瘤胃微生物生态研究方法评述     

淡瑞芳  张海涛  龙瑞军  鱼小军 《草业科学》2007,24(7):77-82

瘤胃微生物生态研究方法主要经历了微生物纯培养、混合培养、微生物分子生物学技术[(从瘤胃中提取DNA,进行PCR-16S rDNA(rRNA)技术]、变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术),在不同程度上揭示了瘤胃微生物群落丰富的多样性和生态功能.但由于各种方法本身的局限性,限制了人类对瘤胃微生物的全面了解,现代生物技术和传统微生物研究方法的配合将为瘤胃微生物生态研究提供较好的前景.  相似文献   

DGGE技术在瘤胃微生物多态性研究中的应用     

李启琳  ;李燕鹏  ;王士长 《家畜生态》2008,(3):101-103

利用传统的方法很难鉴别瘤胃微生物的差异,变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术就很好地解决了该问题。DGGE是一种新型的用于检测核酸变异和点突变的电泳方法,具有可靠性强、重现性高、方便快捷等优点,可应用于瘤胃微生物群落多样性和动态性分析。  相似文献   

DGGE技术在瘤胃微生物多态性研究中的应用     

李启琳  李燕鹏  王士长 《中国牛业科学》2008,34(1):12-14

变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术是一种新型的用于检测核酸变异和点突变的电泳方法,具有可靠性强、重现性高、方便快捷等优点,可应用于瘤胃微生物群落多样性和动态性分析.本文对DGGE技术的原理、优点、在瘤胃微生物群落多样性和动态性分析方面的应用结果及今后的发展方向进行了全面论述,为更好地认识和应用该技术提供了参考.  相似文献   

DGGE技术及其在瘤胃微生物多样性研究中的应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

奚晓琦  王加启  卜登攀  栾广春  于萍  刘开朗  魏宏阳  周凌云 《中国奶牛》2008,(10):26-28

基于可靠性强、重现性高、方便快捷等优点,变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术已经成为微生物群落多样性和动态分析的强有力工具。本文在阐述PCR—DGGE原理及流程的的基础上,对DGGE技术在瘤胃微生物多样性研究中的具体应用及其局限性与改进方法进行了全面阐述。  相似文献   

牛瘤胃微生物定量测定方法研究进展     

荆元强  宋恩亮  杨维仁  刘桂芬  谭秀文  万发春 《动物医学进展》2011,32(7):93-96

瘤胃微生物数量测定一直是反刍动物营养的难点之一.传统的定量方法有亨氏滚管法和最大可能计数法(MPN)两种,方法简单,但工作量大,测定结果与实际存在偏差.现代分子定量技术的出现和发展,为瘤胃微生物数量的测定提供了一种新的思路和方法.如核算分子杂交技术、变性梯度凝胶电泳(DGGE)或温度梯度凝胶电泳(TGGE)、定量PCR...  相似文献   

瘤胃微生物定量方法的研究进展   总被引：3，自引：0，他引：3  

郭同军  王加启  王建平  霍小凯  卜登攀  魏宏阳  周凌云  刘开朗 《中国畜牧兽医》2009,36(4):19-24

当前人们对瘤胃中微生物的认识只有10%～20%,不断改进研究技术和手段,才能大大推动瘤胃微生态领域的研究。作者阐述了瘤胃微生物传统定量方法（滚管计数法和最大或然数法）和分子生物学定量方法,如探针杂交技术、荧光原位杂交、DGGE、定量PCR和流式细胞计量术（flow cytometry )等的应用状况及其各自的优缺点。  相似文献   

运用PCR-DGGE分析比较瘤胃中不同饲料固相粘附微生物区系   总被引：4，自引：0，他引：4  

冯薇  王加启  刘开朗  卜登攀  李旦  赵圣国  杨开伦 《畜牧兽医学报》2010,41(12)

通过研究奶牛瘤胃中苜蓿、青贮玉米和羊草3种饲料固相粘附微生物菌群结构,分析比较附着于不同粗饲料微生物区系的差异。选择3头健康且体质量相近的装有永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛,将苜蓿、青贮玉米和羊草分别装入尼龙袋,在瘤胃中孵育24h后取出,PBS洗脱获得固相粘附微生物,提取总DNA,采用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)分析群落结构,选取清晰条带测序后构建系统发育树。不同样品的DGGE图谱条带的数目和条带颜色深浅有一定差异;苜蓿与青贮玉米和羊草间相比相似性较低,青贮玉米与羊草间的相似性较高;3种饲料及瘤胃内容物固相粘附微生物的Simpson多样性指数差异显著(P0.05),Shannon-Wiener多样性指数差异不显著(P0.05);3种饲料固相粘附微生物条带近源种分别归属Butyrivibrio sp.、Fibrobacter sp.、Prevotella sp.、Succiniclasticum sp.、Pseudobutyrivibrio sp.5个属。3种饲料固相粘附微生物的种群构成存在差异。  相似文献   

分子生物学技术在瘤胃细菌多样性研究中的应用     

李积兰  刘书杰  孙璐  崔占鸿 《青海畜牧兽医杂志》2015,(3):45-46

反刍动物的瘤胃是一个复杂的厌氧微生态发酵系统,研究其瘤胃微生物区系组成与功能已成为反刍动物营养学的重要内容,分子生物学技术是开展瘤胃微生物研究的重要技术手段。本文就变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术、16S r DNA序列分析、宏基因组技术、DNA芯片技术等在瘤胃细菌多样性研究中的应用情况进行了总结与归纳,为今后开展此方面研究工作提供技术参考。  相似文献   

采用PCR-DGGE技术对放牧羊补饲糖蜜尿素舔砖后细菌种群结构的分析     

《黑龙江畜牧兽医》2015,(19)

为了研究补饲糖蜜尿素舔砖对放牧羊瘤胃中细菌种群结构随时间变化的规律,试验采用基于16S DNA的PCR变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,在放牧羊舔食舔砖的不同时间点取样,进行瘤胃液的DGGE分析。结果表明:舔食糖蜜尿素舔砖后放牧羊瘤胃细菌主要以拟杆菌门、硬壁菌门为主。在舔食15 d后瘤胃细菌多样性显著增加,舔食30 d后瘤胃细菌多样性达到最高。糖蜜-尿素对瘤胃微生物种群具有明显的筛选作用,舔食前以Capnocytophaga canimorsus为优势菌群,舔食一段时间后各菌群或出现或消失,呈动态变化和定植过程;30 d后瘤胃种群结构基本保持稳定,Prevotella ruminicola Bryant处于优势地位。说明舔食舔砖前后细菌种群结构存在明显差异,舔砖可明显增加瘤胃微生物多样性。  相似文献   

传统技术与现代分子生物学技术在瘤胃微生物多样性方面的研究进展     

成玉梅  邓卫东  毛华明 《动物医学进展》2006,27(Z1):51-54

为了提高反刍动物利用瘤胃微生物的效率,微生物学家和动物营养学家都致力于瘤胃微生物的培养分离纯化和生理生化特性研究.但是由于瘤胃微生物大多是厌氧性的,很难培养成功,传统技术在瘤胃微生物的研究上受到很多限制.随着科学技术的进步,现代分子技术也开始逐渐渗透到瘤胃微生物的研究中来.文章将瘤胃微生物多样性研究的方法简要划分为纯培养技术,现代分子生物学技术和上述两种方法的联合使用,并重点阐述了不同方法的优缺点,展望了瘤胃微生物多样性研究方法的发展前景.  相似文献