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RNA沉默是生物抵抗异常DNA的一种保护机制,在生物生长发育过程中扮演着基因表达调控的角色。本文主要综述了RNA沉默技术的特点及其在病原真菌中的研究现状及研究策略,包括RNA沉默的作用机制、优缺点,RNA沉默在病原真菌基因功能研究等方面的应用及其发展前景。 相似文献
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为获得适用于转录组测序的枣花、结果枝和果实的总RNA提取方法,以中秋酥脆枣为材料,比较分析了Ambiogen和Autolab 2种总RNA提取试剂盒和基于Autolab试剂盒改良的CTAB法的总RNA的提取效果。结果表明:3种方法提取RNA的OD260/OD280差别不大,但用2种试剂盒提取的RNA有降解,其中Ambiogen试剂盒提取的花、结果枝和果实3个器官的RNA质量浓度分别为126、284和222 ng/μL;Autolab试剂盒提取的RNA质量浓度分别为307、402和266 ng/μL;基于Autolab试剂盒改良的CTAB法提取的RNA质量浓度分别为401、417和296 ng/μL。与2种试剂盒相比,基于Autolab试剂盒改良的CTAB法提取出来的RNA完整性好、纯度和浓度高,能够满足转录组测序的要求。 相似文献
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枣RNA提取方法的比较 总被引：3，自引：1，他引：2
为给在分子水平上对枣进行研究提供参考,通过采用分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法检测提取样品,比较CTAB-异丙醇法、CTAB-LiCl法、Trizol-异丙醇法和Trizol-LiCl法等4种RNA提取方法对枣RNA提取的影响。结果表明,CTAB-异丙醇法提取的枣RNA纯度和完整度均较高,杂质较少,DNA残留少,降解不明显,可以用在枣枝条韧皮部、果实、嫩叶和老叶等器官和组织的RNA提取上,应用该方法所提取的RNA可以作为cDNA合成和基因克隆的模板。 相似文献
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非编码小RNA是一类长度约为20 26个核苷酸的内源性RNA分子,在植物中普遍存在,在转录和转录后过程调控基因表达。microRNA及其它非编码小RNA在植物个体生长发育和生理过程中起重要作用。microRNA及其它非编码小RNA在陆地植物中保守,而且每个进化分支的出现皆伴随着新microRNA和其它非编码小RNA的产生,这些现象都表明,非编码小RNA与陆地植物的系统发生密切相关。本文从microRNA及其它非编码小RNA的保守性并结合其功能,探讨了非编码小RNA在植物进化中的重要功能。 相似文献
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黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是植物病毒研究中的模式病毒,其寄主范围广,对植物危害严重。已知多数CMV株系包含卫星RNA,CMV卫星RNA能够修饰CMV感染寄主植物后的症状。目前对于CMV卫星RNA与辅助病毒CMV互作机制的研究还很不深入,本文简要综述黄瓜花叶病毒卫星RNA研究进展。 相似文献
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胡杨根、茎、叶、愈伤组织总RNA提取的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
胡杨根、茎、叶、愈伤组织等器官和组织的总RNA高质量提取是进行以胡杨RNA为基础的分子生物学研究的基础。以2 a生胡杨实生苗根系为材料,用CTAB-PVP提取缓冲液裂解细胞并变性蛋白,经氯仿/异戊醇(24∶1,v/v)抽提后,用3种不同的沉淀方法获得胡杨根系总RNA,电泳和定量测试等分析提取质量。结果表明,LiCl沉淀法结合70%乙醇洗涤沉淀两次获得的的胡杨根系总RNA,条带清晰、亮度高,且没有明显的DNA污染;actin基因片段设计引物对胡杨根系总RNA进行RT-PCR扩增,扩增片段与预期大小一致,表明该RNA可用于逆转录合成cDNA,提取物RNA中的Li 残留对逆转录酶活性的抑制作用不明显;该方法用以提取2 a生胡杨实生苗茎、叶及愈伤组织总RNA,均获得高质量总RNA。CTAB-PVP-LiCl(附70%乙醇洗涤RNA沉淀2次)的方法可用于胡杨根、茎、叶和愈伤组织总RNA的提取。 相似文献
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油茶种子胚乳中富含脂肪、多糖和酚类公合物,要获得高质量的RNA难度较大。本研究以油茶优良无性系湘林1号近成熟种子的胚乳为实验材料,在试剂盒的基础上应用改良的CTAB法提取总RNA。结果表明,使用改良后的CTAB法配合试剂盒提取RNA操作简单,且能够有效去除油茶种子中多糖和多酚类等次生物质,从而得到高质量的RNA。以获得的RNA为模板,设计简并引物,通过RT-PCR,成功从油茶种子中鉴定出了油脂合成的关键酶基因之一△8脂肪酸脱饱和酶基因,命名为Cod8FAD(Camellia oleifera delta 8 fatty acid desaturase),该基因与茶树△8脂肪酸脱饱和酶基因相似性最高,为97%,与耧斗菜△8脂肪酸脱饱和酶基因相似性最低,为62%。 相似文献
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为了探寻能够满足芒果各组织转录组测序要求的高质量RNA提取方法,以‘桂热芒82号’的叶片、花和果实为材料,从RNA提取质量和产率、琼脂糖电泳和RT-PCR结果分析、RNA测序质量评价这3个方面,对常用的3种试剂盒的提取效果进行了实验研究和评价分析。结果表明:以来自于天根生化科技有限公司的DP 419试剂盒提取的芒果各组织的RNA质量均较好,提取的RNA产率远高于其余两种试剂盒的提取产率;除以美伯生物医药技术有限公司的RM 103试剂盒提取芒果各组织所得RNA,经琼脂糖电泳未见有5S条带出现外,以其余两种试剂盒提取的芒果各组织的RNA都存在28S、18S、5S条带且RT-PCR分析结果理想;对以3种试剂盒提取所得的RNA进行完全测序,结果表明,3种试剂盒提取的RNA完全测序都大于98.99%,能满足RNA-Seq分析的要求。文中综合上述评判因素分析认为,天根生化科技有限公司的DP 419试剂盒是适用于芒果叶片、花和果实RNA提取的最优试剂盒。 相似文献
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几种提取杜仲RNA方法的比较 总被引：3，自引：0，他引：3
杜仲富含酚类、多糖、蛋白、杜仲胶等代谢物质,用普通方法提取杜仲RNA时很难将其去除,比较研究了Trizol、CTAB和热硼酸盐3种方法,发现改进的CTAB法和热硼酸盐法均能从杜仲中提取纯度较高的RNA,热硼盐法分离效果最好,凝胶电泳显示条带清晰完整,分光光度计检测OD260/OD280=1.92.用该方法提取的杜仲RNA可以进行RT-PCR、Northern-blot、RACE等分子生物研究. 相似文献
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木本植物根系总RNA提取方法的比较和分析 总被引：2，自引：0，他引：2
以杂种马褂木不定根和杨树、柳树、柽柳根系组织为材料,比较异硫氰酸胍法、Tiangen试剂盒、CTAB改良法、Trizol法和改良Trizol法提取总RNA的效果。结果表明,改良Trizol法通过在离心后的匀浆上清液中加入低浓度的无水乙醇以及结合后续的高盐溶液,能有效去除多糖,提取的RNA中28S rRNA亮度约为18S rRNA的两倍,OD260/OD280值介于1.7～2.1之间,各林木树种根系组织RNA得率均大于150μg/g,而且整个提取时间只要2～3 h。表明改良Trizol法方便、快捷、高效,完全适用于林木树种根系组织RNA的提取。 相似文献
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RNA是植物分子生物学研究的前提和基础,植物RNA的提取有多种不同方法,每种方法的分离原理以及应用范围有一定的差异,对不同RNA提取方法优缺点以及适应性进行了综述,以便从不同的植物材料中获得高质量的RNA.论述了RNA提取中的常见问题,进行了RNA纯度和完整性的分析并作出了相应总结. 相似文献
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An Effective Method for Total RNA Isolation from Bamboo 总被引：18，自引：0，他引：18
GAO Zhimin LI Xueping LI Lubin PENG Zhenhua ** . International Center for Bamboo Rattan Key Laboratory on Bamboo Rattan Science Technology of State Forestry Administration Beijing P.R. China . Research Institute of Forestry Chinese Academy of Forestry Beijing P.R. China 《中国林业科技(英文版)》2006,5(3):52-54
INTRODUCTION Bamboo, one of the key forest resources, plays an important role in environment protection and local economic development(Jiang Zehui 2002). Therefore, good bamboo cultivars are badly in need. RNA extraction is necessary for genetic engineering to create new bamboo germplasm. In this report, the total bamboo RNA was successfully isolated with Trizol reagent. 1 MATERIALS AND APPROACHES 1.1 Materials Test samples are fresh leaves of D. oldhami (potted bamboo from W… 相似文献
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