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用抽吸法和切割法采集死亡大熊猫卵泡卵母细胞进行体外培养和体外受精,对其培养前、培养后及受精后的卵母细胞进行了电镜观察。结果表明,（１）大熊猫卵母细胞中富含卵黄颗粒和卵黄泡;（２）经过２２ｈ的培养,大熊猫卵母细胞在超微结构上表现为成熟卵的特征;（３）大熊猫卵母细胞中的线粒体为基质密度浅且均匀的线粒体。 相似文献
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牛体外受精技术研究进展 总被引：11，自引：0，他引：11
１卵母细胞的体外成熟１．１卵母细胞的获取自卵巢获取卵母细胞的方法主要有４种。机械分离法，系自屠宰场废弃的卵巢表面获取卵母细胞的常用方法，主要有抽吸法、切割法和剥离法。抽吸法操作迅速，但易损伤卵丘细胞，取卵数量较少；切割法在最短时间内获卵数量较多，但易出现裸卵和损伤卵丘细胞；剥离法操作繁琐，但对卵丘细胞损伤较小。机械分离和酶消化结合法，系自屠宰场废弃的卵巢内获取卵母细胞的常用方法，可克服机械分离时间长的特点，又减轻了酶消化过程中对细胞细微结构的破坏。腹腔镜和超声扫描活体取卵法，系自活体卵巢内获取卵… 相似文献
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为探索更为有效的黏附素提取技术,本试验以猪源ETEC F18ab菌株为材料,通过三种方法(切割法、热洗脱法及联合热洗脱与切割法)各提取200 mL菌悬液中的黏附素,应用紫外可见分光光度计测定浓度并进行SDS-PAGE分析.结果显示,应用切割法、热洗脱法和联合热洗脱与切割法所得黏附素量分别为5.94、8.84和22.47 mg,即应用联合热洗脱与切割法提取的黏附素量明显高于单纯应用热洗脱法和切割法;SDS-PAGE分析表明,联合热洗脱与切割法提取的黏附素蛋白纯度稍低于单纯应用热洗脱法和切割法.综合分析上述结果可知,联合热洗脱与切割法更适用于大量黏附素抗原的提取. 相似文献
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为探索更为有效的黏附素提取技术,本试验以猪源ETEC F18ab菌株为材料,通过三种方法（切割法、热洗脱法及联合热洗脱与切割法）各提取200mL菌悬液中的黏附素,应用紫外可见分光光度计测定浓度并进行SDS—PAGE分析。结果显示,应用切割法、热洗脱法和联合热洗脱与切割法所得黏附素量分别为5．94、8．84和22．47mg,即应用联合热洗脱与切割法提取的黏附素量明显高于单纯应用热洗脱法和切割法;SDS—PAGE分析表明,联合热洗脱与切割法提取的黏附素蛋白纯度稍低于单纯应用热洗脱法和切割法。综合分析上述结果可知,联合热洗脱与切割法更适用于大量黏附素抗原的提取。 相似文献
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大熊猫卵泡卵母细胞体外受精的初步研究 总被引：1，自引：1，他引：0
用抽吸法和切割法采集非发情季节病亡大熊猫的卵泡卵母细胞,经体外成熟培养后,用大熊猫冷冻精液进行体外受精。结果表明∶（１）在非繁殖季节,大熊猫卵巢中小腔及大腔卵泡卵母细胞仍较丰富,其大腔卵泡卵母细胞可在体外培养成熟;（２） 大熊猫的卵母细胞平均直径为（１４１±６．７）μｍ ,其胞质富含卵黄颗粒;（３）自配 Ｐａｎｄａ Ｉ Ｉ号获能液（含丙酮酸钠、肾上腺素等）可使大熊猫精子有效获能;（４） 大熊猫卵母细胞体外受精后,经培养可观察到第 ２ 极体,有的受精卵开始发生卵裂。 相似文献
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以屠宰场牦牛卵巢为材料,比较了抽吸加切割法和抽吸法2种卵母细胞离体采集方法的效率和5种成熟培养液的培养效果,并研究了卵泡位置、形态对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:在牦牛乏情期,平均每个卵巢用抽吸加切割法回收卵数极显著高于抽吸法(9.33±4.30VS4.70±2.62,P<0.01),可用卵数也极显著高于抽吸法(5.63±4.19VS4.37±2.32,P<0.01)。将牦牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)分别置于5种成熟培养液中培养,其中M199(缓冲体系为Earles盐) 10% FBS 5.0mg/LLH 1.0mg/LE2 双抗(青霉素100IU/mL和链霉素100mg/L)的成熟液效果最好,成熟率为81.33%,卵裂率为49.33%。来自卵巢表面卵泡的COCs的成熟率和卵裂率均高于来自卵巢内卵泡的COCs(分别为81.33%VS69.33%,P>0.05;49.33%VS34.67%,P<0.05)。来自明亮卵泡的COCs的成熟率和卵裂率均极显著高于来自浑浊卵泡的COCs(分别为81.33%VS33.33%,P<0.01;49.33%VS3.33%,P<0.01)。 相似文献
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猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟研究 总被引：27，自引：0，他引：27
本实验通过与2～6mm猪卵泡卵母细胞相对比，研究了猪2mm以下卵泡卵母细胞的体外成熟。结果如下(1)由2mm以下卵泡获得的小(直径100.29±7.9μm)、中(109.36±3.71μm)和大(118.90±2.46μm)3类卵母细胞培养48h的成熟率分别为0、22.31％和45.45％。(2)2mm以下卵泡卵母细胞的成熟率(52.63％)显著低于2～6mm卵泡卵母细胞的成熟率(80.39％)。(3)以含PFF的培养液培养2mm以下卵泡卵母细胞其成熟率(53.54％)显著高于不含PFF的对照组(22.77％)。(4)在培养的前24h加入PMSG、后24h去除PMSG，其成熟率(41.86％)与含PMSG的培养液连续培养48h的成熟率(50.0％)无显著差异，而显著高于前24h不加PMSG，后24h加入PMSG培养的成熟率(5.41％)；也显著高于以下不含PMSG的培养液连续培养48h的成熟率(3.3％)。 相似文献
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This experiment was performed to clarify relationships between conditions of bovine ovaries and developmental capacity of the follicular oocytes recovered from them and to compare two methods of oocyte collection, aspiration and mincing. Follicular oocytes with surrounding intact, unexpanded cumulus recovered by follicular aspiration or by mincing of tissue from 24 pairs of ovaries were matured and fertilized in vitro. The number of follicular oocytes recovered from pairs of ovaries averaged 32.1 +/- 3.2, but the number recovered varied greatly among the 24 pairs of ovaries (range, 7 to 71). The overall rate of development to the blastocyst stage was 18% (137/771), and the average number of blastocysts produced from a pair of ovaries was 5.7 +/- 1.1 (range, 0 to 17). No relationships were found between the presence of corpora lutea or large follicles and the proportion of oocytes capable of reaching the blastocyst stage in vitro. However, a positive correlation was observed between the number of oocytes obtained from each pair of ovaries and subsequent in vitro development; the correlation was especially high for oocytes obtained by aspiration. These data suggest that the developmental capacity of bovine follicular oocytes after in vitro maturation and fertilization is correlated to the number of antral follicles aspirated from the pair of ovaries. 相似文献
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猪ESR基因一个外显子片段的克隆与序列分析 总被引：10，自引：0，他引：10
参考人、鸡、鼠的ESR基因序列，设计一对引物，采用PCR技术扩增出猪ESR基因一段DNA片段，将该片段克隆到pGEM-T Easy质粒中，重组质粒用PCR扩增和酶切分析进行阳性克隆鉴定，然后测定核苷酸序列，并推导其氨基酸序列。将测定的猪ESR基因的部分序列（332bp)与人、鼠、鸡的序列进行比较，结果表明：猪的核苷酸和氨基酸序列与人、鼠、鸡相比，同源性分别为90．06％和86．36％，85．54％和88．18％，74．10％和71．82％，显示了强的保守性，猪的核苷酸序列与人、鼠、鸡相比存在着4处特有变异，氨基酸序列aa25-30存在高变异区。 相似文献
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羊流产衣原体主要外膜蛋白基因的克隆与序列分析 总被引：6，自引：0，他引：6
将自行分离、传代培养的内蒙古地区山羊流产衣原体按常规方法分离纯化，提取衣原体基因组DNA作为模板，按照国外发表的衣原体主要外膜蛋白（MOMP）基因两端序列设计合成一对引物，用PCR方法扩增出－1.17Kb的DNA片段。利用引物上预先设计的限制性内切酶位点，将扩增片段经限制性内切酶切割后连接到pUC19质粒相应位点上，转化大肠杆菌DH5α，筛选重组子。经PCR检测和内切酶分析鉴定含MOMP基因的重组子质粒。对克隆处段进行全序列分析，结果证明得到MOMP全编码序列的基因克隆。本株衣原体MOMP编码区由1170个核苷酸组成。序列比较发现本株衣原体的MOMP基因与国外的羊流产衣原体S26／3株的MOMP基因完全相同，与B577株的MOMP基因仅有一个核苷酸的同义变异。 相似文献
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猪囊尾蚴抗原基因Ts11的克隆及其在大肠杆菌的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
PCR扩增重组噬菌体λTs11克隆的cDNA片段,与pUC18连接,得到的重组子用以测序,并进行同源性比较分析,将该片段克隆到原核表达载体pGEX-1λT中,免疫印迹筛选得到能正确表达该片段的重组子,制备该和理组子在大肠杆菌中的表达产物,进行浓度梯度SDS-PAGE和West-ern blotting分析,结果表明Ts11 cDNA片段为522 ,编码含139个氨基酸残基的多肽,在Gen-Bank和EMBL数据库均未发现同源序列,重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为41KD,能与免抗猪囊尾蚴囊液血清产生很强的免疫反应,这些结果证实分离到一个新的编码具有较强免疫原性猪囊尾缦抗原的 DNA克隆..λλ 相似文献
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环丙沙星对实验性猪支原体性肺炎的药效学研究 总被引：5，自引：0，他引：5
测定环丙沙星及对照药物对猪肺炎支原体的最小抑菌浓度，其中环丙沙星的抗支原体活性最强，最小抑菌浓度为0．01μg/ml。通过给18头健康猪气管内接种含有猪肺炎支原体的病肺悬液，复制具有典型症状的猪支原体性肺炎疾病模型，并进行环丙沙星2．5、5．0mg/kg肌注给药对实验性猪支原体性肺炎的疗效实验及血浆药物浓度监测，两组治愈率分别为83．3％（5／6）和100％（6／6）。治疗组多剂量给药期间，第1、3、5、7、9次给药后0．5及6h的血浆药物浓度，在2．5mg/kg剂量组平均为0．41μg/ml和0．17μg/ml,5.0mg/kg剂量组平均为0．71μg/ml和0．28μg/ml。两剂量组环丙沙星均无蓄积作用。 相似文献
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鸡腺胃型传染性支气管炎（综述） 总被引：15，自引：0，他引：15
1996年9月份以来，中国青岛及附近地区养鸡场20－90日龄蛋用育成鸡连续发生了一种以流泪，肿眼，伴有呼吸道症状，极度消瘦，拉稀，死亡为特征的一种新的呼吸道传染病。主要剖检表现为腺胃肿大如球状，腺胃壁增厚，腺胃粘膜出血溃疡，腺胃乳头平整融合，轮廓不清，可挤出脓性分泌物的腺胃炎症变化。本病病原通过鸡胚盲传5－6代，电镜观察到典型的冠状病毒。因为引起腺胃的特征性的病理变化，因此将此病暂定名为腺胃型传染性支气管炎。我们青岛地区鸡场的分离株定为QXIBV株。本篇从病原学、临床症状、发病机理和流行病学、免疫学、实验诊断和疾病控制方面进行综合论述。本病与肠型传支在理化特性、形态和毒力上相似，可能是同一种新的IBV变异株。 相似文献
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采用盐提、热变性处理及凝胶过滤法从鹿花盘中提取 鹿花盘蛋白质(PSAB)。PSAB经SDS-PAGE电泳呈现5条谱带，测定其分子量分别为65.57KD、2 8.179KD、21.265KD、16.758KD、13.79KD；氨基酸分析表明，鹿花盘蛋白质含有17种氨基酸 。动物实验表明，鹿花盘蛋白质能显著地增强机体的抗疲劳作用和提高肾上腺功能；对油漆 应激小鼠有明显保护作用，能显著增加小鼠红细胞数和血红蛋白的含量。表明PSAB具有滋补 强壮、养气补血的作用，是鹿花盘的活性成分之一。 相似文献