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大蒜茎尖玻璃化法超低温保存技术研究 总被引：6，自引：0，他引：6
用山东‘苍山大蒜’进行了茎尖玻璃化法超低温保存技术的研究。5～8 mm大蒜茎尖在MS +0.7 mol/L蔗糖的固体培养基上预培养7 d, 切取3.0～3.5 mm的茎尖, 在20℃下经60% PVS2 处理60 min,再于0℃下用PVS2 处理5～60 min后, 换适量新鲜PVS2 , 浸入液氮。保存2 d或1个月后取出, 在37℃水浴中解冻2 min, 用MS + 1.2 mol/L蔗糖液体培养基洗涤2次, 每次10 min, 经过恢复培养, 茎尖成活率最高可达到100%。 相似文献
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以青岛百合茎尖为试材,研究了外植体的选择、预培养的蔗糖浓度、预培养时间、包埋预处理方法、PVS2处理时间对百合存活率的影响。结果表明:小鳞茎在4℃冷锻炼培养28d后,剥取2～3mm的茎尖为试验材料,在蔗糖浓度0.4mol/L的MS+100g/L海藻糖+1mg/LABA的培养基上,预培养3d,然后加0.4mol/L蔗糖和2mol/L甘油、3%褐藻酸钠进行包埋预处理,在0℃条件下用PVS2处理60min,投入液氮保存1h,38℃解冻2min、洗涤后转接至恢复培养基上暗培养7d,用TTC检测存活率最高可达到67.5%。 相似文献
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番木瓜茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生 总被引：12，自引：3，他引：12
研究了番木瓜( Carica papaya L. ) 茎尖玻璃化法超低温保存的一些影响因素。结果表明: 无菌试管苗在MS + BA 0.5 mg/L + NAA 0.1 mg/L + GA3 1.0 mg/L 的培养基上生长较好。番木瓜茎尖超低温保存较佳体系是: 3～5 cm的茎尖在含有5 %二甲基亚砜(DMSO) 培养基上预培养3 d , 解剖镜下剥取含1～2 个叶原基的茎尖(1.5～2.5 mm长) , 先在室温下于60 %的玻璃化溶液(PVS2) 中装载40～50 min , 再用PVS2于0 ℃下处理30 min , 换1 次PVS2 溶液后迅速投入液氮。保存24 h 后, 在40 ℃水浴中化冻, 用1.2 mol/L 的蔗糖培养液洗涤两次, 转入继代培养基上再培养, 成活率和再生率分别达53.7 %和52.6 %。再生植株生根后可移栽成活。 相似文献
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香蕉茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生 总被引：12，自引：0，他引：12
以香蕉(Musa spp. ) 为试材, 对其离体培养茎尖玻璃化法超低温保存影响因素进行研究。结果表明, 不定芽在MS + 3.0～5.0 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA的培养基上分化较好。香蕉茎尖超低温保存较佳体系是: 2.0～3.0 cm的茎尖在含0.4 mol/L蔗糖培养基上预培养2 d, 剥取带1～2个叶原基的茎尖(长1.0～1.5 mm) , 室温(25℃) 下装载液(MS + 2 mol/L甘油+ 0.4 mol/L蔗糖) 装载20～30 min, 然后用玻璃化溶液( PVS2 ) 于0℃下处理40 min, 换1次PVS2后迅速投入液氮。保存至少1 h后, 在40℃水浴中化冻90 s, 用1.2 mol/L蔗糖培养液洗涤2次, 每次10 min, 然后转入含0.3 mol /L蔗糖的MS培养基上,暗培养10～15 h后转移到含0.5 mg/L 62BA的MS培养基中, 暗培养1周后转移到正常光下, 3个香蕉品种(巴西蕉、广东香蕉2 号、广东粉蕉1 号) 的成活率分别为75.9%、40.0%和69.6% , 再生率分别为63.4%、35.0%和63.4%。再生植株生长和分化正常, 生根后可移栽成活。 相似文献
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玻璃化法超低温保存猕猴桃离体茎尖及其植株再生 总被引：6，自引：0，他引：6
以中华猕猴桃矮型种质为离体培养材料, 建立试管无性系, 对其离体茎尖的玻璃化法超低温保存技术进行研究, 探讨猕猴桃种质长期保存的适宜途径。结果表明, 含1～2个叶原基(1.5～2.5 mm) 的茎尖, 在5%二甲基亚砜(DMSO) + 5%蔗糖+MS培养基上预培养4 d后, 于室温下用2 mol/L甘油+ 0.4 mol/L蔗糖预处理30 min, 再在0℃下用玻璃化液(PVS2 ) 脱水处理40 min并迅速投入液氮中, 保存24 h后接种至继代培养基上再培养, 成活率和再生率分别为56.7%和51.6%。再生植株生根后可移栽成活。 相似文献
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以玻璃化法进行"童子一号"草莓离体茎尖的超低温保存研究,探讨了低温锻炼时间、预培养时间、预处理时间、PVS2处理时间等对存活率的影响。结果表明:将4℃条件下低温锻炼30d的健壮草莓苗茎尖,接种在固体预培养培养基中预培养4d,预处理30min后,吸出预处理液,加入PVS2,0℃处理80min后,更换新鲜的PVS2,并迅速投入液氮60min后,置于40℃快速化冻1min;室温洗涤3次并取出茎尖,接种到再生培养基恢复培养;成活率最高可达43.00%,且再生植株分化正常。 相似文献
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马铃薯茎尖小滴玻璃化法超低温保存及其再生植株的遗传稳定性 总被引：1，自引：0，他引：1
以马铃薯试管苗为试材,对其茎尖小滴玻璃化法超低温保存的影响因素进行了研究,并对再生植株进行了遗传稳定性检测。结果表明,马铃薯茎尖依次在含有0.3 mol · L-1和0.5 mol · L-1蔗糖的液体MS培养基中预培养各1 d后,在0 ℃下PVS2处理30 min,转到铝箔条上PVS2小滴上（约15 μL）,将粘有茎尖的铝箔条在液氮里蘸一下,然后直接装入盛满液氮的冷冻管中,投入液氮至少保持1 h。室温下用含有1.2 mol · L-1蔗糖的MS液体培养基解冻并洗涤30 min后,接种到MS + 0.5 mg · L-1 Zeatin + 0.1 mg · L-1 NAA＋1.0 mg · L-1 GA3恢复培养基上,存活率和再生率最高达79.91%和62.52%。通过SSR分子标记检测,再生植株的遗传稳定性没有发生改变。 相似文献
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以生姜的脱病毒试管苗在繁殖培养基上培养25d获得的丛生芽为试材,探讨生姜超低温玻璃化法保存的最优程序。结果表明:采用继代培养45d的丛生芽,切取2~3mm,于0.5mol/L蔗糖浓度的MS培养基内预培养2d,60%PVS2室温处理5min,100%PVS2 0℃下处理30min,迅速投入液氮,48h后,37~40℃水浴快速化冻2min,1.2mol/L蔗糖的MS培养液洗涤20min,在MS+0.5mg/L BA+0.1mg/L NAA+0.3mg/L GA3+30g/L蔗糖+7g/L琼脂的培养基上恢复培养的成活率最高,为57.7%。 相似文献
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玻璃化法超低温保存柑桔茎尖及植株再生 总被引：60，自引：7，他引：60
采用玻璃化法对柑桔茎尖的离体超低温保存进行了研究。约10 mm 长的柑桔茎尖于含5 %二甲基亚砜(DMSO) 的培养基上预培养3 d , 切取2～2. 5 mm 长的茎尖, 室温下60 %玻璃化溶液2 (PVS2) 装载20～30 min , 然后用PVS2 于0 ℃处理50～60 min , 换入新鲜的PVS2 , 迅速投入液氮中, 24 h 后在40 ℃水浴中迅速化冻, 再用1. 2 mol/L 蔗糖培养基洗涤2次, 接种于含BA 1. 0 mg/L 的MT培养基上, 26 ℃暗培养1 周后转于正常光下培养。枳壳茎尖超低温保存后用氯化三苯基四氮唑(TTC) 法检测, 成活率为100 % , 培养再生率达到90 % ,再生后的苗能正常生根, 与对照没有形态上的变异, 移栽可成活。 相似文献
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朝鲜白头翁的组织培养与快繁技术 总被引：3，自引：0，他引：3
以朝鲜白头翁的叶片、叶柄和花梗为材料,研究了细胞分裂素zeatin、kinetin、6-BA 和生长素IAA 组合对诱导不定芽的影响;以不定芽为材料研究了植物生长调节剂对不定芽的增殖和生根的影响;研究了不同基质配比对组培苗移栽成活的影响。结果表明: 1）叶柄和花梗接种在MS + 0.5 mg · L-1 zeatin +0.05 mg · L-1 IAA 培养基培养6 周后不定芽再生率为100%。2）不定芽切成小块或单株带类似愈伤的组织块转到MS + 0.5 mg · L-1 zeatin + 0.05 mg · L-1 IAA 或MS + 1.0 mg · L-1 6-BA + 0.05 mg · L-1 IAA 的培养基时不定芽的增殖与生长良好。 3）在增殖培养基中长至3 cm 以上的小植株转入到1/2 MS + 1.5 mg · L-1NAA的生根培养基中培养42 d 后,生根率高达93%,平均根长12.3 cm,每株平均根数11 条,且可缩短生根时间。4）组培苗移栽到东北山土和珍珠岩比例为2︰1 的混合基质时,成活率高达66.7%。 相似文献
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通过玻璃化超低温处理脱除草莓轻型黄边病毒(SMYEV)研究 总被引：4，自引：0，他引：4
以草莓品种明宝为材料,取茎尖做初代培养,继代扩繁5次后,取2mm左右的茎尖,利用玻璃化超低温技术对SMYEV进行脱除,并利用结合内标的多重RT-PCR技术对再生植株进行病毒检测。结果表明,在病毒脱除过程中,预培养蔗糖浓度为0.5mol/L,处理3d;装载处理为25℃,60min;玻璃化处理为0℃,120min;液氮处理60min后,进行40℃水浴2min,草莓茎尖的存活率为76%,而草莓轻型黄边病毒的脱除率为95%。只有通过液氮处理才可以脱除该病毒,液氮处理前的玻璃化处理脱毒率为0。利用超低温脱毒法可以简便有效地脱除SMYEV。 相似文献
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以国家果树种质资源枇杷圃中12份枇杷种质为试材,开展了枇杷茎尖愈伤组织的诱导和种质体外保存研究。结果表明,将春季采集的枇杷茎尖不经水冲洗,直接接种于MS＋6-BA 1.0 mg.L-1＋NAA 1.0mg.L-1培养基上培养,较容易诱导出愈伤组织;不同基因型的枇杷茎尖诱导出的愈伤组织存在较大差异,诱导率最高的是野生92号,为96.2%;诱导率最低的是黄岩5号,没有诱导出愈伤组织。采用MS＋NAA3.0 mg.L-1＋6-BA1.0 mg.L-1＋蔗糖6%（2～3代）→MS培养基（1～2代,其中有一次使用液体培养）→MS＋NAA3.0 mg.L-1＋6-BA1.0 mg.L-1＋蔗糖6%（2～3代）循环继代路线,在弱光（光照度150 lx）下培养,能较好地保存枇杷茎尖愈伤组织,胚性没有减弱,生长势较好且仍为黄白色颗粒状。试验结果为枇杷种质体外保存、原生质体培养、细胞融合、遗传转化及离体诱变等研究打下基础。 相似文献
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新铁炮百合单倍体植株的诱导 总被引：3，自引：0，他引：3
在新铁炮百合‘雷山1 号’减数分裂和小孢子发育进程研究的基础上,确定了与小孢子不同发育时期相对应的花蕾长度和花药颜色等外部形态特征;筛选出‘雷山1 号’诱导愈伤组织适宜的培养基： 基本培养基为MS 改良培养基,添加2,4-D 0.5 mg · L-1、KT 4.0 mg · L-1,蔗糖浓度30 ~ 90 g · L-1。对不同发育阶段花药诱导培养的结果显示：最佳诱导时期为小孢子发育的早、中期,即花蕾长度为24 ~ 25 mm 时,诱导率达44%。将花药愈伤组织转移至MS 添加2.0 mg · L-1NAA,可诱导分化形成花粉植株,分化率达100％,其中单倍体达43%。 相似文献
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利用枣离体叶片直接再生完整植株 总被引：2，自引：0，他引：2
以冬枣组培苗叶片为材料进行离体再生培养, 通过对再生条件的系统研究, 实现了离体叶片直接再生不定芽并获得完整植株。试验结果表明: 麦芽糖为离体叶片直接再生的适宜碳源; AgNO3可显著提高叶片不定芽再生率和出芽数, 在TDZ 1.0 mg·L - 1 +AgNO3 1.0 mg·L - 1的条件下, 不定芽直接再生率高达97.3% , 出芽数达14.4个。但麦芽糖不适宜继续作为不定芽伸长培养的碳源, 再生的不定芽需在MS+ 蔗糖40 g·L - 1 + 琼脂4 g·L - 1 +BA 1.0 mg·L - 1 + IBA 0.5 mg·L - 1的培养基上进行增殖, 增殖系数为3.2。在IBA1.0 mg·L - 1条件下, 生根率达87.3%。 相似文献