根癌农杆菌介导的番茄高效遗传转化体系的研究   总被引：5，自引：0，他引：5  

梁超  王景雪  裴雁曦  杨婷 《华北农学报》2009,24(2)

以番茄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,通过农杆菌介导法,对其遗传转化条件进行了优化,建立了高效番茄子叶和下胚轴农杆菌介导的遗传转化体系.结果表明:在农杆菌浸染前(浸染浓度为OD600=0.3)进行2 d的预培养浸染6 min的外植体在MS+2.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L IAA的培养基上转化效率最高.PCR检测初步证明,NPTII基因已整合到番茄再生植株中.  相似文献   

农杆菌介导苎麻叶片遗传转化体系的研究   总被引：9，自引：0，他引：9  

陈建荣  郭清泉  张学文  陈婕 《中国农学通报》2005,21(6):63-63

研究建立了苎麻叶片外植体再生体系,确定了对苎麻转化体和非转化体进行筛选的Kan浓度为25mg/L。通过比较不同的条件对通过农杆菌介导苎麻叶片遗传转化的影响,建立了农杆菌介导苎麻叶片遗传转化的体系。  相似文献   

辣椒农杆菌介导转化体系的建立及外源基因的转化   总被引：3，自引：0，他引：3  

上官小霞  吴霞  张林水  刘珍  李波  李燕娥  朱祯 《华北农学报》2003,18(2):5-8

辣椒农杆菌介导转化体系主要包括无菌苗制备、菌株培养、农杆菌介导转化、芽诱导、芽伸长、生根及移栽等6个步骤。芽诱导培养基以MS 4．0—6．0mg/L 6—BA 0．5mg/L NAA 2．0mg/L AgNO3较好，诱芽分化率因品种不同而异，高的可达70％以上，子叶的分化率明显高于下胚轴；诱芽伸长培养基以MS 3．0mg/L 6—BA 0．3mg/L NAA 1．0mg/L GA3较好，伸长率达40％；生根培养基以1/2MS 0．3mg/L NAA(或0．5mg/L LAA)较好，平均生根率达65％。经过对3个品种的抗虫基因转化研究，均获得了转抗虫基因再生株。  相似文献   

农杆菌介导反义油酸脱饱和酶基因转化甘蓝型油菜   总被引：4，自引：0，他引：4  

董娜  林良斌  马占强 《分子植物育种》2004,2(5):655-659

以甘蓝型油菜花油3号的子叶柄作为转化受体,利用农杆菌介导法,将反义油酸脱饱和酶基因导入甘蓝型油菜,获得了卡那霉素抗性植株。对再生植株进行PCR-Southern blotting检测,证明外源基因已整合到油菜基因组中。本文还进一步分析了影响遗传转化的一些因素。结果表明：对子叶柄进行适当的预培养,可以提高转化效率。延迟筛选也有利于提高转化效率。将处于对数生长期的农杆菌菌液稀释10倍后,外植体浸泡5-7min的转化效果最佳。  相似文献   

月见草△6-脂肪酸脱氢酶基因转化油菜的研究     

哈斯阿古拉  张立全  怡荣  杨佳  牛一丁  王秀珍 《华北农学报》2011,(6):50-54

以油菜子叶节为外植体优化了农杆菌介导的甘蓝型油菜的遗传转化体系,为在油料作物中用基因工程手段生产γ-亚麻酸打下基础.采用CaCl2法制备农杆菌AGL1感受态细胞,将已经构建好的植物表达载体pPZP221(35S-D6D-NOS)通过液氮冻融法转化农杆菌,PCR筛选阳性转化子.结果表明:优化的甘蓝型油菜子叶节外植体预培养...  相似文献   

根癌农杆菌介导白细胞介素-4基因转化甘蓝(Brassica oleracea L.)研究     

李然红  于丽杰  陶雷  王雷 《分子植物育种》2007,5(1):47-53

利用根癌农杆菌介导法,以白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)基因转化中甘11号甘蓝.本研究对可能影响il-4转化率的外植体类型、外植体的预培养时间、农杆菌的侵染时间以及外植体与农杆菌的共培养时间进行了优化.试验结果表明:il-4基因对带1～2 mm子叶柄的子叶的转化率显著高于下胚轴;带柄子叶在预培养1 d、侵染3 min、共培养1 d时,转化效果最好,转化率达23.3%;下胚轴在预培养1～3 d,侵染3～5 min,共培养1～2 d时,转化效果较好,转化率最高可达13.3%.经PCR检测及PCR-Southern杂交,初步证明目的基因il-4已经转入甘蓝的再生植株.转il-4基因甘蓝的PCR阳性再生植株已经开花并产生了后代.  相似文献   

农杆菌介导法转化小麦的研究进展     

杨丽娟  盛坤  蒋志凯  刘朝辉  赵宗武 《种业导刊》2014,(10):8-12

农杆菌介导法具有操作简便、成本低、实用性强等诸多优点,广泛应用于小麦遗传转化。综述了农杆菌介导法转化小麦的敏感基因型筛选、外植体类型选择及转化体系优化方面的研究进展,对农杆菌介导法转化小麦前景进行了展望。  相似文献   

农杆菌介导法将LFY基因导入嘎拉苹果的研究     

刘静  李湘利  徐继忠  邵建柱 《华北农学报》2007,22(2):53-55

以嘎拉苹果叶片为外植体,利用GUS瞬时表达率,对农杆菌介导法转化苹果的因素进行优化.结果表明:卡那霉素(Km)选择压在30 mg/L时,外植体预培养2～3 d后以OD600=0.3～0.5农杆菌菌液浸泡3～5 min,共培养3 d,延迟筛选3 d可明显提高M2叶片转化效率,GUS阳性率达50%.PCR检测初步证明,LFY基因已整合到苹果再生植株中.  相似文献   

农杆菌介导棉花基因转化的研究   总被引：3，自引：1，他引：3  

李俊兰  张寒霜  高鹏  王海波 《华北农学报》2002,17(Z1):80-84

以棉花无菌苗下胚轴为外植体,通过愈伤组织培养,使供试的20个棉花新品种(系)中19个培养出体细胞胚或再生植株.在此基础上,选用易获得再生植株的邯93-2、邯无2031、衡无89-30、C201、C312,利用农杆菌介导转化Bt基因,抗卡那霉素愈伤组织诱导率约为50%,其中约40%表现GUS阳性.从邯93-2 GUS阳性愈伤中获得再生植株,其50%呈GUS阳性,且Bt基因的导入经Southern杂交验证.  相似文献   

农杆菌介导果树遗传转化之研究进展     

赵玉辉  李作轩 《中国农学通报》2005,21(11):281-285

综述了农杆菌介导法在果树育种领域研究进展:(1)农杆菌介导的遗传转化在果树抗病、抗虫、抗除草剂、抗冻、抗盐、改良生长特性、生根等方面的研究成果:(2)对农杆菌介导的遗传转化存在的高效离体再生系统的建立、提高转化后再生频率、假转化体和低转化率、过敏性反应、开发基因资源、基因工程的生物安全性、多重转化等问题进行了分析;(3)农杆菌介导叶绿体遗传转化。非组培遗传转化已成为模式植物遗传转化的主要手段,在此简单介绍了其应用情况和技术原理。这些方法在其它植物中也有广阔的应用前景。  相似文献