共查询到20条相似文献，搜索用时 31 毫秒
1.
脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding proteins ,LBP)是机体对革兰氏阴性菌感染产生的可溶性急性期蛋白,结合并提呈LPS给细胞表面的模式识别受体,激发免疫反应。在本试验中,用低浓度嗜水气单胞菌( Aeromonas hydrophila)感染草鱼(Ctenopharyngodon idellus)24 h后,抽取全血,离心,获得血浆。结合LBP活性检测,经硫酸铵沉淀、CMSephadex C-50阳离子交换层析和DEAE Sephadex A-25阴离子交换层析后,分离纯化得到LBP。该蛋白对异硫氰酸荧光素标记的脂多糖(Fluorescein isothiocyanate labeled li-popolysaccharide ,FITC-LPS)有较强的结合能力。在SDS-PAGE电泳后,考马斯亮蓝染色可见3条明显的带,分子量大约为68、53和48 kDa。同时探索一条简便分离纯化脂多糖结合蛋白的方法,为进一步研究LBP的功能奠定了基础。 相似文献
2.
3.
4.
[目的]探寻防治榆紫叶甲病的生防菌株。[方法]从榆紫叶甲虫体上分离菌株后进行培养,并对室内饲养的榆紫叶甲各龄幼虫进行致病性试验。[结果]从感病榆紫叶甲成虫虫体上分离到18个菌株,其中12个菌株具有几丁质和蛋白质降解活性。5个菌株对1~2龄幼虫表现出不同程度的致病力,在接种后1~3 d幼虫开始死亡,处理后7 d幼虫的累积死亡率为21.2%~46.8%,其中YJA-03和YJA-10菌株的累积死亡率30.0%。YJA-03菌株为革兰氏阳性菌,经过形态学、生理生化特性和PCR扩增鉴定确定它属于短杆菌属(Exiguobacterium)。YJA-10菌株为革兰氏阴性菌,经鉴定其属于Glutamicibacter属。[结论]YJA-03和YJA-10菌株可用作防治榆紫叶甲病的生防菌。 相似文献
5.
6.
为探讨覆盖作物不同利用方式对猕猴桃园土壤微生物群落结构的影响,通过磷脂脂肪酸（PLFA）方法,研究覆盖作物处理对猕猴桃园土壤微生物群落结构的影响。试验设置3个处理,分别为种植覆盖作物+覆盖作物刈割后留在土壤表面自然腐解（T1）、种植覆盖作物+覆盖作物刈割后从园中清除（T2）和清耕对照（CK）。结果表明,T1、T2处理土壤微生物PLFAs总量和微生物量碳、氮均显著高于CK（P<0.05）;土壤pH和碳氮比是影响猕猴桃园土壤微生物群落的主要环境因子,pH与土壤微生物PLFAs总量呈极显著正相关（P<0.01）,与细菌PLFAs量、革兰氏阴性菌PLFAs量呈显著正相关（P<0.05）,碳氮比与革兰氏阳性菌PLFAs量/革兰氏阴性菌PLFAs量呈极显著正相关（P<0.01）。研究表明,猕猴桃园种植覆盖作物改变了土壤环境因子,影响土壤微生物群落结构组成。研究可为丹江口水源涵养区果园生态管理模式的探索提供理论依据。 相似文献
7.
Ge M Chen Z Onishi HR Kohler J Silver LL Kerns R Fukuzawa S Thompson C Kahne D 《Science (New York, N.Y.)》1999,284(5413):507-511
Vancomycin is an important drug for the treatment of Gram-positive bacterial infections. Resistance to vancomycin has begun to appear, posing a serious public health threat. Vancomycin analogs containing modified carbohydrates are very active against resistant microorganisms. Results presented here show that these carbohydrate derivatives operate by a different mechanism than vancomycin; moreover, peptide binding is not required for activity. It is proposed that carbohydrate-modified vancomycin compounds are effective against resistant bacteria because they interact directly with bacterial proteins involved in the transglycosylation step of cell wall biosynthesis. These results suggest new strategies for designing glycopeptide antibiotics that overcome bacterial resistance. 相似文献
8.
家蚕整合素β2的表达、纯化及其免疫功能 总被引：1，自引：1，他引：0
【目的】 分析家蚕（Bombyx mori）整合素β2的序列和结构特征及其在家蚕感染病原菌后血细胞中的表达变化,检测其重组蛋白对不同病原相关模式分子识别和病原菌的凝聚作用,为进一步探究家蚕整合素β2的蛋白功能打下基础。【方法】 利用生物信息学对整合素β2的序列和结构特征进行分析,利用实时荧光定量PCR检测家蚕分别注射大肠杆菌（Escherichia coli）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）后整合素β2在血细胞中的表达变化。通过PCR技术扩增获得整合素β2完整的胞外域片段,构建至pET22b原核表达载体后转化至E.coli Rosetta(DE3)表达菌株。经IPTG诱导获得重组蛋白,利用Ni-NTA亲和层析得到纯化的体外重组蛋白,利用SDS-PAGE和Western blot对纯化获得的体外重组蛋白的纯度和质量进行检测。利用ELISA检测重组蛋白与两种不同病原相关分子模式LPS和PGN的结合情况,运用Western blot检测重组蛋白与不同病原微生物的结合情况,通过凝集试验检测重组蛋白对金黄色葡萄球菌的凝集能力,最后在个体水平探索重组蛋白在体内细菌清理中的作用。【结果】 家蚕整合素β2具有典型的β整合素亚基保守结构特征,即由一个较长的胞外域、一个单次跨膜结构域和一个较短的胞内域构成。家蚕整合素β2具有金属离子结合位点MIDAS、EGF结构域、半胱氨酸重复基序和NPxY等整合素典型的结构特征。实时荧光定量PCR检测结果表明家蚕在受到细菌感染后,整合素β2的表达发生显著变化。通过原核表达和蛋白纯化获得纯度较高的重组蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明纯化的重组蛋白纯度较高,可以用于后续试验。ELISA试验表明重组蛋白对LPS和PGN等病原相关分子模式具有较强的结合能力。细菌结合试验结果显示重组蛋白能够结合多种细菌,但与革兰氏阳性菌的结合能力要高于革兰氏阴性菌。细菌凝聚试验结果显示重组蛋白在Ca 2+的存在下对金黄色葡萄球菌具有较强的凝聚作用。细菌清除试验证实重组蛋白可以有效促进机体对外源入侵细菌的清理作用。【结果】 整合素β2具有典型的整合素β亚基的结构特征,可能具有识别病原相关分子模式,如LPS和PGN等的能力,通过与细菌的直接结合而实现对入侵病原微生物的凝聚作用,从而增强有机体的免疫能力,推测在家蚕免疫反应中发挥重要作用。 相似文献
9.
新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)特性的研究 总被引：9，自引：1，他引：9
探讨了新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin -XJ)的抗菌特性。根据琼脂糖孔穴扩散法 ,检测抗菌肽的热稳定性、抑菌效价、对氨苄青霉素抗性菌的抑菌作用 ,检测抗菌肽对酸碱盐、人造胃液的耐受性及其抗菌谱。结果表明新疆家蚕抗菌肽 (Cecropin -XJ)具有很强的热稳定性、能够杀灭氨苄青霉素抗性菌、对酸碱盐、人造胃酸有一定的耐受性 ,其杀菌活力为 :1μg/ μl抗菌肽与 2 4 0 0 0单位的氨苄青霉素杀菌活力相当。新疆家蚕抗菌肽能够杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 ,而对革兰氏阳性菌的抗菌活力高于革兰氏阴性菌 ,这一发现将为抗菌肽在农业、医疗卫生、畜牧业等方面的应用奠定基础 ,同时为深入研究抗菌肽作用机制提供了依据 相似文献
10.
11.
猪细小病毒SY-99株非结构蛋白NSl基因的克隆与原核表达 总被引：1，自引：0，他引：1
根据猪细小病毒 (porcineparvovirus ,PPV)NADL 2株非结构蛋白基因NS1序列设计引物 ,扩增出了PPVSY 99株的NS1基因 ,将其克隆到原核表达载体pET2 8a中 ,得到重组质粒SYNS1/pET2 8a。将SYNS1/pET2 8a转化到大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,经IPTG诱导 ,使PPVNS1基因获得了表达 ,运用ELISA和Westernblotting证实了表达产物的特异性。经表达产物细胞定位分析 ,表达的NS1蛋白是以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变诱导时间或诱导剂IPTG的浓度 ,确定了表达NS1蛋白的最佳诱导条件 :IPTG终浓度为 0 .6mmol·L-1,诱导时间为 3h ,在大肠杆菌中最高表达含量为 17.8%。亲和层析后 ,得到了纯化的NS1蛋白 ,在Westernblotting检测中 ,纯化蛋白大大降低了反应背景。表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂来检测PPV的发生 ,而且还可用于鉴别灭活疫苗免疫猪和自然感染猪 相似文献
12.
Porcine parvovirus (PPV) is one of the major agents causing swine reproductive failure. NS1protein is a non-structural protein of PPV and can be used as a reagent for differentiation of vaccinated ani-mals and infected ones. In present study, a recombinant plasmid pET28a/NS1 was constructed by cloning thecoding sequence for NS1 of PPV into pET28a, a bacterial expression vector. The NS1 protein was expressed inE. coli BL21 (DE3) after induced by IPTG and the recombinant fusion protein was purified with affinity chro-matography. Expression amount of NS1 protein was improved by optimizing the inducing parameters. The re-combinant NS1 protein is reactive to PPV positive sera in Western blot and ELISA test and therefore can beapplicable in differential diagnosis of PPV infections. 相似文献
13.
Cytophaga that kills or lyses algae 总被引：7，自引：0，他引：7
A myxobacterium (Cytophaga N-5) isolated from sewage kills or lyses an array of living green and blue-green algae. When assayed with Nostoc muscorum or Plectonema boryanum, plaques form like those caused by the blue-green algal virus LPP-1. This isolate lyses or inhibits mutually Gram-positive and Gram-negative eubacteria. 相似文献
14.
15.
番茄酱中厌氧菌/兼性厌氧菌的鉴定结果分析 总被引：2，自引：1，他引：1
目前有关番茄酱中微生物的研究报道主要来自国外,而国内仅限于罐头食品的商业无菌及霉菌的镜检计数.番茄酱中厌氧菌的检测方法国内外文献未见报道.通过大量的试验,建立了番茄酱中厌氧菌分离培养及检测方法.并用此方法从番茄酱中分离到的厌氧菌或兼性厌氧菌通过VITEK32全自动微生物生化分析仪及微量生化管进行鉴定,结果有革兰氏阴性、阳性的杆菌属、革兰氏阳性的芽胞杆菌属、革兰氏阳性的球菌属等. 相似文献
16.
一株核桃树内生真菌的分离鉴定及活性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]从核桃树皮内分离筛选具抑菌活性的内生真菌菌株。[方法]核桃树皮经自来水冲洗后置于培养基以产生真菌菌株,对获得的菌株进行形态学观察及抑菌活性测试。[结果]从核桃树皮内分离到一株产广谱、高活性抑菌物质的内生真菌。经测定对细菌、植物病原真菌和皮肤致病真菌共24种病原微生物有不同程度的抑制作用。形态特征表明,该菌株与拟青霉属Paecilomyces Bainier中的淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus的特征基本一致,ITS序列分析显示本菌株与各淡紫拟青霉同源性都高于99%,因此将菌株JY-1024命名为淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinusJY-1024。[结论]该研究首次从核桃树皮内分离得到淡紫拟青霉并首次报道了其抑菌活性。 相似文献
17.
黏细菌的筛选及其抗菌活性的初步分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为了从黏细菌中筛选生物活性物质,以兔粪、腐木为原料,采用选择培养基、加热、冷冻等方法分离到3株黏细菌;重点研究了1号菌,发现1号菌胞外物、胞内物均具有抗菌活性,且抗菌谱不同,其中胞外物对G+细菌有较强的抑菌作用,胞内物对部分G+细菌及G-细菌有抑菌作用,两者对真菌均无抑菌作用。将1号菌胞外物进行薄层层析和硅胶柱层析,得到了抑制放线菌生长的单一组分。 相似文献
18.
Odenbreit S Püls J Sedlmaier B Gerland E Fischer W Haas R 《Science (New York, N.Y.)》2000,287(5457):1497-1500
The Gram-negative bacterium Helicobacter pylori is a causative agent of gastritis and peptic ulcer disease in humans. Strains producing the CagA antigen (cagA(+)) induce strong gastric inflammation and are strongly associated with gastric adenocarcinoma and MALT lymphoma. We show here that such strains translocate the bacterial protein CagA into gastric epithelial cells by a type IV secretion system, encoded by the cag pathogenicity island. CagA is tyrosine-phosphorylated and induces changes in the tyrosine phosphorylation state of distinct cellular proteins. Modulation of host cells by bacterial protein translocation adds a new dimension to the chronic Helicobacter infection with yet unknown consequences. 相似文献
19.
20.
Phosphonomycin, a new antibiotic produced by strains of streptomyces 总被引：22，自引：0，他引：22
D Hendlin E O Stapley M Jackson H Wallick A K Miller F J Wolf T W Miller L Chaiet F M Kahan E L Foltz H B Woodruff J M Mata S Hernandez S Mochales 《Science (New York, N.Y.)》1969,166(901):122-123
Phosphonomycin is a newly discovered antibiotic produced by streptomycetes. It is effective, when administered by the oral route, to mice infected with Gram-positive or Gram-negative microorganisms. The antibiotic is bactericidal and inhibits cell-wall synthesis. 相似文献