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相似文献
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1.
在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5 g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5 g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、项体完整率、线粒体活性.结果显示,0.5 g/L BSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P0.05).1% DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P<0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著.不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著.50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组.因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA,50℃解冻最佳.  相似文献   

2.
采用5% 二甲乙酰胺(DMA)(V/V)完全替代甘油,比较乳糖、海藻糖对精液冷冻保存效果的影响。结果表明,海藻糖显著提高了冷冻——解冻后精子成活力(49.32%±1.52%)与顶体完整性 (47.33%±1.16%)(P<0.05)。然后利用海藻糖替代乳糖,评价不同浓度的DMA对公猪精液冷冻保存的影响。结果表明,当DMA添加量为4%时,解冻后精子活率、成活力、顶体完整率分别为(45.17±0.56)%、(50.33±0.67)%、(48.30±1.44)%,均显著高于3% DMA、6% DMA添加组(P<0.05),精子活率显著高于5% DMA添加组(P<0.05),但精子成活力、顶体完整性与其差异不显著(P>0.05)。因此,当利用海藻糖作为冷冻保存基础稀释液,DMA最适添加量为4%。  相似文献   

3.
维生素C对荷斯坦公牛X精子冻后品质的影响   总被引:3,自引:1,他引:2  
试验旨在研究维生素C(VC)对荷斯坦公牛性控精液冻后品质的的影响。在精液稀释液中分别添加0,2.0,4.0,6.0,8.0 mg/mL的VC进行试验。将装有X精子的细管冻精解冻(37.5 ℃,30 s)后分析0~3 h精子活率及0~4 h质膜完整率和顶体完整率的变化情况。结果表明,当添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h精子活率与对照无差异显著,解冻后1、2、3 h精子活率与对照组差异显著(P<0.05)。当VC的添加量为4.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子质膜完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1 h与对照相比差异不显著(P>0.05),但数值依然高于对照组。解冻后存放2、3、4 h与对照组相比差异显著。添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1、3 h精子顶体完整率与对照组相比差异显著(P<0.05),2、4 h与对照相比差异不显著(P>0.05),但顶体完整率高于对照组。在冷冻精液稀释液中VC的适宜添加量为4~6 mg/mL,此浓度下可有效提高荷斯坦公牛X精子解冻后活率、质膜完整率及顶体完整率。  相似文献   

4.
为了探讨冷冻保存Ⅰ液中添加不同浓度谷胱甘肽(GSH)对杜洛克公猪精子冷冻保存效果的影响,试验将冷冻-解冻处理的精液分为6组,分别为对照组(冷冻保存Ⅰ液)和试验组(分别在冷冻保存Ⅰ液中添加1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mmol/L的GSH),在液氮中保存,然后检测精子活力、运动参数、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性,活性氧(ROS)水平,丙二醛(MDA)和ATP含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以此来评价解冻后的精液品质。结果表明:与对照组相比,除GSH添加浓度为3.0 mmol/L时精子活力降低外,其他添加浓度精子活力均提高,其中添加浓度为2.5 mmol/L时提高最显著(P<0.05)。与对照组相比,GSH添加浓度为2.5 mmol/L时猪精子在解冻后各项运动参数均显著提高(P<0.05),添加浓度为2.0,3.0 mmol/L时对猪精子部分运动参数也有一定提高,而添加浓度为1.0 mmol/L时各项运动参数降低。与对照组相比,添加不同浓度GSH时精子质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性均提高,其中...  相似文献   

5.
冷冻速率和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
为优化冷冻和解冻方法,提高冷冻效果,本试验比较了不同冷冻速率(-100 ℃ 10 min、-120 ℃ 10 min、-140 ℃ 10 min)和不同解冻温度(37 ℃ 30 s、45 ℃ 30 s、52 ℃ 30 s、60 ℃ 30 s)对猪精液冷冻效果的影响。结果表明,采用-120 ℃熏蒸10 min,解冻后精子活力为0.36,质膜完整率和顶体完整率也优于其他2组,且差异显著(P<0.05)。采用37 ℃ 30 s方法解冻,精子活力、质膜完整率显著高于其他3组,顶体完整率也高于其他3组,但差异不显著(P>0.05),其畸形率最低和60 ℃ 30 s组差异明显(P<0.05),但与45 ℃ 30 s组和52 ℃ 30 s组差异不显著(P>0.05)。因此,采用-120 ℃平衡10 min冷冻,37 ℃ 30 s水浴解冻方法更为适合0.25 mL细管猪冻精解冻。  相似文献   

6.
为了评价黄芪多糖(Astragalus polysaccharides)对外来公猪精液冷冻保存的影响情况,为猪精液冷冻稀释液配方的改良提供理论依据,试验采集美系长白、大约克与杜洛克3种公猪的精液,用添加不同浓度(0、0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%)黄芪多糖的冷冻稀释液稀释,0.25 mL塑料细管分装并冷冻,测定解冻后精子活力、畸形率及顶体完整率,并进行相同浓度3种公猪之间和同种公猪不同浓度之间的比较。结果表明,在相同黄芪多糖浓度下,仅杜洛克公猪冻后精子顶体完整率在不添加黄芪多糖时显著高于大约克公猪(P<0.05),其余均无显著差异(P>0.05);每种公猪的最佳黄芪多糖添加浓度均为0.04%,在该浓度下精液冻后质量均显著优于对照组(P<0.05);各种公猪最佳黄芪多糖添加浓度下的精液冻后质量指标之间均无显著差异(P>0.05)。总之,稀释液中添加0.04%黄芪多糖在长白、大约克与杜洛克3种公猪的精液冷冻都可以取得较好的效果。  相似文献   

7.
本试验用0.5 mL细管作为冷冻载体对金华猪精液进行冷冻保存研究,比较3种冷冻稀释液及不同冷冻方法、解冻程序对金华猪精液冷冻的效果,以解冻后的精子活力、畸形率和质膜完整率为判定指标。结果表明:Ⅱ、Ⅲ号冷冻稀释液处理组解冻后精子的活力、畸形率和质膜完整性都明显地高于Ⅰ号冷冻稀释液(P0.05);Ⅱ号冷冻稀释液和Ⅲ号冷冻稀释液处理组之间没有明显差异(P0.05)。采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液冷冻保存精子,并在60℃,8 s条件下水浴解冻精子后,精子活力和质膜完整率最高分别为42.3%和50.3%,畸形率最低为17.7%。因此,采用程序冷冻仪冷冻法,使用Ⅲ号冷冻稀释液,在60℃,8 s条件下水浴解冻方法较为适合0.5 mL细管金华猪精液冷冻保存及解冻。  相似文献   

8.
为优化猪冷冻精液解冻方法、提高精液利用效率,试验采用两种不同的解冻方法解冻0.5 mL猪细管冷冻精液,一种在38℃水浴直接解冻30 s(1组),另一种在50℃水浴解冻16 s后再放到30℃水浴中静置40 s(2组)。对解冻后的精液分别进行精子活力、生存时间、顶体完整率的测定和顶体形态观察。结果表明:2组解冻精液的精子活力、顶体完整率极显著高于1组(P<0.01),但两组的生存时间差异不显著(P>0.05);精子顶体形态学观察发现,两组冻精的精子顶体膨胀、缺损情况都较严重。说明与38℃慢速解冻冷冻精液相比,50℃快速解冻的猪细管冷冻精液的精子活力好而且顶体完整率高。  相似文献   

9.
本试验对猪精液冷冻保护液中添加咖啡因的作用进行了研究,并优化冷冻-解冻程序,提高0.5 mL细管猪精液冷冻解冻后的质量。在预先设计稀释液配方的基础上,使咖啡因终浓度为0、0.2、0.4、0.6 mg/mL,选择最佳咖啡因浓度,选出最优组合与传统的TCG稀释液和商业用Androhep〖XC1.TIF〗CryoGuardTM冷冻稀释液进行比较,比较3种不同的冷冻曲线对猪冷冻精液解冻后精子品质的影响,最后对38 ℃下30 s、50 ℃下13 s 2种解冻方法进行比较。结果表明,咖啡因浓度为0.2、0.4 mg/mL的精子冷冻后活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于0、0.6 mg/mL(P<0.05),最佳添加浓度为0.2 mg/mL;预设计的稀释液配方及冷冻方案优于传统的TCG法(P<0.05),但与Androhep〖XC1.TIF〗CryoGuardTM稀释液(美国商业用)有一定差距(P<0.05);A曲线在猪精液冷冻-解冻后活力、质膜完整率和顶体完整率方面均显著优于B和C冷冻曲线(P<0.05);50 ℃水浴解冻13 s显著优于38 ℃解冻30 s(P<0.05)。  相似文献   

10.
为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明:两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG...  相似文献   

11.
In this study, different concentrations of glycerol were added to semen cryoprotective extenders of Banna Mini-pig inbred line (BMI), different thawing solutions and thawing methods were studied. After thawing, the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were compared to optimize the cryopreservation method of BMI semen. The results showed that the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were significantly higher in 2% and 3% glycerol groups than those in 1%, 4% and 5% glycerol groups (P<0.05);The motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were significantly higher in thawing solution Ⅰ than those in thawing solution Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ (P<0.05); Through comparing the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity, the thawing effect in 40℃ 6 s and 50℃ 6 s groups were better than that in 38℃ 30 s (P<0.05). In conclusion, the optimal semen cryoprotective method for BMI was 2% or 3% glycerol as cryoprotectant, using thawing solution Ⅰ to thaw at 40℃ 6 s or 50℃ 6 s.  相似文献   

12.
本试验旨在探索用谷氨酰胺(Gln)替代部分甘油对冻融猪精子体外获能和受精能力的影响,试验分为6组:3%甘油对照组和5个处理组(Ⅰ~Ⅴ组:2%甘油+谷氨酰胺(0、20、40、80和100 mmol/L))。对冻融松辽黑猪精子的精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、鱼精蛋白水平、获能及体外受精等指标进行了检测。结果显示,用谷氨酰胺替代部分甘油均对冻融精子质量有一定的改善作用,改善的程度受谷氨酰胺浓度的影响。与对照组相比,Ⅰ组精子的质量参数均显著下降(P<0.05);与Ⅰ组相比,Ⅱ组精子活力、顶体完整性和活率显著提高(P<0.05),Ⅲ组精子线粒体膜电位显著提高(P<0.05),Ⅴ组精子活力、质膜完整性、顶体完整性、活率和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05)。说明用谷氨酰胺替代部分甘油对精子质量具有很大的影响,且当谷氨酰胺为100 mmol/L时可得到更高质量的精子,因此,后续试验使用浓度为100 mmol/L的谷氨酰胺进行研究。与对照组相比,2%甘油+100 mmol/L谷氨酰胺处理组精子鱼精蛋白缺失率显著下降(P<0.05),精子获能无显著差异(P>0.05),但胚胎卵裂率显著提高(P<0.05)。综上所述,谷氨酰胺可作为一种新型冷冻保护剂替代部分甘油来提高猪精液的质量,并降低甘油对猪精液的毒性作用,为猪精液的冷冻保存及商业化生产提供技术支撑。  相似文献   

13.
维生素E对秦川牛冷冻精液的抗氧化保护作用   总被引:5,自引:0,他引:5  
本试验旨在研究维生素E对秦川牛细管冷冻精液品质和精浆中抗氧化酶活性的影响.在稀释液中分别添加0.00、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg·mL~(-1)的维生素E,将细管冻精解冻(37.5℃,30 s)后用伟力精子分析系统分析精子活力和精子顶体完整率等标准参数,并用相关试剂盒测定精浆中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)和过氧化氢酶(CAT)的活性.结果表明:当维生素E添加量为0.04mg·mL~(-1)时,精子活力与对照组相比差异显著(P<0.05),SOD、GSH、CAT 3种酶活性与对照组相比差异显著(P<0.05).当维生素E的添加量为0.06 mg·mL~(-1)时,冷冻-解冻后精子活力显著高于对照组(P<0.05),顶体完整率极显著高于对照组(P<0.01);GR和CAT酶活性与对照组相比均差异显著(P<0.05).当维生素E的添加量为0.08 mg·mL~(-1)时,精子活力、活率及顶体完整率与对照组相比差异显著(P<0.05),GSH与对照相组比差异极显著(P<0.01),GR及CAT与对照组相比差异显著(P<0.05).在冷冻精液稀释液中添加维生素E可以有效提高冷冻-解冻后秦川牛精液品质及精浆中SOD、CAT、GSH、GR酶的活性,稀释液中维生素E的适宜添加量为0.04~0.08 mg·mL~(-1).  相似文献   

14.
二甲基甲酰胺对猪精液冷冻保存效果的影响   总被引:3,自引:2,他引:1  
用二甲基甲酰胺(DMF)完全替代甘油,比较不同平衡时间和不同DMF添加量对猪精液冷冻保护效果的影响。结果表明,DMF能完全替代甘油,获得较好的冷冻保护效果。最佳平衡时间为90 min,解冻后精子活力为(44.57±0.72)%,显著高于对照组和其他组(P0.05)。当DMF添加量为5%时,冻后精子活力、活率、线粒体活性、顶体完整率和质膜完整率分别为(49.91±0.39)%(、46.51±0.26)%、(47.51±0.52)%(、49.84±0.56)%、(46.30±1.61)%,均显著高于2%、3%、6%DMF添加组(P0.05),但与4%DMF添加组相比,冻后精子活力、活率和质膜完整率差异不显著(P0.05)。本试验结果表明,DMF最适添加量为5%。  相似文献   

15.
猪精液4℃低温保存技术研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
为丰富猪鲜精保存技术、改善与提高精液保存质量,本研究以市场占有率高、性能稳定和可耐受4℃低温的长效稀释剂为对照,探讨本课题组研制的4℃稀释剂(低温Ⅰ号、低温Ⅱ号)对猪精液低温保存效果的影响。结果表明:低温Ⅰ号和低温Ⅱ号稀释剂对猪精液的有效保存时间和总存活时间均显著高于对照组(P<0.05)。保存至第6天时,对照组精子活力显著降低(P<0.05),保存至第10天时,低温Ⅰ号、低温Ⅱ号、对照组精子活力分别为74.6、76.0、0;保存第10天时,对照组pH显著低于2个实验组(P<0.05);保存从第5天开始,实验组质膜完整性显著高于对照组(P<0.05)。综上,本课题组研制的稀释剂对猪精液4℃低温保存效果较好,而且低温Ⅱ号对精子活力和质膜完整性保存效果更优。  相似文献   

16.
用液氮熏蒸法在氟板上制作冻精颗粒,以解冻后的精子活率、活力和质膜完整性为判定指标,比较4种冷冻稀释液及不同冷冻-解冻程序对五指山小型猪精液冷冻的效果。结果表明:①Ⅳ号冷冻稀释液冷冻解冻后精子的活率(0.610±0.036)、活力(0.427±0.025)和质膜完整性(0.503±0.015)均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号冷冻稀释液(P<0.05)。②实验中精液在4℃冰箱中平衡降温2 h的精液精子活力、质膜完整性均好于在17℃平衡3 h再放入4℃冰箱中平衡2 h的解冻效果,而且精子活率差异显著(P<0.05)。③湿解法的效果优于干解法。  相似文献   

17.
试验旨在评价聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVP)对公猪精液冷冻的影响。试验分为5组,分别为对照组(不添加PVP)和PVP处理组(在冷冻基础液中分别加入0.25%、0.50%、1.00%、2.00% PVP)。采用手握法采集松辽黑猪精液,用5种冷冻基础液稀释,在25 ℃平衡1 h,17 ℃平衡2 h,4 ℃平衡3 h后灌装于0.5 mL细管中,在液氮上方3 cm处熏蒸10 min,保存在液氮罐中30 d后进行检测。样本解冻后分别检测精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体活性、DNA完整性、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)活性、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平及丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平。结果显示,与对照组相比,冷冻基础液中添加0.50% PVP显著提高冻融后精子的活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体活性、CAT活性、SOD活性、GSH-Px活性(P<0.05),显著降低精子ROS和MDA水平(P<0.05);与对照组相比,添加PVP有利于提高DNA完整性,但差异不显著(P>0.05)。因此,猪精液冷冻基础液中添加PVP可改善冻融后精子质量,添加0.50%效果最佳。  相似文献   

18.
为探讨荷斯坦牛和西门塔尔牛冻精的精液品质及体外受精后胚胎发育能力的差异,利用目测法、低渗膨胀法和考马斯亮蓝染色法评估了荷斯坦牛和西门塔尔牛冻精的活力、质膜完整率和顶体完整率,并比较了二者冻精体外受精后胚胎的卵裂率和囊胚率。结果表明,荷斯坦牛和西门塔尔牛冻精的活力(30.4%和27.2%)、质膜完整率(41.96%和36.22%)和顶体完整率(77.02%和73.02%)均无显著差异(P>0.05),但荷斯坦牛冻精体外受精后的卵裂率(57.5%和48.6%)和囊胚率(30.3%和23.2%)显著高于西门塔尔牛冻精(P<0.05)。提示,不同品种公牛精液体外受精后的发育能力有显著差异(P>0.05)。  相似文献   

19.
【目的】 探究冷冻前添加热休克蛋白A8(heat shock protein A8, HSPA8)和解冻后添加不同浓度精浆(seminal plasma, SP)对冻融猪精子的影响。【方法】 采用手握法采集长白猪精液, 添加0.5 μg/mL HSPA8到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装, 投入液氮中保存3周后进行解冻, 解冻后添加不同浓度精浆(0、10%、30%和50%), 对冻融后长白猪精子的运动能力、质膜完整性、顶体完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、鱼精蛋白缺乏及体外获能水平等进行评估。【结果】 与对照组相比(无HSPA8和精浆), 添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)的精子直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和前向性运动(STR)均显著提升(P<0.05), 精子直线性运动(LIN)和运动的摆动性(WOB)均无显著差异(P>0.05);精子质量参数中活力、质膜完整性和顶体完整性均显著升高(P<0.05), 细胞凋亡水平与线粒体膜电位均显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。之后在解冻液中添加不同浓度的精浆, 与添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)相比, 精浆添加量达到50%时, 精子VSL、VCL、VAP、LIN、STR和WOB均显著提升(P<0.05);精子活力、质膜完整性、顶体完整性和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05), 细胞凋亡水平显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。【结论】 在冷冻基础液中添加0.5 μg/mL HSPA8和解冻稀释液中添加50%精浆联合使用可以有效改善冻融精子质量, 将会对猪精液的冷冻保存及商业化生产提供一定的参考。  相似文献   

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