重组酵母E22植酸酶的分离纯化及酶学性质研究     

李春明  彭远义 《西南大学学报》2008,30(11)

对用黑曲霉植酸酶基因构建的一株重组酵母E22所产植酸酶进行分离纯化并研究各种酶学性质,表明E22植酸酶分别在pH2.5～3.0和pH5.5左右具有2个最适pH峰,有活性pH范围为pH2.0～7.5,pH2.5时的最适温度为45℃左右、对植酸钠的Km值为0.000 2 mol/L、比活为493 328.7 u/mg、受Fe2+抑制,pH5.5时的最适温度为55℃.对植酸钠的Km值为0.000 1 mol/L、比活为624 376.2 u/mg、受Ca2+和Zn2+抑制,85℃热处理10 min酶活性保留70%,pH2.5下用胃蛋白酶、pH5.5下用胰蛋白酶处理6 h后酶活均保留90%左右,分子量为61.7KD,等电点在4.5到5.0之间.  相似文献   

2株黑曲霉植酸酶的分离纯化及其酶学性质研究     

李春明  彭远义 《西南大学学报》2006,28(4)

对黑曲霉A 3214及其诱变株N14所产植酸酶进行分离纯化并研究各种酶学性质,表明A 3214植酸酶和N14植酸酶的最适pH均为2.5,最适温度均为50℃,60℃保温10 min后酶活保留均在80%左右,用胃蛋白酶处理后酶活均保留80%左右,分子量均为47.4 KD,等电点均在4.5到5.0之间,K+,Na+,Ca2+,Mg2+,Fe2+在高浓度时对A3214植酸酶和N 14植酸酶都有抑制作用,而Zn2+,Cu2+,Mn2+却几乎没有抑制作用,A 3214植酸酶对植酸钠的Km值为0.0005 mol/L,N 14植酸酶对植酸钠的Km值为0.0004 mol/L,A 3214植酸酶的比活为135 777.5u/mg,N 14植酸酶的比活为148 447.5u/mg.  相似文献   

穗霉属26-13-4菌株产植酸酶的酶学性质研究     

赵新淮  张娜 《东北农业大学学报》2009,40(9)

从黑龙江大豆根部土壤中分离一株穗霉属菌株,对其诱变菌株26-13-4所产植酸酶进行研究。该植酸酶对植酸钠的适宜水解温度为45℃、适宜pH为5.0,在4、25和45℃下热稳定性好,在pH4.0～7.0时植酸酶比较稳定;低浓度的Fe2+、Mn2+、Ca2+对酶活性有促进作用,而Cu2+、Mg2+、Zn2+、Al3+以及高浓度Mn2+、Ca2+、Fe3+对酶活性有抑制作用;K+、低浓度的Fe3+对酶活没有任何影响。结果表明,该植酸酶以植酸钠为底物时的米氏常数Km为4.4×10-5mol·L-1。  相似文献   

饲料用米曲霉酸性蛋白酶研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

曾黎明  胡春燕  徐平  黄长干 《安徽农业科学》2009,37(1):20-22

[目的]研究米曲霉酸性蛋白酶的纯化技术以及催化特性,为米曲霉酸性蛋白酶的开发和利用提供理论依据。[方法]采用丙酮沉淀,DEAE—Sephadex A-50柱层析方法分离纯化了米曲霉酸性蛋白酶,以酪蛋白为底物对其酶学性质进行了研究：[结果]结果表明：纯化倍数达到20．77;该酶最适pH值为6．0,最适温度为45℃;Fe^2＋、Mg^2＋对该蛋白酶的活性有明显的抑制作用,而Mn^2＋、Cu^2＋对该蛋白酶的活性有明显的激活作用。该蛋白酶Km=4．704mg/ml,Vmax=22．27μg／min。[结论]米曲霉蛋白酶具有很好的应用前景。  相似文献   

2株黑曲霉植酸酶的分离纯化及其酶学性质研究     

李春明  彭远义 《西南大学学报(自然科学版)》2006,28(4):643-647

对黑曲霉A3214及其诱变株N14所产植酸酶进行分离纯化并研究各种酶学性质,表明A3214植酸酶和N14植酸酶的最适pH均为2．5,最适温度均为50℃,60℃保温10min后酶活保留均在80％左右,用胃蛋白酶处理后酶活均保留80％左右,分子量均为47．4KD,等电点均在4．5到5．0之间,K^＋,Na^＋,Ca^2＋,Mg^2＋．Fe^2＋在高浓度时对A3214植酸酶和N14植酸酶都有抑制作用,而Zn^2＋,Cu^2＋,Mn^2＋却几乎没有抑制作用,A3214植酸酶对植酸钠的Km值为0．0005mol／L,N14植酸酶对植酸钠的Km值为0．0004mol／L,A3214植酸酶的比活为135777．5u／mg,N14植酸酶的比活为148447．5u／mg。  相似文献   

枯草芽孢杆菌WHNB 02植酸酶的酶学性质研究     

胡勇  王红宁  吴琦  邹立扣  于新芬  赵海霞 《西南大学学报》2005,27(6)

从118份样品中分离到1株产植酸酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WHNB 02),其发酵液经乙醇沉淀、硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100柱层析等步骤后分离纯化了该酶,纯化倍数约为31.5倍,回收率为13.0%.该酶为单体酶,SDS-PAGE测得的分子量约为43 KD,以植酸钠为底物的Km值为0.5 mmol/L,酶反应的最适温度为60℃,80℃作用10 min酶活保存61%,最适pH为7.0,在pH 6.0～10.0范围内稳定,酶活性及稳定性都需Ca2+存在.ED-TA,Mn2+,Ba2+(5 mmol/L)对酶活具有很大的抑制作用.  相似文献   

重组酵母E22植酸酶的分离纯化及酶学性质研究     

李春明  彭远义 《西南大学学报(自然科学版)》2008,30(11)

对用黑曲霉植酸酶基因构建的一株重组酵母E22所产植酸酶进行分离纯化并研究各种酶学性质,表明E22植酸酶分别在pH2．5～3．0和pH5．5左右具有2个最适pH峰,有活性pH范围为pH2．0～7．5,pH2．5时的最适温度为45℃左右、对植酸钠的Km值为0．0002mol／L、比活为493328．7u／mg、受Fe^2＋抑制,pH5．5时的最适温度为55℃、对植酸钠的Km值为0．0001mol／L、比活为624376．2u／mg、受Ca^2＋和Zn^2＋抑制,85℃热处理10min酶活性保留70％,pH2．5下用胃蛋白酶、pH5．5下用胰蛋白酶处理6h后酶活均保留90％左右,分子量为61．7KD,等电点在4．5到5．0之间．  相似文献   

不同温度条件下蚯蚓体内植酸酶活性的变化     

李成会  赵名飞  曹卫荣 《江苏农业科学》2008,(4)

分别以干蚯蚓和鲜蚯蚓为材料,与植酸钠在一定比例、一定pH值、不同温度条件下反应30 rain,通过吸光度测定,确定蚯蚓体内植酸酶在不同温度下的酶活性.试验结果表明:蚯蚓体内植酸酶在35～85℃范围内均具有酶活性,在35～45℃时植酸酶具有较好的活性,说明在大多数动物肠道内(37℃左右)条件下植酸酶可以发挥酶效.随着温度的升高植酸酶的活性增强,当温度达到85℃时植酸酶仍然具有活性,但在55～85℃之间植酸酶的活性变化幅度不大,说明蚯蚓体内植酸酶具有良好的耐热性.  相似文献   

毕赤酵母表达罗氏耶尔森氏菌(Yersinia rohdei)植酸酶和酶学特性研究     

《上海农业学报》2016,(6)

按毕赤酵母偏爱密码子,将来自Yersinia rohdei的植酸酶基因(YrAPPA)进行了化学合成,并成功在毕赤酵母GS-115中异源分泌表达,重组植酸酶分泌量能达到72μg/mL。酶学特性研究结果表明:酶比活达到1 500 U/mg,重组植酸酶的最适反应温度和pH分别为55℃和4.5;纯化的重组植酸酶能耐受60℃高温,且pH 3—7.5范围内重组植酸酶有良好的稳定性;Cu~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(3+)对植酸酶活性有抑制作用;重组植酸酶有抗胃蛋白酶和胰蛋白酶水解特性。  相似文献   

微生物植酸酶在水产饲料中的应用     

刘春雪  程宗佳  陆伟 《饲料博览》2003,(12):37-39

植酸酶由一系列酶组成,是肌醇六磷酸酸化酶,可水解植酸使无机正磷酸逐步释放。植酸酶的活力单位(FTU)定义为:37℃,pH值=5.5条件下,1min内从0.0051mol/L的植酸钠溶液中水解释放1μmol/L无机正磷酸所需要的酶量为1个酶活单位[1]。植酸酶广泛存在于谷物、豆类、油料作物及动物胃肠道中,但在正常情况下,其含量微小,无法将日粮中的植酸盐消化达到显著水平[2]。在动物饲料中添加微生物植酸酶已被证明对于植酸降解非常有效。国内外对于在水产饲料中添加微生物植酸酶已有一些研究,并取得了明显的效果。1植酸及植酸盐植酸即肌醇六磷酸,是由6个含磷…  相似文献