共查询到19条相似文献，搜索用时 204 毫秒
1.
犬卵母细胞体外成熟的影响因素 总被引：8，自引：0，他引：8
采集发情期和间情期犬卵巢,回收大腔（直径大于１ｍｍ）卵泡和不可见卵泡的卵母细胞,在４种成熟液（ＴＣＭ１９９＋２０％ＦＣＳ,ＴＣＭ１９９＋２０％ＦＣＳ＋１０ＩＵ／ｍＬＦＳＨ,ＴＣＭ１９９＋２０％ＥＤＳ和ＴＣＭ１９９＋２０％ＥＤＳ＋１０ＩＵ／ｍＬＦＳＨ）中成熟后进行了受精试验。结果：（１）发情期大于２ｍｍ和１～２ｍｍ的大腔卵泡卵母细胞的体外成熟率（４２．５％,３２．５％）显著高于间情期卵母细胞（２０．４％）,但发情犬不可见卵泡卵母细胞的体外成熟率（２８．９％）与间情期卵母细胞差异不显著;（２）在成熟液中添加促性腺激素,能有效地提高卵母细胞成熟率,不可见卵泡的卵母细胞对促性腺激素的依赖性（３０．０％比７．８％）大于大腔卵泡的卵母细胞（４２．５％比２９．０％）;（３）卵丘扩散与卵母细胞成熟存在相关性;（４）ＥＤＳ可诱导卵丘扩散,但不能有效提高卵母细胞的成熟率;（５）发情期卵巢上的大腔卵泡和不可见卵泡的卵母细胞以及间情期卵巢不可见卵泡的卵母细胞体外培养后,与体外获能的精子进行体外受精,其卵裂率分别为１６．０％（４／２５）,０％（０／４０）和２．５％（１／４０）。 相似文献
2.
山羊卵泡母细胞体外受精及受精卵的体外发育 总被引：3，自引：0，他引：3
对山羊卵泡卵母细胞的体外成熟,体外及受精卵体外培养的系列研究表明、在成熟培养液中添加１５μｇ／Ｌ,重组牛生长激素,与ＦＳ睡ＬＨ配合使用,卵泡卵母细胞的成熟率（６７．９％）显著高于不含ｒｂＧＨ的培养组;３８．５℃和３９．０℃的培养温度以 卵母细胞体外成熟培养的影响无显著差异;ＢＯ液上浮法对山羊冷冻精子的活精子分离效果优于Ｐｅｒｃｏｌｌ分层液法,并得到较高的受精率;颗粒细胞单层和输卵管上皮细胞单层扔共 相似文献
3.
山羊卵泡卵母细胞体外受精及受精卵的体外发育 总被引：9，自引：0，他引：9
对山羊卵泡卵母细胞的体外成熟、体外受精及受精卵体外培养的系列研究表明,在成熟培养液中添加１５μｇ／Ｌ重组牛生长激素（ｒｂＧＨ）,与ＦＳＨ和ＬＨ配合使用,卵泡卵母细胞的成熟率（６７．９％）显著高于不含ｒｂＧＨ的培养组（５３．１％,Ｐ＜０．０５）;３８．５℃和３９．０℃的培养温度对卵泡卵母细胞体外成熟培养的影响无显著差异（Ｐ＞０．０５）;ＢＯ液上浮法对山羊冷冻精子的活精子分离效果优于Ｐｅｒｃｏｌ分层液法,并得到较高的受精率（６４．３％∶４９．０％,Ｐ＜０．０５）;颗粒细胞单层和输卵管上皮细胞单层的共同培养体系均有益于受精卵的体外发育。 相似文献
4.
BFF,rbGH对牛卵泡卵母细胞体外受精后发育的影响 总被引：12，自引：3，他引：9
利用屠宰黄牛卵巢，对２～５ｍｍ卵泡卵母细胞的体外成熟（ＩＶＭ）、体外受精（ＩＶＦ）、受精卵的体外培养（ＩＶＣ）进行了系列研究。结果表明，在成熟培养液中单独添加１０％Ｄ０ＥＣＳ（发情当天牛血清）获得了卵泡卵母细胞受精后较高的卵裂率（６４．７％）、桑椹胚发育率（３９．９％）和囊胚发育率（２４．８％），说明在成熟培养液中单独添加Ｄ０ＥＣＳ是可行的；在含１０％Ｄ０ＥＣＳ的成熟培养液中再添加１０％或２０％ＢＦＦ（牛卵泡液），均能提高受精卵的卵裂率以及桑椹胚和囊胚的发育率，以添加２０％ＢＦＦ效果较好，其囊胚发育率（３５．０％）显著高于对照组（２４．８％，Ｐ＜０．０５）；在卵泡卵母细胞成熟培养系统和受精卵共同培养系统中添加１０μｇ／Ｌ重组牛生长因子（ｒｂＧＨ），虽对体外受精卵的卵裂率无显著影响（Ｐ＞０．０５），但能显著提高卵裂胚的囊胚发育率（Ｐ＜０．０５） 相似文献
5.
超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟和体外受精的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
以ＴＣＭ１９９＋１０ｍｍｏｌ／ＬＨＥＰＥＳ＋青霉素（６ｍｇ／Ｌ）＋链霉素（５ｍｇ／Ｌ）为基础培养液（ＢＭ），再分别加入不同成分，配成５种卵母细胞成熟液：（Ａ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ；（Ｂ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ（２．５ｍｇ／Ｌ）；（Ｃ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２（１ｍｇ／Ｌ）；（Ｄ）ＢＭ＋１０％ＦＣＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２；（Ｅ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２＋颗粒细胞（１．５×１０６～３．０×１０６个／ｍＬ）。在３８．５℃、５％ＣＯ２下培养２６ｈ，排卵后第１天卵巢卵母细胞体外成熟率分别为６７．６７％（２０／３０），６０．４２％（２９／４８），８３．６７％（４１／４９）和８０．８２％（５９／７３），排卵后第５天卵巢卵母细胞，在培液Ｄ中体外成熟率为７１．４３％（４５／６３）。排卵后第１天的９８枚卵巢卵母细胞，体外成熟体外受精卵裂率为２１．４３％，２１枚２细胞胚移植５头受体获２头羔羊。研究表明，超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟卵母细胞，并可通过体外受精获得试管山羊 相似文献
6.
用取自 ３～５ ｍ ｍ 卵泡的处于减数分裂阻抑状态的猪卵丘卵母细胞复合体（ｐ Ｃ Ｅ Ｏ），培养 ４８ ｈ，用 Ｆ Ｓ Ｈ（１００ Ｉ Ｕ／ Ｌ）或 ｈ Ｃ Ｇ（０、５０、１００、２００、５００ Ｉ Ｕ／ Ｌ）刺激 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 分泌甾体激素；用放射受体测定法（ Ｒ Ｒ Ａ）比较 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 的卵丘细胞及壁层颗粒细胞（ Ｍ Ｇ Ｃ）上促黄体激素受体／人绒毛膜促性腺激素受体（ Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ）的数量； Ａ Ｍ ｅ Ｘ 石蜡切片、免疫组织化学染色，检测 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 在 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 以及 Ｍ Ｇ Ｃ 的分布情况。在 Ｆ Ｓ Ｈ 作用下，ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 分泌的孕酮明显高于 ｈ Ｃ Ｇ 作用组和对照组 （ Ｐ ＜ ００５）； 平均每个壁层颗粒细胞上的 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ是每个卵丘细胞的 １０５ 倍； Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 在基膜两侧分布较多，且卵母细胞上没有 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ，临近卵母细胞的卵丘细胞膜上较少被染色。以上结果表明，在体外试验中，可能由于 Ｃ Ｅ Ｏ 上 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 的数量不足或生理活性降低， Ｌ Ｈ／ｈ Ｃ Ｇ 不能促进卵母细胞恢复减数分裂。 相似文献
7.
生长因子对山羊无腔卵泡卵母细胞体外生长的影响 总被引：10，自引：0，他引：10
山羊无腔卵泡卵母细胞在胰岛素样生长因子I（IGF－I）和表皮生长因子（EGF）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)单独或联合存在时，与FSH－道体外培养9d，结果表明，IGF－I（100ng/mL)能有效地维持卵泡卵母细胞的存活并促进其生长，存活率达75.00％，相对生长率达45.06％；EGF（50ng/mL)能提高卵泡卵母细胞的体外存活率，类似于IGF－I，但对其生长相对表现出抑制影响；bFGF(50ng/mL)对卵泡卵母细胞的体外存活具有促进作用，但对卵母细胞生长的促进作用不明显（卵母细胞的存活率为76.92%,相对生长率为31.55％）。IGF－I（100ng/mL)和EGF（50ng/mL)联合存在时，不论是对卵泡卵母细胞的存活，还是对生长均产生了最好的效果，卵母细胞存活率达到90.91％，相对生长达48.24％。本试验结果一个共同点是在FSH存在的情况下，这3种生长因子单独或有选择的联合，对山羊卵泡卵母细胞的体外存活能力均具有正向调节作用。 相似文献
8.
牛Y染色体特异DNA序列的体外扩增 总被引：3，自引：0，他引：3
本试验建立了用聚合酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）体外扩增牛Ｙ染色体特异ＤＮＡ序列的方法。在牛、山羊和绵羊Ｙ染色体特异ＤＮＡ同源序列高度保守区设计一对引物，两条引物均为２０ＮＴ，对公牛Ｙ染色体特异的３０７ｂｐ序列进行体外扩增。从屠宰的成年公牛、母牛肝提取ＤＮＡ，用作ＰＣＲ扩增的模板。ＰＣＲ反应总体积为５０μＬ，各成分含量为：２５ｍｍｏ１／ＬＴｒｉｓ－ＨＣＩ（ｐＨ８．２），２５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４、２ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２、０．１ｍｇ／ｍＬｇｅｌａｔｉｎ、５％Ｆｏｒｍａｍｉｄｅ、ｌμｇ模板、引物各为２５ｐｍｏｌ、ｄＮＴＰ各为２００μｍｏｌ／Ｌ、ＤＮＡ聚合酶２ＩＵ。反应在微机控制ＰＣＲ仪上进行，采用９２．５℃变性，５５℃退火，７２℃延伸，共３５个循环。扩增产物在２％琼脂糖凝胶上电泳，用ｐＧＥＭ－７ｚｆ（＋）Ｈａｅ Ⅲ作分子量标准。电泳结果，公牛个体样品显示清晰可见的特异ＤＮＡ扩增带，而母牛个体样品无扩增片段出现。扩增产物用ＰｓｔⅠ酶解后出现３条区带，与预期结果一致。 相似文献
9.
猪核移植重组胚胎的发育能力 总被引：1，自引：0，他引：1
以ＭｃＧｒａｔｈ－Ｓｏｌｔｅｒ（１９８３）提供的去（注）核方法，将猪胚胎的单个卵裂球细胞注入去核的次级成熟卵母细胞，借助电融合的方法（ＡＣ；５Ｖ，１．５ＭＨｚ，１２－１５ｓ；ＤＣ：２ｋＶ／ｃｍ，４０μｓ。电激活／融合液：０．３ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋－．１ｍｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４＋０．１ｍｍｏｌＣａｃＬ２＋７．５ｍｇ／ｍｌＣＣＢ）融入受体胞质构成重级胚，体外培养（培养液为改衣ＴＣＭ－１９９；培养条件为５％ 相似文献
10.
将出生后５０～７０日龄的羔山羊，经超数排卵处理后，从卵泡中抽取卵母细胞，取外观形态正常的卵母细胞分成五组，在含有１０％胚牛血清（ＦＣＳ）的ＴＣＭ－１９９培养液中分别经１２、１６、１８、２０和２４ｈ的体外成熟培养后进行体外受精，探索不同体外成熟培养时间对体外受精及卵裂率的影响，另外，在成熟用培养基内还分别添加了发情母羊血清（ＥＮＧＳ）和ＦＣＳ以观察其次培养效果，结果表明，经过１２～２４ｈ体外成熟培养 相似文献
11.
试验旨在研究不同种类、不同浓度的糖对牦牛卵母细胞体外成熟和发育能力的影响,进一步探索和优化牦牛卵母细胞培养体系,提高卵母细胞体外成熟和胚胎生产效率。在牦牛卵母细胞成熟液中添加不同浓度（0、5和10 mmol/L）的葡萄糖或蔗糖,培养24 h或预培养2 h后移入无糖培养基中继续培养22 h,统计卵母细胞体外成熟率及体外受精（IVF）后的胚胎卵裂率和囊胚率。结果显示,与对照组（0 mmol/L）相比,5和10 mmol/L葡萄糖组牦牛卵母细胞核成熟率和体外受精胚胎卵裂率均显著提高（P<0.05）,10 mmol/L葡萄糖组的囊胚率最高,且与对照组相比差异显著（P<0.05）。添加10 mmol/L蔗糖可以显著提高牦牛卵母细胞核成熟率（P<0.05）,但胚胎囊胚率与对照组相比差异不显著（P>0.05）。此外,用10 mmol/L葡萄糖预处理牦牛卵母细胞后其核成熟率、胚胎卵裂率和囊胚率最高,且均显著高于对照组（P<0.05）。由此可见,糖对牦牛卵母细胞体外成熟和发育有一定的影响,在成熟过程中添加适当浓度的糖能提高卵母细胞成熟率及体外受精胚胎发育能力。 相似文献
12.
SHI Xian XIONG Xian-rong LAN Dao-liang HU Jia-jia CAI Wen-yi ZHANG Da-wei LI Jian 《中国畜牧兽医》2017,44(1):155-160
This study was designed to investigate the effect of different types and different concentrations of sugar on in vitro maturation(IVM) and developmental competence of yak oocytes, for being further research and optimization culture system of yak oocytes for efficient maturity yak oocytes and productivity of embryos. Immature yak oocytes were matured in vitro on culture medium with different concentrations (0,5 and 10 mmol/L) of glucose and sucrose in incubator for 24 h or 2 h pretreament with sugar and 22 h without sugar. Subsequently, then the maturation of oocytes,the cleavage rates and blastocyst formation rates after in vitro fertilization(IVF) were evaluated. The results showed that a medium with 5 and 10 mmol/L glucose IVM could significantly increase the yak oocytes maturation and cleavage (P<0.05), and the highest blastocyst formation rates in 10 mmol/L glucose group was significantly higher than 0 mmol/L glucose (P<0.05).10 mmol/L sucrose could increase significantly the nucleus maturation rates (P<0.05),and there was no significant difference of the blastocyst formation rates after IVF between 0 and 10 mmol/L sucrose (P>0.05). Furthermore, the nucleus maturation rates,IVF cleavage rates and blastocyst formation rates of yak oocytes which pretreated with 10 mmol/L glucose were the highest in these groups, and were higher than 0 mmol/L glucose (P<0.05). It manifested that the appropriate concentration of sugar could improve the quality of yak oocytes and embryos in vitro developmental competence, so it influenced in vitro development of yak oocytes indirectly. 相似文献
13.
本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料,采用抽吸法收集不同直径卵泡卵母细胞,研究卵泡直径对卵母细胞回收效果和体外成熟、体外受精的影响。结果表明,卵泡直径直接影响卵母细胞的回收效果及随后的体外成熟、体外受精;卵母细胞的回收率和可用卵的比率及成熟率与卵泡直径呈正相关;直径2.1～5 mm卵泡的卵母细胞由于处于生长旺盛期,受精率和卵裂率分别为59.15%和42.50%,显著高于直径5 mm卵泡和≤2 mm卵泡,适合体外胚胎的生产,而直径≤2 mm卵泡的卵母细胞因未发育充分体外发育潜能最差;直径5 mm卵泡的卵母细胞可能因体外培养成熟过度而老化导致受精率和卵裂率降低,缩短其体外成熟时间可能会提高其体外发育潜能。 相似文献
14.
山羊卵巢无腔卵泡的体外发育 总被引：4，自引：0，他引：4
在三维琼脂凝胶培养体系中 ,山羊无腔卵泡的生长模式类似于体内。在一定培养时间内能善为保持其完整的立体结构和形态。原始卵泡能在体外启动 ,并得到一定程度的生长。初级卵泡能发育为次级卵泡 ,次级卵泡发育为有腔卵泡。卵泡在体外发育过程中 ,表现出了明显的优势化。本试验首次初步揭示了山羊无腔卵泡的体外发育基本过程和规律。 相似文献
15.
培养介质、卵丘细胞和卵泡直径对猪卵母细胞体外成熟的影响 总被引：29，自引：0，他引：29
A类卵母细胞在mTCM 199、NCSU2 3和NCSU37体系中培养 4 4～ 5 2小时后 ,成熟率分别为 76 .1%、78.1%和 6 5 .2 %。前两者差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,但显著高于后者 (P <0 .0 5 )。卵母细胞在添加eCG和hCG的NCSU2 3体系中的成熟率 (75 .6 % )明显高于添加FSH的LH和成熟率 (6 5 .2 % ) (P <0 .0 5 )。A、B、C三类卵母细胞在NCSU2 3的成熟率分别为 73.3%、6 0 .4 %和 11.0 % ,三者间差异显著 (P <0 .0 5 )。大 (ф >6mm)、中 (ф =3～ 6mm)和小 (ф <3mm)三种卵泡中的卵母细胞在NCSU2 3中培养后 ,成熟率分别为 5 6 .2 % ,78.1%和 5 1.9% ,中等卵泡中卵母胞的体外成熟率显著高于其他两组 (P <0 .0 5 )。 相似文献
16.
试验旨在研究不同卵母细胞收集方法及添加半胱氨酸、肝素钠对黄牛卵母细胞体外成熟及体外受精的影响。以黄牛为研究对象,采用两种方法（抽卵法和割卵法）抽取卵泡中的卵母细胞,比较两种方法获取的卵母细胞成熟率,结果发现,抽卵法获得的卵母细胞成熟率显著高于割卵法（P<0.05）。将获取的卵母细胞分为4组：A组（对照组,只添加基础成熟培养液）、B组（基础成熟培养液+200 μmol/L半胱氨酸）、C组（基础成熟培养液+20 μg/mL肝素钠）、D组（基础成熟培养液+200 μmol/L半胱氨酸+20 μg/mL肝素钠）,结果发现,D组的卵母细胞成熟率显著高于A、B、C组（P<0.05）,B、C组间卵母细胞成熟率无显著差异（P>0.05）,但两组卵母细胞成熟率均显著高于A组（P<0.05）;A组卵母细胞卵裂率均显著低于B、C、D组（P<0.05）,B、C、D组间卵母细胞卵裂率无显著差异（P>0.05）;D组囊胚率显著高于其他3组（P<0.05）。结果表明,抽卵法获得卵母细胞效率显著高于割卵法,肝素钠及半胱氨酸对黄牛卵母细胞体外成熟和体外受精都有促进作用,且同时添加两种物质对体外成熟的效果更佳。 相似文献
17.
18.
裸卵的体外培养对于动物繁殖和人类辅助生殖具有重要的意义。实验研究成熟培养基中维生素C和维生素E的添加对猪裸卵(denuded oocytes,DOs)体外发育能力的影响。将维生素C以0、50、100、250、500μmol/L和750μmol/L的浓度,维生素E以0、10、20、50、100μmol/L和250μmol/L的浓度加入成熟液中,比较猪DOs的体外成熟率、孤雌激活后的卵裂率和囊胚发育率。结果表明:维生素C促进猪DOs的体外成熟和囊胚发育;维生素E对猪DOs的成熟率无影响,增加了囊胚率。综上所述,维生素C和维生素E可提高猪DOs的体外发育能力。 相似文献
19.
为了通过比较培养筛选出能改进和提高山羊卵母细胞体外成熟效率的培养体系 ,培养的山羊卵母细胞以 TCM-199为基础培养液 ,添加 :(1) 10 %血清 (胎牛血清 (FBS)或发情山羊血清 (EGS) ) 2 0 m g/ L促黄体素 (L H) 10 mg/ L促卵泡素 (FSH) 1m g/ L 雌二醇 (E2 ) ;(2 ) 10 % EGS 促性腺素 (L H∶ FSH=5 mg/ L∶ 0 .5 m g/ L 或 2 0 mg/ L∶ 10mg/ L )或者 0 .0 75 IU / m L人绝经期促性腺素 (HMG) 1mg/ L estradiol 17β;(3) 10 % EGS 0 .0 75 mg/ L HMG 10～ 2 0 μg/ L EGF。此外 ,以 M199 10 % EGS 0 .0 75 mg/ L HMG 10～ 2 0 μg/ L EGF为培养基 ,溶解于自制超纯水或储存的商品化超纯水来培养卵母细胞。培养条件为 38℃ ,5 % CO2 。培养 2 4 h后 ,在体式显微镜下统计处于 M 期的卵母细胞比例。结果显示 :在卵母细胞成熟液中添加 10 % EGS比 10 % FBS的成熟培养效果好 ;添加 HMG能够促进卵母细胞的成熟 ,其效果比添加不同比例的 L H/ FSH好 ;成熟液中添加 10～ 2 0μg/ L EGF能促进卵母细胞的成熟 ,但成熟率没有明显提高 ;新鲜的超纯水对于卵母细胞的培养是必要的。结论 :新鲜超纯水配制的 M199 10 % EGS 0 .0 75 IU / m L HMG 10～ 2 0μg/ L EGF培养液可以获得最佳卵母细胞培养效果 相似文献