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由于浒苔染色体制备难度较大,至今还没有准确染色体数目及核型分析报道。以引发我国黄海绿潮优势种浒苔(Ulva prolifera)为研究对象,采用酶解-荧光法制备浒苔染色体,并比较分析染色体制备过程中秋水仙素预处理时间、酶解时间和滴片高度等3个关键因素对染色体制片效果的影响,以建立浒苔染色体制备方法。结果表明:用质量浓度为0.2%的秋水仙素处理12 h,染色体浓缩程度适宜,分散均匀,形态清晰;用质量浓度为2%的纤维素酶、果胶酶、离析酶,混合酶解20 h效果最好,能去除细胞壁、细胞膜和多糖物质;30 cm高度下滴片,能使细胞分散均匀,可以获得质量较高的浒苔染色体。核型分析显示,浒苔雌、雄配子体染色体数目为9条,孢子体染色体数目为18条。研究结果可为未来浒苔遗传特征分析以及浒苔功能基因定位研究奠定基础。 相似文献
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浒苔中铝的含量及存在形态分析 总被引：1，自引：0，他引：1
以浙江沿海浒苔为原料,采用连续浸提和电感耦合等离子发射光谱(ICP-OES)相结合的方法,在分析了不同海域浒苔中铝含量的基础上,重点探究了浒苔中铝的分布及存在形态,并对浸提条件进行了优化。其优化浸提参数:将浒苔粉碎至20～30目,采用0.8 mol/L的HCl溶液60°C下浸提60 min,0.8 mol/L NaOH溶液70°C下浸提60 min。结果发现,浒苔总铝含量高达1 585.25～1 776.48 mg/kg,主要以有机铝和活性铝存在。有机铝主要为可溶多糖结合态铝(Alosu)、小分子蛋白铝(Alpros)、海藻胶结合态铝(Alswg)、大分子蛋白态铝(Alpro)、纤维态铝(Alofi),分别占总铝的1.77%～2.70%、12.65%～17.11%、39.76%～42.08%、 20.31%～22.23%、 11.99%～14.51%;活性铝主要为羟基态铝[Al(OH)2+、Al3+等]、AlF和可溶性有机铝(Alosm),占总铝的8.57%～11.38%。实验结果可为浒苔的食用安全性评价和铝限量的标准制定提供科学依据。 相似文献
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以条浒苔为研究对象,以蛋白质提取率为指标,通过单因素试验确定提取条件,后采用均匀设计确定纤维素酶辅助提取工艺条件。结果表明,条浒苔蛋白质的提取条件为pH 11.0,温度60℃,时间5h;纤维素酶辅助提取条件为料液比1∶50,温度30℃,pH 5.5,时间5.5h,加酶量5.0%,纤维素酶处理后再经水提取5h,在此条件下蛋白质的提取率为30.22%~35.74%。为浒苔深加工及资源化利用,测定浒苔蛋白质的功能特性,结果表明,条浒苔蛋白质的等电点pI=3.0,在pH 7时起泡性最好,起泡性随着蛋白质溶液的浓度增加而增强,泡沫稳定性在pH 3和质量浓度2mg/ml时最好,乳化性在4mg/ml时最好,乳化稳定性在2mg/ml时最好,条浒苔蛋白质的吸油性为131.6%,60℃时溶解性最大。 相似文献
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红毛菜的超微结构 总被引：1，自引：0，他引：1
以产于福建莆田的人工栽培红毛菜为材料,对红毛菜原叶体、原孢子、果孢子、营养藻丝及孢子囊枝进行了超微结构观察.观察结果较完整地展示了红毛菜各生长细胞及组织的超微结构.研究发现红毛菜原叶体的生长发育及构造变化与生殖细胞的发生形成相关,本文描述了原叶体生长发展与无性生殖细胞发生的关系及特征.研究结果还表明,该类植物具有星状色素体和蛋白核,显示红毛菜亚纲植物特有的色素体结构;原叶体细胞色素体无围周类囊体,细胞之间无纹孔连丝,具原始红藻特征;营养藻丝细胞间有纹孔连丝,色素体具围周类囊体,表现真红藻特征;孢子囊枝细胞色素体无围周类囊体,细胞间有纹孔连丝,与原叶体、丝状体营养藻丝既有相同处又有不同之处,显示红毛菜亚纲、真红藻亚纲两纲特点. 相似文献
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龙须菜已在我国沿海从南到北广泛栽培,但其栽培周期受夏季高温的限制。本研究采用qRT-PCR和Western blot技术研究了龙须菜核酮糖-1, 5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基(rbcL)和热休克蛋白70(HSP70)对高温胁迫及3种抗逆植物激素的响应。结果显示：①高温(33 ℃)显著抑制了龙须菜rbcL转录和蛋白的表达水平,而100 μmol/L水杨酸(SA100)和50 μmol/L茉莉酸甲酯(MJ50)的添加可减轻高温的不利影响。在SA100和MJ50组中,rbcL转录表达量分别为高温组的1.31倍和1.32倍(3 h),rbcL蛋白表达量分别为高温组的1.36倍和2.10倍(24 h);并且这2种激素也能一定程度上缓解高温对藻体Rubisco活性的抑制作用,恢复Rubisco活化状态。但是50 μmol/L脱落酸(ABA50)的添加则基本上抑制了rbcL表达及Rubisco活性。②3种激素进一步促进了高温诱导的龙须菜HSP70的表达,在激素添加后,其转录水平升高0.53~1.00倍(3 h),蛋白水平升高0.93~2.45倍(24 h)。可见,植物激素SA、MJ和ABA在调控由高温引起的光合作用酶的抑制和热休克蛋白的诱导表达方面发挥了一定的作用。 相似文献
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以光镜和电镜观察条斑紫菜（Porphyra yezoensis）自由丝状体生长过程中，从营养藻丝、壳孢子囊枝到成熟的壳孢子囊枝细胞形态结构的变化，结果表明，光镜下自由丝状体在生长过程中细胞外部形态、色素体位置和颜色均发生变化；电镜观察显示了3个不同时期细胞的超微结构，主要包括细胞壁、细胞核、色素体、类囊体、内质网、蛋白核、线粒体、液泡、红藻淀粉和质体小球等。在自由丝状体的生长过程中细胞超微结构的主要变化为细胞壁增厚并产生脊突；色素体数量减少、分布位置从连续排列在细胞两侧到分散排列在细胞边缘，并且在类囊体膜之间出现空隙；红藻淀粉量增多并充满细胞间质。对这些变化与自由丝状体生长环境水温、光照强度和光照时间发生变化之间的关系进行探讨，综合分析认为，条斑紫菜自由丝状体在生长过程中，生长环境经由夏季高温、光照时间长、光照强度高到秋季温度下降、光照时间缩短、光照强度下降的变化，丝状体细胞发生细胞壁增厚、疏松，色素体数量减少，内质网面积增加，液泡、线粒体数量增多，红藻淀粉量大大增加等结构的变化。 相似文献
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为了构建中华绒螯蟹代谢过程研究的系统工具，实验在已经构建的中华绒螯蟹蛋白互作网络的基础上，首先采用邻接节点注释法对未知蛋白的分子功能进行预测。随后采用GO回溯法，构建了代谢蛋白网络并对网络中蛋白分子功能、亚细胞定位和途径分布进行了分析。分子功能注释中，确定了932个蛋白的分子功能，占所有未知分子功能蛋白的97%。最终构建的代谢蛋白互作网络包含2 045个蛋白及这些蛋白之间的15 927条互作关系。网络中94.2%(1 926/2 045)的蛋白具有亚细胞定位信息，大多分布于有膜细胞器中；96.1%的蛋白(1 966/2 045)具有分子功能信息，大多具有催化活性和结合活性。进一步对确定了分子功能和亚细胞定位的蛋白在40个KEGG子系统中的分布进行分析，发现参与翻译和氨基酸代谢过程的蛋白较多，也有一部分参与免疫和运输过程。本实验结果可为中华绒螯蟹代谢相关的蛋白功能、定位的研究提供重要的数据参考，对系统研究中华绒螯蟹代谢过程及代谢相关疾病具有重要价值。 相似文献
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海洋大型绿藻条浒苔与微藻三角褐指藻相生相克作用的研究 总被引：15，自引：0，他引：15
以种群密度为变量,采用实验生态学手段研究了大型海藻条浒苔与赤潮藻类三角褐指藻间的生长竞争关系,以及条浒苔水溶性抽提液对三角褐指藻生长的影响。结果表明,在无营养盐限制条件下,低密度条浒苔(0.3~0.7 g/L)均能抑制三角褐指藻(起始浓度104cell/ml)的生长,最大抑制率为74.5%;低起始浓度(102~103cell/ml)的三角褐指藻,对条浒苔具有促生长效应,而高起始浓度(104~105cell/ml)的三角褐指藻在一定程度上抑制条浒苔的生长。条浒苔水溶性抽提液(0.3~0.7 g/L)对三角褐指藻的生长皆表现出明显的抑制效应,平均抑制率为75.2%,抑制效果较条浒苔鲜组织更为明显;其最大抑制效应(84.8%)表现在接种后的第8天,三角褐指藻的生长抑制量随条浒苔水溶性抽提液浓度的增加而增大。表明条浒苔可能通过相生相克作用影响共培养体系中三角褐指藻的生长。 相似文献
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本文介绍了用电子显微镜观察坛紫菜壳孢子结构的结果。在电镜观察中，可见壳孢子外围具有一层很薄的质膜。细胞质内有一个轴生星状色素体，色素体中央有一个不被界膜的造粉核。细胞质内有少量脂质体。质体内布有许多质体小球。色素体的质体基质是单独的，彼此被居间层分开，色素体界膜和质体基质之间可见有相连接之处。类囊体表面布有藻胆体颗粒．细胞质内还可以见到线粒体、液泡、游离的红藻淀粉颗粒及核糖核蛋白体。细胞核有双层核膜，核膜外围也附有核糖核蛋白体，核膜上能见到核孔。细胞内的核仁，是一个致密而又结实的球体，细胞核与核仁之间无界膜分隔。 相似文献
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两株蛋白核小球藻 rbcS cDNA 全序列的克隆和分析 总被引：1，自引：0，他引：1
以2株蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)F-9和820为实验材料,根据已知绿藻rbcS基因设计简并引物,分别克隆到2条245bp的cDNA片段,以此片段为基础使用cDNA末端快速扩增(RACE)技术,获得了2条长度分别为861bp和907bp的rbcS基因。序列分析表明,蛋白核小球藻F-9和820的rbcS分别编码181和184个氨基酸,编码区具有与高等植物rbcS保守序列YYDGRYWTMWKLPMFG相类似的结构,起始密码子附近有Kozak保守序列(A/GXXATGG),3′非翻译区有加尾信号TGTAA。同源性分析结果表明,F-9与蛋白核小球藻(GenBank登录号BAE48226)的相似性最高(91%),而F-9与820、F-9和普通小球藻(C.vulgaris)的相似性分别为64%和50%。这2条rbcS基因与其他绿藻和高等植物也表现了广泛的同源性,但相似性不高。该研究旨在为rbcS基因的功能和表达研究奠定基础。 相似文献
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草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白在毕赤酵母中表达的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
根据GeneBank中草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)104株VP6蛋白的全基因序列(HM234682)设计一对特异引物,以提取的GCRV-104核酸为模板,采用RT-PCR技术扩增VP6蛋白编码基因,并将其克隆到含强启动子AOXⅠ的毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZB上。重组酵母质粒pPICZB-VP6经SacⅠ线性化,电击转化到毕赤酵母KM71菌株中,Zeocin抗性平板上筛选高拷贝转化子。阳性转化子在30℃,0.5%(V/V)的甲醇添加量的条件下,连续诱导3 d,表达产物经SDS-PAGE和Western-Blotting检测,结果表明成功实现了GCRV-104 VP6蛋白在毕赤酵母中的胞内表达,重组VP6蛋白相对分子质量约46 000,与天然VP6蛋白相对分子质量接近,并且可与鼠抗草鱼GCRV-104 VP6蛋白的多克隆抗体特异性结合。 相似文献
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L. S. HÅVARSTEIN C. ENDRESEN B. HJELTNES K. E. CHRISTIE J. GLETTE 《Journal of fish diseases》1990,13(2):101-111
Abstract. Atlantic salmon, Salmo salar L., responded to intraperitoneal injection of formalin killed Vibrio salmonicida or live infectious pancreatic necrosis virus ( ipnv ) by producing specific antibodies. The antibody titre varied significantly within the group tested. Western blot analysis demonstrated that high-titre antisera recognized two major bacterial antigens with molecular weights of 12–15 kD and 22–27 kD. In addition, a few narrow bands with higher molecular weights were observed. An antiserum raised against IPNV recognised two major antigens corresponding to the structural proteins of the virus. E lisa and Western blot analysis showed that the immune serum raised against Vibrio salmonicida reacted slightly with Vibrio anguillarum , whereas no reaction to Yersinia ruckeri or Aeromonas salmonicida was detected. Indirect elisa and an elisa competition assay revealed that the immune serum raised against the N1 serotype was specific for this serotype of ipnv . The results demonstrate that Atlantic salmon has a humoral immune system capable of producing antibodies which discriminate between related bacterial antigens and between different serotypes of a virus. 相似文献
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Menghe H. Li David J. Wise Bruce B. Manning Edwin H. Robinson 《Journal of the World Aquaculture Society》2003,34(2):223-228
A laboratory study was conducted to evaluate effects of dietary total protein and animal protein source and concentration on growth and feed efficiency of juvenile channel catfish Ictalurus punctutus and their response to Edwardsiellu ictuluri challenge. Eight diets evaluated were: three diets containing either 28, 32, or 36% crude protein with 6% menhaden fish meal and 6% meat and bonehlood meal and five diets containing 32% crude protein with either no animal protein, 68 or 12% menhaden fish meal, or 6% or 12% meat and bonehlood meal, respectively. Twenty channel catfish with an average weight of 6.6 g/fish were stocked into each of forty 110-L flow-through aquaria (five aquaridtreatment). Fish were fed to approximate satiation twice daily for 9 wk. Fish in each tank were then exposed to E. ictaluri . There were no differences in feed consumption, weight gain, feed efficiency, and survival before and after challenge among fish fed diets containing 28, 32, or 36% protein with 6% menhaden fish meal and 6% meat and bone/ blood meal. Fish fed a 32% all-plant protein diet had weight gain and feed efficiency similar to fish fed diets containing 12% menhaden fish meal, but had a higher weight gain than fish fed a 32% protein diet containing 6% meat and bonehlood meal. No significant differences were observed in survival after E. ictuluri challenge among fish fed diets containing the various levels of animal proteins. Results indicate that dietary protein levels varying from 28% to 36% do not appear to affect growth, feed efficiency. and E. icraluri resistance or susceptibility in fingerling channel cattish fed to satiation and raised from approximately 7 to 56 g under laboratory conditions. Data also demonstrate that a 32% all-plant protein diet can be fed to small fingerling channel catfish without adversely affecting growth, feed efficiency, or resistance to E. ictuluri . 相似文献
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Regulators of G-protein signaling (RGS) proteins are a family of proteins, which accelerate GTPase-activity intrinsic to the
alpha subunits of heterotrimeric G-proteins and play crucial roles in the physiological control of G-protein signaling. Here,
yellow grouper RGS16 protein was expressed in Escherichia coli and purified by Ni–NTA affinity chromatography. The expression level of the fusion protein was up to 30% of the total cellular
protein.Western blotting analysis showed that a band with the molecular mass of about 21 Kda was detected. The purified recombinant
protein was used to prepare polyclonal antibody, and antiserum obtained was highly specific with the titer of over 1:32,000.
Additionally, RGS16 protein was expressed in the Tn-5B1-4 insect cells. Western blotting analysis revealed that the expressed
protein had immunoreactivity. 相似文献
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比较了3种不同的牙鲆淋巴囊肿病毒纯化方法,优化后的方法如下：剥离囊肿表面薄膜,收集内容物,匀浆后再用超声波细胞破碎仪破碎,反复冻融,650×g、1800×g差速离心,30%（W/W）蔗糖垫底超速离心（78500×g）浓缩病毒,最后蔗糖密度梯度超速离心（78500×g）纯化病毒。电镜观察发现,出现在47%～52%蔗糖密度区域的病毒带含有多量、纯净和结构一致的病毒粒子。此外,利用制备的兔抗血清对不同地区的病毒进行了免疫特性分析,Western blotting检测显示来自威海、青岛及秦皇岛3个地区的淋巴囊肿病毒反应结果是一致的,均有3条蛋白带发生反应,其分子量分别为125、66和55kDa。 相似文献
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The deceptive marketing of imported basa, Pangasius bocourti (Sauvage), fillets as catfish has resulted in serious economic losses to the channel catfish, Ictalurus punctatus (Rafinesque), industry in the US. The similar appearance of channel catfish and basa fillets created a need for a rapid method to differentiate uncooked, cooked and/or marinated channel catfish fillets from basa fillets and other fish products. A monoclonal antibody (MAb) specific for a 36.8 kDa channel catfish fillet protein was produced and characterized by an indirect enzyme‐linked immunoabsorbent assay (ELISA) and Western blotting. This MAb was used to develop an indirect ELISA specific for a fillet protein unique to fish of the genus Ictalurus. Using this ELISA, 100% of raw and cooked channel catfish fillets were correctly identified and differentiated from other fish in a single‐blind study. These results show that the indirect ELISA using MAbs specific for unique Ictalurus sp. fillet proteins is a rapid and sensitive method for the identification of raw and cooked catfish fillets. 相似文献