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1.
采用活菌计数的方法研究儿茶素对EHEC O157∶H7的抑菌作用及培养温度、pH值、NaCl等因素对儿茶素抑菌活性的影响。结果表明,儿茶素对EHEC O157∶H7最小抑菌质量浓度为1.25 g/L;儿茶素对该菌株的抑制作用具有良好的稳定性,在37℃的中性环境中抑制作用较明显;同时,NaCl与儿茶素能起到协同作用,随着NaCl质量分数越大,儿茶素对EHEC O157∶H7的抑制作用越明显。儿茶素对EHEC O157∶H7的生长有较显著的抑制效果,且稳定性较好,这为儿茶素在食品和医药保健品方面的应用提供了理论依据。 相似文献
2.
采用傅里叶变换近红外光谱仪结合化学计量学方法对大肠埃希氏菌O157∶H7、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌3种典型食源性致病菌进行鉴别研究。光谱数据经矢量归一化等预处理后,选取6 000~4 000 cm~(-1)波数范围具有菌株特性的谱图作为鉴别分析的研究对象,进行主成分分析(Principal component analysis,PCA)。利用PCA提取的前2个主成分作为贝叶斯判别(Bayes discriminant analysis,BDA)模型的最优判别因子,建立改进贝叶斯判别模型。该改进模型对训练样本和未知样本的判别正确率均达到100%。结果表明,改进BDA模型比BDA模型在食源性致病菌的判别精确度上有较大提高,基于近红外光谱的改进BDA模型可以作为一种准确、有效的食源性致病菌快速鉴别方法。 相似文献
3.
为了明确O157:H7(ΔhlyΔstxΔtoxB)口服能否减少亲本株O157:H7在山羊体内的定殖。选用3月龄山羊,首先口服接种O157:H7(ΔhlyΔstxΔtoxB),分别于第7,14天再次口服接种亲本株O157:H7,监测亲本株O157:H7的排菌持续时间和排菌量。结果表明:O157:H7(ΔhlyΔstxΔtoxB)口服后第7天攻击亲本株O157:H7,第4天检测不到亲本株O157:H7的排菌;第14天攻击亲本株O157:H7,第9天检测不到亲本株O157:H7的排菌。直接口服亲本株O157:H7,排菌一直持续到第25天。口服O157:H7(ΔhlyΔstxΔtoxB)能够减少O157:H7在山羊体内的定殖,为研制EHECO157:H7基因缺失疫苗奠定了基础。 相似文献
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为了明确O157:H7(△hly △stx△toxB)口服能否减少亲本株O157:H7在山羊体内的定殖.选用3月龄山羊,首先口服接种O157:H7(△hly△stx△toxB),分别于第7,14天再次口服接种亲本株O157:H7,监测亲本株O157:H7的排菌持续时间和排菌量.结果表明:O157:H7(△hly △stx△toxB)口服后第7天攻击亲本株O157:H7,第4天检测不到亲本株O157:H7的排菌；第14天攻击亲本株O157:H7,第9天检测不到亲本株O157:H7的排菌.直接口服亲本株O157:H7,排菌一直持续到第25天.口服O157:H7(△hly △stx△toxB)能够减少O157:H7在山羊体内的定殖,为研制EHEC O157:H7基因缺失疫苗奠定了基础. 相似文献
5.
《农产品加工．学刊》2016,(2)
为了建立牛乳中大肠杆菌O157∶H7的PCR快速检测方法,试验对大肠杆菌O157∶H7的rfbE基因序列进行分析,设计1对特异性引物,对大肠杆菌O157∶H7的DNA进行PCR扩增,结合特异性和灵敏性试验,实现对致病性大肠杆菌O157∶H7的检测;然后将不同含量的大肠杆菌掺入到牛乳中进行实际样品的检测。结果表明,该方法的特异性和灵敏性较好,能够检测到0.1 ng/μL的DNA模板,当牛乳中含有超过100 CFU/mL的大肠杆菌时,可利用该方法进行检测。 相似文献
6.
赫氏埃希菌抗体的体外特异性抑菌试验 总被引：1，自引：1，他引：0
为研究赫氏埃希菌抗体在体外对赫氏埃希菌的抑制作用,制备了兔抗赫氏埃希菌多克隆抗体,并用Protein G树脂抗体纯化柱进行纯化,纯化后的抗体与赫氏埃希菌混合,在不同的时间点对混合物进行扫描电镜分析和培养基生长分析。同时,用赫氏埃希菌伤口感染20只Balb/c小白鼠做赫氏埃希菌多克隆抗体的治疗效果分析。结果表明,赫氏埃希菌抗体在加入后的20 min开始裂解细菌,并在80 min后全部将赫氏埃希菌裂解。混合物的细菌生长分析表明没有有活性的赫氏埃希菌存在。小鼠感染实验表明被赫氏埃希菌感染的小鼠在应用该抗体治疗后,恢复时间明显比未用抗体治疗的对照组快。因此,所制备的赫氏埃希菌多克隆抗体将能作为一种免疫治疗的方法应用于临床治疗。 相似文献
7.
试验观察乙酰甲喹对大肠埃希氏菌临床分离株的作用效果,测定乙酰甲喹的抗生素后效应(PAE),采用标准肉汤试管二倍稀释法测定药物对分离菌株的最小抑菌浓度(MIC),并在MIC的基础上采用菌落计数法分别测定0.15,1,2,4倍于MIC时对试验菌的PAE。结果显示,MIC值为2μg/mL,在药物质量浓度为0.5,1,2,4倍MIC时对分离菌株的PAE分别是0.5,1,2,3 h,表明乙酰甲喹对大肠埃希氏菌临床分离株有着明显的抑制作用,并存在PAE,且PAE具有浓度依赖性,随药物浓度升高,PAE的时间延长。 相似文献
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试验观察乙酰甲喹对大肠埃希氏菌临床分离株的作用效果，测定乙酰甲喹的抗生素后效应（PAE），采用标准肉汤试管二倍稀释法测定药物对分离菌株的最小抑菌浓度（MIC），并在MIC的基础上采用菌落计数法分别测定0.15，1，2，4倍于MIC时对试验菌的PAE。结果显示， MIC值为2μg/mL，在药物质量浓度为0.5，1，2，4倍MIC时对分离菌株的PAE分别是0.5，1，2，3 h，表明乙酰甲喹对大肠埃希氏菌临床分离株有着明显的抑制作用，并存在PAE，且PAE具有浓度依赖性，随药物浓度升高， PAE的时间延长。 相似文献
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由新疆境内分离到２６株大肠埃希氏菌（Ｅ．Ｃｏｌｉ）并检测了它们的抗药性和疏水性，药敏试验结果表明，多菌菌株对氯霉素，磺胺，四环素，麦迪霉素，青霉素，链霉素具有抗药性，菌必治，氟哌酸，先锋Ⅲ，先锋Ⅴ，高度敏感，红霉素，卡那霉素，痢特灵，吡哌酸表出中度敏感，在２５株菌的盐凝集试验（ＳＡＴ）中，疏水阳性菌株占７．４％。 相似文献
11.
乳制品因原料奶污染及产品生产过程控制不严,极易污染大肠菌。从68个常见乳制品和工业产品的大肠菌群阳性样品(包括冷饮、奶粉和酸奶)中分离得到了143株菌,通过对分离菌株进行的生理鉴定试验,确定筛选出108株疑似大肠菌,生化鉴定试验最终确定45株大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、15株弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、23株肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)和21株阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)。基本明确了乳制品中受污染的大肠菌群种类及受感染的比例,对今后建立乳制品中大肠菌群快速检测方法和对生产、品控工作具有重要的指导意义。 相似文献
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河北地区猪圆环病毒二型ORF2基因片段的克隆与原核表达 总被引：3，自引：1，他引：2
以PCV2 PK-15细胞毒提取的DNA为模板,用PCR扩增PCV20RF2基因的后部约600 bp片段;对PCR产物回收纯化后与载体pMD19-T进行连接、转化,经酶切和序列分析后亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-32a-ORF2,转入大肠埃希氏菌B121(DE3)中,以IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳和Western-Blotting分析.结果表明.重组表达质粒在大肠中所表达的融合蛋白相对分子量为40 kDa,Western-blotting分析表明该蛋白具有PCV2抗原性. 相似文献
13.
出血性大肠杆菌O157: H7 Stx2B-Tir-Stx1B多价融合蛋白表达及免疫原性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了更好防治由出血性大肠杆菌O157∶ H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗,其中亚单位疫苗时具有很大优势.构建表达tir和stx1b的融合基因,将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stx1b亚基基因72个氨基酸串联构建pGEX-stx2b-tir-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳检测,该融合蛋白获得了高效表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右.重组蛋白纯化后皮下途径免疫小鼠,能够诱导高滴度(105)的IgG,鼻腔内途径免疫小鼠不仅能够诱导高滴度(104)的IgG,还能诱导高达102的IgA.二免后攻击50LD50的EHEC O157∶ H7,相对于对照组,免疫组粪便中排菌量明显降低、排菌时间明显缩短.结果表明:该融合蛋白免疫原性良好,并且由Tir、Stx2b和Stx1b三部分抗原组成,可刺激机体产生针对转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(Stx)的抗体,在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值. 相似文献
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对徐州市售草鱼细菌带染状况及耐药性分析,结果表明从其鳃中分离到4 株革兰氏阴性短杆菌,暂时编号为ZYF-1、ZYF-2、ZYF-3 和ZYF-4,查阅数值编码鉴定ZYF-1 菌株为志贺（Shigella sp.）,ZYF-2、ZYF-3 菌株为大肠埃希菌（Escherichia coli）,ZYF-4 菌株为泉居沙雷菌（Serratia fonticola）。药敏试验结果表明,4 株分离菌的耐药率分别为75.8%、72.4%、65.5%和82.8%,均对氨苄西林、阿莫西林、复方新诺明、磺胺异恶唑和甲氧苄啶等11 种抗生素耐药。本研究显示市售草鱼存在志贺菌、大肠埃希菌带染现象,对多种抗生素耐药,这为食源性细菌鉴定及鱼病防治提供参考。 相似文献
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以干酪乳杆菌LC-STH-13为菌种,使用MRS基础培养基对菌种的进行活化。根据MRS培养基中的不同体系,对其进行改良,获得改良的MRS培养基。改良MRS培养基配方为:大豆蛋白胨9 g,牛肉粉11 g,酵母浸粉5.2 g,乳糖19 g,磷酸氢二钾2.2 g,柠檬酸三钠1.8 g,柠檬酸铵2.4 g,吐温80 1 mL,MgSO4.7H2O 0.56 g,MnSO4.4H2O 0.25 g。使用改良MRS培养基培养的菌体活菌数比MRS高出了1个数量级;在OD值和菌体干质量指标上,改良MRS是MRS的1.2倍。 相似文献
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本研究旨在优化甲氰菊酯降解菌在培养基中的生长条件,探索基础盐培养基配方为该菌的大量繁殖提供理论依据。从淤泥中富集分离筛选出一株甲氰菊酯降解菌(Y1)并保存,经过鉴定该菌属于蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。通过单因素试验测定OD600值确定了该菌繁殖的最适碳源和氮源,正交试验明确最佳基础盐培养基。结果表明：最适碳源与氮源分别为蔗糖和蛋白胨,最适浓度分别为0.15%和2.5%;最佳基础盐培养基配方为：pH 6.0,蔗糖0.15%,蛋白胨2.5%,K2HPO4 0.001%,KH2PO4 0.01%,MgSO4· 7H2O 0.1%,NaCl 0.01%。在优化后的基础盐培养基中Y1 能够大量繁殖,为该菌在甲氰菊酯污染的土壤中进行修复奠定了基础。 相似文献
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为快速大量地得到生防菌Serratia proteamaculans NC-5,并且提高菌株的生防效果,本文对培养基组成进行优化并对各组成成分之间的相互作用进行了深入分析。先对其培养基组成成分包括碳源、氮源、二价金属离子及NaCl、KH2PO4、酵母粉进行单因素试验,再通过Plackeet-Burman实验设计方法可知发酵培养基对NC-5的生长具有显著影响的因素为麦芽糖、胰蛋白胨和CaCl2·2H2O。根据重要影响因素的效应大小设定爬坡方向及爬坡步长进行最陡爬坡试验。最后,采用Box-Behnken试验设计3因素3水平的响应面分析试验。结果显示麦芽糖、胰蛋白胨的最佳质量浓度和CaCl2·2H2O的最佳浓度组成分别为7.68 g/L、32.88 g/L、4.672 mmol/L。经过优化后的菌株NC-5的增殖培养基的组成成分为：麦芽糖7.68 g/L、胰蛋白胨32.88 g/L、KH2PO4 0.25%、NaCl 0.50%、4.672 mmol/L CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O 2 mmol/L、MnSO4·1H2O 1 mmol/L、酵母粉1 g/L。采用以上最佳培养基进行培养,培养后菌株NC-5的吸光值OD600为0.821（比色时菌液稀释4倍）,基本与预测的吸光值0.81652接近,并是基础培养基培养菌株后菌悬液吸光值0.675（比色时菌液稀释2倍）的2.432倍,即发酵液菌体的细胞数量提高了184.444%。以上实验说明响应面法优化得到的函数模型与实际数据较为拟合,经过优化后的培养基组成可为该生防菌的工业生产提供理论基础。 相似文献