+对愈伤组织形成、生长、幼芽分化增殖的影响。结果表明, 低浓度La3+对花托愈伤组织形成、生长及芽的分化有促进作用,最佳处理浓度为10 mg/L , 处理浓度大于10 mg/L 时抑制芽的分化, 并明显引起褐化。La3+对离体叶片愈伤组织形成生长的促进作用亦随处理浓度的提高而增大, 但愈伤组织的褐化率也增大, 最佳处理浓度为15 mg/L。幼芽的增殖系数在La3+ 0～50 mg/L 范围内随浓度的提高而增大, 50 mg/L 时最大, 达20. 8 , 但浓度大于30 mg/L 时增殖过程易出现玻璃化苗并引起叶畸形, 增殖的最佳浓度为30 mg/L。 相似文献
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余甘子下胚轴离体培养中的器官形成与植株再生(英文) 总被引：1，自引：0，他引：1
以余甘子(phyllanthusemblicaL.)下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导形成不定芽,探讨不同激素组合对下胚轴器官发生和植株再生的影响,以期建立有效的再生体系,为以后的遗传转化研究奠定基础。结果表明,在附加0.1μmol/LNAA、5μmol/LBA和30g/L蔗糖MS培养基上培养,5周后不定芽再生频率达87.5%,平均每个外植体再生芽数为9.7个,为最佳组合。将分化的不定芽转移至含有10μmol/LIBA的MS培养基上,5周后生根,发育成健康的植株,生根率在29.2%。 相似文献
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醉蝶花离体培养植株再生研究 总被引：5，自引：0，他引：5
诱导醉蝶花下胚轴和子叶形成愈伤组织, 以MS + 6-BA 0.5 mg/L + NAA 0.5 mg/L + KT 0.5 mg/L培养基中子叶的出愈率最高, 达到100 % , 下胚轴出愈率最高只有93 %。MS + 6-BA 2 mg/L + NAA 0.05 mg/L最适合于芽的诱导, 诱导率达到100 %。再生苗在MS + NAA 0.1 mg/L 培养基中生根完成植株再生。带单个侧芽的茎作为外植体接种在MS + 6-BA 1 mg/L + NAA 0.05 mg/L 培养基中, 一个月以后形成无数丛生芽。 相似文献
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袋鼠花的组织培养 总被引：8，自引：0，他引：8
对袋鼠花( Anigozanthos) 组织培养研究表明: 外植体消毒以0. 1 %升汞溶液浸泡, 7～8 min 为宜; 不同浓度激素对其愈伤组织形成、分化以及根的形成有不同的影响, 随着62BA 浓度的增加, 愈伤组织的诱导率有增加的趋势; 生长素与分裂素的比例决定着愈伤组织的分化; 小苗在1/ 2 MS 培养基上生根最好, 6-BA 对其生根有抑制作用。各培养阶段最适培养基: (1) 愈伤, MS + 6-BA 1 mg/L + NAA 0. 1 mg/L +3 %活性炭; (2) 芽诱导, MS + 6-BA 0. 5 mg/L + NAA 0. 5 mg/L ; (3) 生根, 1/ 2 MS + IBA 0. 2 mg/L。 相似文献
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以镜面草( Diels)叶部器官为研究对象,分别以叶片、叶柄作为外植体,研究不同激素种类及其浓度配比对镜面草愈伤组织诱导过程的影响.结果表明,镜面草的叶片和叶柄均可在2,4-D、NAA、6-BA的诱导下产生愈伤组织,但激素单独使用和不同种类不同浓度组合对镜面草愈伤组织的诱导效果不同:2,4-D单独使用且浓度为0.5 mg/L时,愈伤组织诱导率达到95%以上,NAA 1.0 mg/L虽也有相当的效果,但NAA浓度达到0.5 mg/L时,叶片和叶柄均会产生不定根;试验设计细胞分裂素6-BA分别与2,4-D和NAA不同浓度组合处理叶片、叶柄,诱导愈伤组织产生的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L. 相似文献