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1.
将“K8 8”、“K99”、“987P”和“F41”大肠杆菌接种于产蛋母鸡获得多价高免卵黄抗体 ,与有效中药提取物和保护剂按一定比例混合 ,瞬间喷雾干燥制备的复合多价卵黄抗体干粉其抗体效价维持不变。新生仔猪攻毒及治疗试验结果表明 ,大肠杆菌性腹泻发病仔猪口服复合多价卵黄抗体干粉制剂的治愈率明显高于硫酸庆大霉素治疗的治愈率 ;临床预防试验结果表明 ,新生仔猪口服复合多价卵黄抗体干粉制剂对其大肠杆菌性腹泻的预防效果显著高于疫苗 ,表明该制剂是安全有效的抗新生仔猪大肠杆菌性腹泻的新型生物制剂 相似文献
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为比较不同剂量非甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)免疫佐剂与J亚群禽白血病病毒(Subgroup J Avian leukosis virus,ALV-J)gp85重组蛋白联合免疫后诱导母鸡血清抗体和母源抗体的效果,利用原核表达系统制备包含gp85基因的重组蛋白作为免疫原,与不同剂量CpG免疫佐剂联合接种成年海兰褐父母代种母鸡(Gallus domesticus),首免后2周加强免疫一次,于接种前和接种后每周动态检测血清抗体,接种后部分鸡只每周收集种蛋,检测卵黄抗体。结果显示,利用原核表达系统制备的gp85重组蛋白能与ALV-J单克隆抗体JE9特异性结合;与3个不同剂量CpG联合免疫成年种母鸡后均诱导鸡只产生一定效价的血清抗体,首免后28 d效价最高;所诱导的卵黄抗体效价首免后第4周最高。其中以50μg/羽剂量的CpG联合重组蛋白接种鸡只诱导的血清抗体和卵黄抗体效价和阳性比例最佳,100μg/羽剂量的CpG次之。3个不同剂量的CpG与ALV-J gp85重组蛋白联合免疫均能诱导母鸡产生一定的血清抗体和卵黄抗体,50μg/羽剂量的CpG联合免疫的效果明显优于较高剂量的免疫效果。本研究为使用CpG联合ALV-J gp85重组蛋白诱导母鸡产生母源抗体,阻断ALV-J早期感染提供科学依据。 相似文献
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乙醇溶剂与超临界CO2相结合提取高纯度卵黄磷脂的研究 总被引：6，自引：0，他引：6
采用乙醇溶剂首先提取蛋黄粉中的卵黄油，然后用超临界CO2萃取方法脱除卵黄油中的中性脂肪，获得高纯度的卵黄磷脂。考察了工艺参数对提取效果的影响。试验表明：在乙醇溶剂提取卵黄油阶段，乙醇浓度是影响卵黄油提取率的最主要因素，温度是影响卵黄磷脂提取率的最主要因素；在超临界CO2萃取阶段，磷脂的溶解度随萃取温度的升高而降低，中性脂质在55℃时溶解度最大。采用此工艺，卵黄磷脂得率为17.66%，纯度94.41%，且不含胆固醇。 相似文献
4.
过多的脂肪沉积影响肉的品质。(110±10)g雌性(♀)SD大鼠(Rattus norvegicus)150只,随机分成5组,分别在基础日粮中添加0、75、500、1000和6000mg/kg含脂肪细胞膜卵黄抗体的阳性卵黄粉。75d屠宰,采集血样、肠系膜脂、子宫周脂、肾脂肪囊和下丘脑。放射免疫法测定血清Insulin和Leptin浓度。用RT-PCR方法,以18S rRNA作内标分析不同部位脂肪组织中Leptin、Bcl-2和Bax mRNA和下丘脑Ob基因b型受体(Ob-Rb)mRNA表达,并测定各部位脂肪组织DNA和RNA含量。结果显示,卵黄抗体处理可降低大鼠腹腔内总脂重和腹腔内总脂指数,其中75和6000mg/kg阳性卵黄粉组效果明显,但对体重、摄食量和腓肠肌重无显著影响。6000mg/kg阳性卵黄粉组可降低血清甘油三酯,升高血清游离脂肪酸;降低子宫周脂和肾脂肪囊DNA含量和总量。75mg/kg阳性卵黄粉组可降低子宫周脂和肾脂肪囊DNA总量;两剂量组均可降低血清胰岛素、子宫周脂和肾脂肪囊Leptin mRNA表达,上调下丘脑Ob-Rb mRNA表达;降低子宫周脂Bcl-2mRNA和Bax mRNA表达,... 相似文献
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乙醇溶剂与超临界CO_2相结合提取高纯度卵黄磷脂的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
采用乙醇溶剂首先提取蛋黄粉中的卵黄油 ,然后用超临界 CO2 萃取方法脱除卵黄油中的中性脂肪 ,获得高纯度的卵黄磷脂。考察了工艺参数对提取效果的影响。试验表明 :在乙醇溶剂提取卵黄油阶段 ,乙醇浓度是影响卵黄油提取率的最主要因素 ,温度是影响卵黄磷脂提取率的最主要因素 ;在超临界 CO2 萃取阶段 ,磷脂的溶解度随萃取温度的升高而降低 ,中性脂质在 5 5℃时溶解度最大。采用此工艺 ,卵黄磷脂得率为 17.6 6 % ,纯度 94.41% ,且不含胆固醇。 相似文献
6.
棉铃虫法胱氨酸蛋白酶底物特异性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了研究棉铃虫（Helicoverpa armigera）半胱氨酸蛋白酶的底物专一性，进一步阐明该蛋白酶的性质和应用前景，从棉铃虫卵巢中 化了该蛋白酶，用电泳方法检测了该蛋白酶对牛血红蛋白（Hb）、牛血清蛋白（BSA）、卵黄磷蛋白（Vn）、明胶（gelatin）等4种动物蛋白，及大事产、玉米、马铃薯、豇豆、向阳花种子及棉籽蛋白等6种植物蛋白的水解作用，结果显示该酶对4种埃6种植物蛋白都有明显水解活性。用吸光度测定法测定了棉铃虫半胱氨酸蛋白酶对牛血红蛋白，牛血清蛋白、卵磷蛋白、明胶等4种底物的米氏常数（Km）值。结果显示棉铃虫半胱氨酸蛋白酶对牛血红蛋白和卵磷蛋白的水解产物的吸光度值较高，而对牛血清蛋白和明胶的水解产物的吸光度值较低。 测得该蛋白酶对牛血红蛋白、牛血清蛋白的水解产物的吸光度值较高，而对牛血清蛋白和明胶的水解产物的吸光度值较低。测得该蛋白酶对牛血红蛋白、牛血清蛋白、卵黄磷蛋白、明胶的Km值分别为10、0.91、0.08μmol/L和250mg/L，其中对卵黄磷蛋白的Km值最小，说明棉铃虫半胱氨酸蛋白酶与卵黄磷蛋白的亲和力量大，即卵黄磷蛋白是棉铃虫半胱氨酸蛋白酶的最适底物，同时用电泳方法检测了该蛋白酶对粗提的棉铃虫卵黄磷蛋白的水解作用，结果显示该酶对其有明显水解活性，由此推测该酶可能参与棉铃虫胚胎发育中卵磷蛋白的水解。 相似文献
7.
水牛免疫奶的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以人用的疫苗强化免疫奶水牛和奶牛之后，分泌的免疫乳中，甲肝抗体的相对活性效价峰值维持了1周。峰值期的最大相对活性效价值在1．7左右，甲抗的相对活性效价在完成全程免疫之后。除峰值期外，维持在一个较低的水平。相对活性效价在1．2～1．5之问变动。霍乱孤菌抗体、伤寒杆菌抗体、痢疾杆菌抗体在乳汁中出现的时间要比甲抗出现的时间迟，且维持的时间很短。霍乱孤菌抗体和伤寒杆菌抗体在乳汁中能维持5周左右，痢疾杆菌抗体在乳汁中维持的时间为l周。以奶水牛免疫乳的抗体提取物进行抑菌试验，免疫乳中的抗体表现出较强的抑菌效果。当提取物中的免疫球蛋白(Ig)以终浓度为1．0mg／mL加入到霍乱孤菌和伤寒杆菌的培养液中时，能有效地抑制霍乱孤菌和伤寒杆菌的生长。 相似文献
8.
用羊抗兔抗体进行抗体连接到细菌磁小体(BMPs)实验，以探讨结合条件对抗体连接效率(以每毫克BMPs上连接抗体的微克数表示，单位为μg/mg)的影响。实验表明，冷冻干燥后的BMPs的抗体连接效率降低36%~55%；在液氮中(-196 ℃)预处理的抗体连接效率显著高于在-70 ℃和-20 ℃预处理的。室温(15 ℃)下反应18 h的抗体连接效率最高，为64.06 μg/mg，明显高于其它温度和连接时间的。反应体系中，BMPs用量由5 mg降到0.1 mg，抗体用量由10 μg增加到300 μg时，抗体连接效率逐渐上升，当BMPs用量为0.1 mg，抗体用量为300 μg时，抗体连接效率达762.37 μg/mg。PBS、HEPES、Tris-HCl、MOPS、VBS以及磷酸盐等溶液可用于抗体连接到BMPs体系中，在通常使用的缓冲液pH和浓度下，几种溶液的抗体连接效率变化范围为46.28±0.58 ~ 90.83±1.64 μg/mg；并且不同的溶液有相应的使抗体连接效率达到最高时的pH和溶液浓度，当HEPES的pH为3.5，浓度为20 mmol / L；Na3PO4的pH为5.6，浓度为5 mmol / L时，抗体连接效率分别为108.01和76.78 μg/mg。对连接到BMPs上的抗体进行SDS-PAGE定性检测结果表明，抗体连接到了BMPs的膜上。 相似文献
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带精浆直接稀释法探讨猪精液低温(4℃)保存的可行性 总被引：1，自引：0，他引：1
为研制更为简易、高效的保存稀释液配方及操作程序,探讨4℃条件下稀释保存猪精液的可行性,本实验首次采用带精浆直接稀释法对猪精液的低温保存技术进行了研究.结果表明,在4℃条件下,用Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖)和Ⅳ液(葡萄糖-卵黄-乳糖)保存猪精液,精子的存活时间和活率分别为144 h、0.517和132 h、0.510,而Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)和Ⅲ液(葡萄糖-卵黄-乳糖-柠檬酸钠)精子活率保持0.5以上不到24 h.随着保存时间的延长,四种稀释液中保存的精子活率和顶体完整率均逐步下降,其中Ⅱ液和Ⅳ液均分别在48 h和24 h内下降较快,以后则呈缓慢下降趋势.综上所述,在低温条件下,采用Ⅱ液和Ⅳ液稀释保存猪精液,其精子活率能分别在144 h和132 h内保持0.5以上;所研制配方(Ⅱ液和Ⅳ液)组分简单、配制方便;采用带精浆直接稀释法低温保存猪精液可行,且操作程序简易. 相似文献
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为研制更为简易、高效的保存稀释液配方及操作程序,探讨4°C条件下稀释保存猪精液的可行性,本实验首次采用带精浆直接稀释法对猪精液的低温保存技术进行了研究。结果表明,在4°C条件下,用Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖)和Ⅳ液(葡萄糖-卵黄-乳糖)保存猪精液,精子的存活时间和活率分别为144 h、0.517和132 h、0.510,而Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)和Ⅲ液(葡萄糖-卵黄-乳糖-柠檬酸钠)精子活率保持0.5以上不到24 h。随着保存时间的延长,四种稀释液中保存的精子活率和顶体完整率均逐步下降,其中Ⅱ液和Ⅳ液均分别在48 h和24 h内下降较快,以后则呈缓慢下降趋势。综上所述,在低温条件下,采用Ⅱ液和Ⅳ液稀释保存猪精液,其精子活率能分别在144 h和132 h内保持0.5以上;所研制配方(Ⅱ液和Ⅳ液)组分简单、配制方便;采用带精浆直接稀释法低温保存猪精液可行,且操作程序简易。 相似文献
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外源基因导入鸡胚的两种显微注射方法的比较 总被引：1，自引：0，他引：1
胚盘下腔显微注射和卵黄囊血管显微注射是向鸡胚中导入基因等外源物质的常用方法.本研究从实验操作难度、外源基因导入效果、对鸡胚存活率的影响等方面比较了这两种方法的优缺点.实验结果表明,胚盘下腔显微注射操作较简单,在鸡胚发育的不同日龄直至出雏后都可以检测到非整合的外源基因的存在,经胚盘下腔显微注射的鸡胚的存活率为9.5%;卵黄囊血管显微注射操作难度大,在不同日龄及出雏鸡只中也可以检测到外源基因的存在,外源质粒仍以游离状态存在,并未与宿主基因组发生整合,经卵黄囊血管注射的鸡胚的存活率为35.7%.两者各有利弊,研究中应根据实验目的、导入外源物质的作用时间、样本量的多少选择适当的注射方法. 相似文献
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家蚕蛹表达乙肝表面抗原中蛋白免疫原性的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
将含有HBV （adr)的表面抗原中蛋白基因的重组病毒BmPAK-HBV感染家蚕（Bombyx mori)蛹，ELISDA和Western blotting分析表明，家蚕蛹表达产物具有较高的HBsAg抗原性，并能检测到PreS2抗原性。将重组组病感染蛹表达的乙肝表面抗原中蛋白对SD鼠进行注射免疫和口服免疫，注射免疫后的鼠体的内能产生较好的特异性抗－HBs抗体和抗－PreS2 抗体；口服免疫实验表明，连续添食6周后，约40％的鼠体内产生了免疫应答反应，在抗体转阳的鼠体内能同时检测到抗－HBs和抗PreS2抗体。 相似文献
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利用免疫鸡的蛋黄制备了普通小麦高分子量谷蛋白１Ｄｘ５和１Ｂｘ１７＋１Ｂｙ１８亚基的多克隆抗体，结果表明：鸡对抗原的免疫耐性较强，３０￣２４０μｇ抗原／只鸡都能产生较高效价的抗体，蛋黄中抗体效价略高于抗血清，两者的动态变化规律基本相同，但前者要晚７天左右。利用硫酸葡聚糖能有效地纯化蛋黄抗体。 相似文献
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鸡γ干扰素对H5亚型禽流感疫苗的免疫增强作用 总被引：6，自引：0，他引：6
利用表达鸡γ干扰素的重组鸡痘病毒(rFPV-IFN-γ)与表达H5亚型禽流感病毒血凝素基因的重组鸡痘病毒(rFPV-HA)或灭活疫苗联合应用，接种SPE鸡、无母源抗体商品鸡和含有母源抗体商品鸡，研究鸡γ干扰素的免疫增强作用。结果发现，rFPV-IFN-γ和rFPV-HA联合应用诱导的HI抗体应答水平同rFPV-HA单独免疫相近；rFPV-IFN-γ和灭活疫苗联合应用后HI抗体应答水平略低于灭活疫苗单独免疫组。攻毒后，对于SPF鸡和无母源抗体商品鸡，rFPV-IFN-γ与rFPV-HA或灭活疫苗联合免疫诱导的保护率同相应疫苗单独免疫相当，均为95％～100％；对含有母源抗体的商品鸡，10^6PFU的rFPV-HA与10^5PFU的rFPV-IFN-γ联合免疫组保护率(33．5％)高于rFPV-HA单独免疫组(11．4％～16．8％)，而其它剂量组合的rFPV-HA与rFPV-IFN-γ联合应用不能提高免疫保护效力；rFPV-IFN-γ与灭活疫苗联合免疫含母源抗体商品鸡诱导的保护率同灭活疫苗单独免疫组相近。结果表明，rFPV-IFN-γ不能促进疫苗诱导的HI抗体应答；适当剂量组合的rFPV-HA与rFPV-IFN-γ联合免疫含有母源抗体的商品鸡，可提高免疫保护效力，发挥免疫增强作用。 相似文献
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cDNA文库的免疫筛选 总被引：4，自引：0，他引：4
本研究讨论了几种因素对成功免疫筛选的影响，其中包括基因库铺板密度，膜结合特性，封闭试剂的应用，抗体的预吸附，第二抗体的选择及抗原体检测方法等从中得出如何获得编码基因的方法。 相似文献
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PRRSV GP5和M蛋白重组腺病毒对猪的安全性和免疫效力 总被引：3，自引：0，他引：3
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5 重组腺病毒(recombinant Adenovirus-GP5,rAd-GP5)和M蛋白重组腺病毒(rAd‐M)分别接种4只30日龄PRRSV阴性断奶健康仔猪，结果为仔猪接种后2周内体温和食欲正常，猪血液、鼻塞、粪便和猪舍环境中重组腺病毒及其野生型腺病毒检测均为阴性。同时，将rAd‐GP5、rAd-M、rAd-GP5+M (rAd-GP5和rAd-M,V/V=1)和PRRSV-Resp弱毒株分别接种4只30日龄PRRSV阴性仔猪，不同时间检测PRRSV抗体，结果为免疫后14和45 d可检出PRRSV ELISA抗体和中和抗体；免疫后60～90 d，rAd-GP5和rAd-M免疫组ELISA抗体滴度均达1∶2400以上，与PRRSV‐Resp弱毒免疫组相似，而中和抗体滴度达1∶6以上，低于PRRSV-Resp弱毒免疫组；rAd-M免疫组ELISA抗体和中和抗体滴度则低于rAd‐GP5免疫组。rAd-GP5和rAd-M混合免疫组ELISA抗体达1∶4800,其中和抗体滴度与其单独免疫组相似。15只仔猪免疫后28 d进行攻毒保护试验，结果为重组腺病毒免疫猪攻毒后3 d平均体温为39.5℃,病毒血症和排毒时间仅为2周，与PRRSV-Resp弱毒免疫组相似，而空白对照组病毒血症和排毒时间至少60 d。攻毒后7～14 d，rAd-GP5和rAd‐M免疫组ELISA抗体和中和抗体水平明显升高。研究表明rAd-GP5和rAd-M重组腺病毒具有较好的安全性，均可诱导猪体产生较好的免疫反应，两者具有明显的协同免疫作用。 相似文献
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利用基因重组技术将鸡传染性支气管炎病毒（IBV）S1基因分段（A和B段）克隆到pGEX—6p-1载体中，用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示有明显的融合蛋白表达条带。通过IBV特异性抗体的Western blot检测，两段表达产物均能与抗体发生特异性反应，证明表达产物具有部分抗原性。用Glutathione Sepharose 4B纯化出A段和B段的GST融合蛋白。将纯化得到的融合蛋白免疫家兔。连续免疫3次，将得到的抗体与200 TOCID50（气管环半数感染）/0．1mL病毒工作液在37℃温育1h进行TOC试验。经计算A段抗体的50%血清中和终点为1：18，而B段抗体的50％血清中和终点为1：53，表明这两段的表达产物具有较好的免疫原性，B段表达产物更具有良好的抗原性，适合作为免疫抗原和诊断抗原，具有一定的临床应用价值。 相似文献
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家蚕卵黄蛋白组成及其胚胎时期的变化 总被引：2，自引：0，他引：2
家蚕(Bombyx mori)卵黄蛋白是家蚕胚胎发育的重要营养和能量来源。采用直接解剖蚕卵获取卵黄蛋白，结合蛋白质双向电泳和图像分析，对家蚕处女蛾卵及不同胚胎发育阶段蚕卵的卵黄蛋白质进行了研究，发现家蚕卵黄蛋白有203个蛋白质斑点；不同家蚕品种之间卵黄蛋白的组成存在一些差异；同一品种不同发育时期胚胎卵黄蛋白的组成基本保持不变。暗示了在胚胎发育过程中，胚胎不是选择性地吸收利用卵黄蛋白颗粒中的某种或某些蛋白质，而是以卵黄蛋白颗粒为单位，一个个地吸收利用。 相似文献
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摘要：利用基因重组技术将鸡传染性支气管炎病毒S1基因分段（A段和B段）克隆到pGEX-6p-1载体中，并利用IPTG诱导表达。表达产物裂解后，经SDS-PAGE电泳和考马司亮蓝染色，有明显的融合表达蛋白条带。通过特异性抗体的Western-blot检测，两段表达产物均在相应位置出现了明显的条带，证明表达产物具有部分抗原性。用Glutathione Sepharose 4B纯化出GST融合蛋白。将纯化得到的融合蛋白免疫家兔，连续免疫3次，将得到的抗体与200TOCID50/0.1ml病毒工作液在37℃温育1h进行气管环试验，计算结果 A段抗体的50%血清中和终点为1：18，而B段抗体的50%血清中和终点为1：53，从而表明这两段的表达产物具有较好的免疫原性，且B段表达产物的免疫原性比A段高。 相似文献