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1.
为探索双香豆素(dicoumarin, DIC)抑制斜纹夜蛾Spodoptera litura卵巢细胞SL-221增殖及作用机制,首先,采用CCK-8法测定双香豆素等21个酚类化合物对SL-221细胞的毒性;其次,通过倒置显微镜观察4μg/mL双香豆素处理细胞48 h后其形态变化,并结合流式细胞术研究双香豆素对SL-221的细胞周期、线粒体膜电位及凋亡的影响;最后,通过实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)探索磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/雷帕霉素靶蛋白(target of rapamycin, TOR)营养信号通路的下游关键基因的表达变化。结果表明,21个酚类化合物中双香豆素对SL-221细胞的增殖抑制活性最显著,且呈现明显的浓度依赖性,其48 h的IC50为0.85μg/mL,对细胞的增殖抑制活性是阳性对照印楝素(IC50为7.20μg/mL)的8.47倍。4μg/mL双香豆素处理SL-221细胞48 h后,显微镜下可见细胞肿胀、膜破裂及大量凋亡小体;流式细胞术分析发现,双... 相似文献
2.
为明确没食子酸(GA)对棉铃虫生长发育的影响和作用机理,用叶碟法对比了没食子酸等21个酚类化合物对棉铃虫幼虫的拒食活性,并从中选择了没食子酸等3种化合物测定了其对棉铃虫1龄末幼虫的拒食中浓度(AFC50),随后采用饲料混毒法检测了没食子酸对棉铃虫生长发育的影响,进一步测定了2龄幼虫中肠病理变化和生长发育相关基因的表达变化。结果表明：所测21种酚类化合物中,没食子酸对1龄末幼虫的拒食活性最显著,拒食中浓度为50.21 mg/L。以含10μg/g没食子酸的饲料饲喂棉铃虫幼虫后发现其显著抑制幼虫体重、化蛹率、羽化率和卵孵化率。苏木精—伊红染色法检测到没食子酸可诱导中肠细胞大量凋亡、杯状细胞和消化细胞膨大并呈现空泡化、围食膜消失等病理变化;qPCR分析发现没食子酸可诱导InR、p53、Atg8和G6Pase基因显著上调表达。综上,没食子酸可显著抑制棉铃虫的生长发育,同时损伤中肠,导致营养代谢紊乱,具备开发成为新型植物源杀虫剂的潜力。 相似文献
3.
以MTT法测定了虫螨腈等杀虫剂对斜纹夜蛾(Spodoptera litura,SL)细胞的毒力,并用流式细胞仪测定了虫螨腈对SL细胞线粒体膜电位的影响。结果表明: 100 μg/mL的氟虫腈、丁醚脲、虫螨腈处理SL细胞24 h后,对细胞增殖的抑制率依次为14.57%、22.91%、 52.53%;虫螨腈对SL细胞24和48 h的IC50值分别为57.56和2.60 μg/mL;50、100、200 μg/mL虫螨腈处理细胞24 h后,与对照相比,SL细胞线粒体膜电位分别降低46.87%、57.17%、73.31%,其下降值与药剂浓度呈正相关。 相似文献
4.
将从东亚钳蝎中克隆到的兴奋型昆虫毒素基因(BmK IT)同源重组到苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)基因组中,得到重组病毒AcMNPV-BmK IT,抗虫试验表明重组杆状病毒的杀虫活性明显优于野生型病毒,但AcMNPV介导的BmK IT的抗虫分子机制尚未阐明。本试验从草地贪夜蛾Sf9细胞中克隆获得了凋亡相关基因Sfp53,制备了抗体,分析了AcMNPV-BmK IT对Sfp53表达的影响,结果表明被重组病毒感染的细胞所表达的Sfp53时间与表达量与野生型相比都有所提前和提高,说明重组病毒可加速细胞的凋亡;同时通过半定量PCR分析了AcMNPV-BmK IT感染Sf9细胞时病毒抗凋亡基因iap2的表达,结果表明重组型病毒抗凋亡基因iap2表达量减少。以上结果在细胞分子水平上解释了AcMNPV-BmK IT杀虫活性提高的原因。 相似文献
5.
使用低浓度H2O2和高浓度NaCl诱导稻瘟病菌的凋亡,检测了产生的凋亡特征。结果显示：诱导后稻瘟病菌具有典型的凋亡特征,如胞内活性氧累积、磷脂酰丝氨酸从细胞膜的内表面转移到外表面、染色体浓缩和DNA断裂。进一步研究发现：凋亡关键性酶类caspase的抑制剂Z-VAD-FMK能够显著影响稻瘟病菌的孢子萌发和附着胞形成过程。典型的稻瘟病菌孢子由3个细胞组成;在Z-VAD-FMK的作用下,2个以上细胞同时萌发产生芽管的比例由34.1％增加到66.0％,同时形成附着胞的源细胞也以顶端细胞为主转变为以基部细胞为主。这些结果说明凋亡参与了稻瘟病菌的孢子萌发和附着胞形成过程。 相似文献
6.
为探讨大豆疫霉Phytophthora sojae细胞凋亡潜在的调控机制,根据已知的细胞凋亡蛋白,利用在线工具BLASTP、pFAM和SMART在大豆疫霉蛋白组数据库中鉴定细胞凋亡同源蛋白并构建其进化树,通过转录组数据和实时荧光定量PCR技术分析细胞凋亡相关基因在大豆疫霉生长、发育及侵染不同时期的表达情况。结果显示:在大豆疫霉中共鉴定到13个细胞凋亡同源蛋白,包括核酸内切酶G(PsNUC1)、细胞色素c(PsCYCS)、凋亡诱导因子(PsAIF)、丝氨酸蛋白酶(PsHtrA-1、PsHtrA-2和PsHtrA-3)、多聚ADP核糖聚合酶(PsPARP-1、PsPARP-2和PsPARP-3)和TatD核酸酶(PsTatD1、PsTatD2、PsTatD3和PsTatD4)。在进化上,PsNUC1、PsCYCS、PsAIF、PsHtrA-1、PsPARP-1、PsPARP-2、PsPARP-3、PsTatD1和PsTatD2与人及秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans的同源蛋白亲缘关系较近,而与真菌相关蛋白亲缘关系较远,PsHtrA-2、PsHtrA-3、PsTatD3和PsTatD4与酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae相关蛋白相似度更高,说明大豆疫霉细胞凋亡蛋白在进化中发生了较大变异。大豆疫霉细胞凋亡相关基因PsHtrA-1和PsRARP-1在孢子囊阶段诱导表达,PsHtrA-2和PsRARP-2在游动孢子阶段上调表达,PsAIF、PsHtrA-3、PsRARP-1和PsRARP-2在侵染阶段明显诱导表达,PsCYCS在侵染阶段下调表达。细胞凋亡相关基因在大豆疫霉不同阶段的表达模式有较大差异,说明细胞凋亡在大豆疫霉生长、发育及致病过程中具有重要作用。 相似文献
7.
采用3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑(MTT)检测法、荧光显微镜细胞形态观察法和流式细胞仪(flow cytometry,FCM)技术,研究了辣椒碱对离体培养斜纹夜蛾Spodopt-era litura(SL)细胞增殖及凋亡的影响。结果表明:辣椒碱对SL细胞24 h的IC50值为46.89μg/mL,与鱼藤酮差异不显著。40μg/mL辣椒碱处理SL细胞24h后,细胞形态明显不规则,呈现出凋亡的典型症状。10、20和40μg/mL辣椒碱处理SL细胞48h后,细胞早期凋亡率分别为13.56%、18.61%和3.81%,而晚期凋亡和坏死率分别为23.78%、34.28%和61.72%。辣椒碱处理细胞48h后,细胞周期变化明显,细胞生长阻滞于G2/M期。表明辣椒碱对斜纹夜蛾细胞具有良好的抑制作用,能致细胞凋亡并有一定的浓度依赖性。 相似文献
8.
WRKY转录因子在调控植物抵抗病原菌的侵染中发挥重要作用,但是,目前为止还没有WRKY转录因子在烟草抗CMV中调控机理的研究。本研究检测了感病品种‘K326’和抗病品种‘TT8’在接种CMV后其WRKY1、WRKY2、WRKY4和WRKY11的表达情况。结果显示,CMV侵染后‘TT8’中4个WRKY转录因子表达量均有大幅上升;而‘K326’中WRKY2、WRKY4和WRKY11的表达量与CMV侵染前无显著差异,WRKY1表达量则大幅下降。幼苗经外源激素(水杨酸、茉莉素、乙烯)处理后用RT-PCR检测,结果表明,‘K326’和‘TT8’中WRKY转录因子对外源激素的诱导响应比较复杂多样,但总体表现为在‘TT8’中WRKY1、WRKY2和WRKY4会受到乙烯和茉莉酸的诱导,但在‘K326’中转录因子的表达未受明显诱导。 相似文献
9.
青霉菌灭活菌丝体(Dry Mycelium of Penicillium chrysogenum,DMP)是工业生产青霉素的残余副产物,研究发现DMP能够提高多种作物的抗病性。本文研究了DMP对烟草BY-2悬浮细胞防卫反应的诱导作用,并初步探索其诱导机制,结果表明:DMP处理烟草BY-2悬浮细胞后,产生了活性氧迸发,在处理后30 min达到峰值;DMP诱导烟草BY-2悬浮细胞胞外基质碱性化,该变化能被蛋白激酶抑制剂K252a部分抑制;苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)的活性被诱导而明显升高,分别在处理后4 h和8 h达到峰值;DMP诱导了病程相关蛋白基因PR-1a、PR-1b以及抗病信号传导途径关键基因NPR1的表达。说明DMP能够诱导烟草BY-2悬浮细胞产生抗病防卫反应,其抗病信号可能是通过水杨酸信号途径进行传导的,蛋白质磷酸化参与了该抗病信号的传导过程。 相似文献
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H2O2对水稻白叶枯病菌过氧化氢酶相关基因crg表达的诱导作用 总被引：1，自引：0，他引：1
为了阐明H2O2对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)过氧化氢酶(CAT)相关基因(crg)表达的诱导作用,本研究定量分析了在水稻细胞-Xoo互作体系及其加入H2O2清除剂CAT后H2O2产量和crg表达;外源添加H2O2后的病菌生长和crg表达。结果表明:在互作条件下,H2O2含量稳定增加,10 h可达到峰值;在互作6 h时crg显著地被诱导表达;加入CAT显著地降低了H2O2含量和crg表达;在外源H2O2胁迫条件下,H2O2以浓度效应的方式影响病菌增殖,显著地诱导了catB和srpA表达。因此,Xoo-水稻互作导致了H2O2的发生。无论是互作产生的还是外源的H2O2均显著地诱导了Xoocrg表达,从而活化了H2O2降解途径。 相似文献
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改良的L-15培养基对鳞翅目昆虫细胞生长和芹菜夜蛾核型多角体病毒增殖的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
4种鳞翅目昆虫细胞系SL-ZSU-1、TnH5、Sf9和Ha-AM1都不能在L-15 5?S或L-15 350mg/L脯氨酸 5?S(L-15-P,pH6.5)的培养基中生长,但是都可以在L-15 3g/L水解乳蛋白 3g/L酵母提取物 1g/L葡萄糖 5?S(L-15-LYG)、L-15 350mg/L脯氨酸 1g/L葡萄糖 5?S(L-15-PG)、L-15 1g/L葡萄糖 5?Sa(L-15-G,pH6.5)的培养基中生长。细胞从TNM-FH 5?S(pH6.5)培养基中转入上述培养基后,适应期的长短相差较大。转入L-15-LYG中的细胞没有明显的适应期;转入L-15-PG中的细胞需1个月左右才能正常传代;转入L-15-G中的细胞需45~60d才能正常传代。L-15-LYG替代TNM-FH对4种昆虫细胞的形态、大小、最大生长密度和群体培增时间没有显著影响,对芹菜夜蛾核型多角体病毒AfaMNPV胞外病毒粒子的滴度没有明显的变化,但多角体的产量显著下降。 相似文献
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Remodelling of actin cytoskeleton in tomato cells in response to inoculation with a biocontrol strain of Fusarium oxysporum in comparison to a pathogenic strain 
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下载免费PDF全文 Knowing that actin microfilaments play a key role in the mobilization of the defence‐associated cellular responses, the aim of this study was to compare changes affecting the actin cytoskeleton in tomato cells after inoculation with germinated microconidia of a biocontrol (Fo47, Fom24) or a pathogenic (Fol8) strain of Fusarium oxysporum. Actin microfilaments were observed by labelling with TRITC‐phalloidin combined with fluorescence microscopy. Results showed that only tenuous changes in the actin cytoskeleton architecture occurred after inoculation with the biocontrol strains whereas the actin cytoskeleton was significantly altered after inoculation with the pathogenic one. In the two types of interaction, cell death occurs and can be considered as one key component of cell defence responses. A pharmacological approach using cytochalasins was chosen to determine whether the inhibition of actin polymerization differently affects the kinetics of tomato cell death. Data showed that cytochalasins reduced cell death induced by the biocontrol strain Fo47, and in contrast, increased cell death induced by the pathogenic strain Fol8, suggesting that the pathway leading to cell death differs in the protective and compatible interactions. 相似文献
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Programmed cell death pathways induced by early plant‐virus infection are determined by isolate virulence and stage of infection 下载免费PDF全文
下载免费PDF全文 Programmed cell death (PCD) pathways caused by Turnip mosaic virus (TuMV) infection before symptom appearance were studied by light microscopy and electrolyte leakage following sap inoculation of Brassica carinata (Ethiopian mustard) TZ‐SMN‐44‐6 plants. Leaf responses to inoculation with avirulent (TuMV‐avir) and virulent (TuMV‐vir) isolates, and mock‐inoculation, were compared at 2, 20 and 52 h after inoculation (hai). The phenotypes induced were localized resistance (TuMV‐avir) and systemic susceptibility (TuMV‐vir). No visible TuMV symptoms were recorded in any inoculated plants during the 2–52 hai sampling period, but appeared as chlorotic spots in inoculated leaves at 5 days after inoculation. With TuMV‐vir alone, they were followed by systemic infection (mosaic). Dead cell number, deformation, percentage area and percentage integrated intensity, and conductivity of electrolyte leakage data, were analysed to examine their possible roles in stimulating cell death pathways. At 2 hai, dead cell number and percentage area were significantly greater for TuMV‐avir than TuMV‐vir infection or mock‐inoculation. Overall, isolate TuMV‐vir caused significantly greater cell deformation than TuMV‐avir, whereas wounding by mock‐inoculation had negligible effects. By 52 hai, isolate TuMV‐avir caused significantly greater electrolyte leakage than isolate TuMV‐vir or mock‐inoculation. This suggests both isolates triggered morphological changes consistent with apoptotic‐like PCD and necrosis‐like PCD that depended upon isolate virulence and stage of infection, respectively. These findings highlight how quantification of dead cell deformation and electrolyte leakage offer a new understanding of compatible and incompatible plant responses to early virus infection in plants. 相似文献
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本文对甘蓝夜蛾血球细胞的离体培养,以及细胞系的形态特征和生长特性进行了初步研究。利用M—M培养液,辅之以0.02％TC-199、0.06％胰蛋白(月示)和20％胎牛血清,采用单层培养法培养甘蓝夜蛾老熟幼虫的血细胞。结果原代培养仅历时35天就开始了第一次传代,共继代培养8次。细胞形态以圆形和梭形为主,圆形细胞直径为20～31μm,梭形细胞大小为18～20μm×35～50μm。利用第三代培养的细胞悬液,以3.5×10~5cells/ml浓度培养,其群体倍增时间约60小时。核型分析表明,细胞的染色体约呈圆球形,数目变化较大。经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,细胞的酯酶同功酶带为12条,其中有6条主带。培养的细胞于4℃直接冷冻保存可长达70天。 相似文献
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5种滨藜属植物叶肉细胞超微结构的比较解剖 总被引：3，自引：1，他引：2
采用透射电镜,对生长在不同环境下的5种滨藜属(Atriplex L.)植物叶肉细胞超微结构进行比较解剖,旨在揭示其适应环境的结构特点.结果显示:5种滨藜属植物的栅栏组织细胞的细胞膜均有破损,并局部内陷形成小泡,分布于细胞膜周围与液泡中;叶绿体的膜系统受环境影响显著,异苞滨藜叶绿体的基粒片层和基质片层发育良好,而生长在盐渍、干旱胁迫下的疣苞滨藜和白滨藜,叶绿体受损最严重,类囊体膨胀,片层扭曲并伴有体积大的淀粉粒;脂质球在光滨藜中含量最丰富,疣苞滨藜和白滨藜中最少.细胞超微结构的变化是滨藜对盐渍、干旱等胁迫条件的适应策略,表明5种滨藜能通过改变自身的细胞结构来适应不同的生境. 相似文献
17.
Peter Babczinski 《Pest management science》1999,55(6):671-674
Plant cell cultures have been used to study the metabolic degradation of 4-amino-5-methyl-2-(tert-butylaminocarbonyl)-1,2,4-triazolin-3-one. The biochemical basis of selectivity was shown to reside in effective metabolic conjugation. The herbicide was eliminated from cell cultures of beet (which is tolerant to it) by conjugation (N-glycolisation), but this occured to only a limited extent with cell cultures of non-target plants such as soybean. 相似文献
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本文将叠氮溴化丙锭(PMA)与荧光实时定量PCR技术相结合,建立了一种适于青枯菌不同小种菌株活细胞精准、快速检测的PMA-qPCR方法。通过单因素变化试验对PMA预处理反应体系中的各参数进行优化,确立了PMA终浓度为15 ng/μL,黑暗孵育时间为10 min,曝光时间为5 min的PMA预处理体系。试验结果表明,当活菌比例大于10%,PMA-qPCR的测定结果均在理论活菌数相对应的95%置信区间内。检测灵敏度测试结果显示,该方法适用于活菌数在5.0×10~2～5.0×10~8 cfu/mL范围内菌悬液的检测。本文建立的PMA-qPCR方法可在一定范围内有效去除青枯菌死菌的干扰,定量检测出活菌数量,研究结果可为植物细菌性青枯病的流行规律研究提供新的技术支撑。 相似文献
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采用液体培养基悬浮培养的方法,研究4种不同激素培养基对银柴胡悬浮细胞的生长特性及营养物质的代谢规律的影响,结果表明:当培养到16 d时,M4处理(MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D0.5 mg/L NAA 0.5mg/L)的细胞鲜重、干重、细胞数目均明显高于其他处理;而M4处理的可溶性糖的含量在16 d时处于最低水平;M4处理的电导率在整个培养过程中均高于其他处理;培养到4 d时各处理的磷已消耗60%以上,表明磷是银柴胡细胞生长的限制性因子;硝态氮的吸收主要集中在4 d以后。 相似文献
20.
罗鹏飞 《干旱地区农业研究》2014,(5)
目的：观察新福菌素注射液联合放疗治疗肺癌的临床疗效。方法50例临床分期为Ⅲ期的非小细胞肺癌患者，依治疗方法不同分为治疗组和对照组各25例，治疗组采用新福菌素注射液静脉滴注，同时配合放疗，对照组单用放疗，比较新福菌素治疗组与对照组的近期疗效、生活质量变化、放疗毒副反应情况。结果治疗组有效率比对照组高，差异有统计学意义；治疗组生活质量好转率明显高于对照组，差异有统计学意义；两组之间放疗毒副反应相当，差异无统计学意义。结论新福菌素联合放疗能明显提高Ⅲ期非小细胞肺癌患者的近期疗效，提高患者生活质量，不增加患者放疗毒副反应。 相似文献