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随着大量生物领域科研人员进入植物RNA研究领域，开展RNA研究，使得以RNA为终产物的基因组研究取得突破性进展，新的RNA基因不断增加，RNA的新功能不断被发现。但由于RNA的不稳定性，使得RNA操作远比DNA操作困难，且尚有大量未知的RNA及其功能等待人们去探索、研究．而这些研究又都基于高质量RNA的提取。因此，根据笔者自身实验经验，及在查阅大量相关文献的基础上。针对植物总RNA提取的一些关键影响因素、消除对策、RNA检测方法及RNA保存方法上进行了系统的阐述，旨在为高质量植物组织总RNA的制备提供理论参考，为RNA分子生物学实验后续研究提供理论支撑。 相似文献
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一种适用于多糖多酚植物的高质量RNA快速提取方法 总被引：1，自引：0，他引：1
植物总RNA的提取是进行下游分子生物学实验的关键基础,高质量的RNA是下游实验成功的保障。许多植物由于其体内含有酚、多糖以及其他的一些次生代谢物,要获得这些植物高质量的总RNA比较困难。本文在多次实验的基础上,提出了改良LiCl沉淀法,该方法步骤少、效率高,使用此方法得到的棉花幼苗总RNA经检测表明其质量比使用冷酚法提取的RNA要高得多,且完全满足后续实验的要求。使用此方法成功提取了香蕉叶片、根、木薯叶片的RNA,经检测表明,所得到的RNA完整性好,完全可以满足后续实验的要求,说明改良LiCl沉淀法是一种适用于多酚多糖植物的快速RNA提取方法。 相似文献
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椰子树组织中富含多糖和酚类化合物，为了获取高质量的RNA，笔者以椰子树叶片和根部为材料，比较分析CTAB法和SDS法提取RNA的效果。结果表明：CTAB法提取椰子树组织的总RNA效果较好，能有效克服酚类物质和多糖对RNA提取的影响。经OD值检测和电泳检测，总RNA的28 S和18 S条带清晰可见，纯度较高，完整性好，无明显降解，以此RNA为模板进行RT-PCR反应，能获得特异条带，表明该RNA完全可以用于后续的分子生物学操作。 相似文献
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获得高质量的RNA是开展油棕果实发育相关分子生物学基础研究的重要前提和保障。以油棕成熟果肉、胚乳、胚和胚芽4种组织为材料，分别采用Invitrogen公司的Trizol试剂和MRIP法提取总RNA，并比较其提取效果。结果表明：MRIP法提取的RNA质量较好，其中胚芽中的总RNA提取量高达2 139.0 ng/μL，而胚乳中的含量相比较低，仅为1 083.6 ng/μL；MRIP法的总体提取效果优于Trizol试剂，包括RNA完整性、含量、纯度等，适用于油棕及棕榈科植物总RNA提取。 相似文献
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马铃薯S病毒的RT-PCR检测 总被引：3，自引：0，他引：3
根据马铃薯S病毒(PVS)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物。以感染PVS的马铃薯组织和健康的组织为材料,对提取植物总RNA的两种方法进行了比较,并对总RNA的提取方法进行改进,获得了纯度较高,完整性较好的总RNA。以此为模板,进行cDNA合成及PCR扩增,从感病组织扩增得到一段长度约642bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致,而健康组织无此扩增产物。从而建立了检测PVS快速灵敏简便的新方法,在基因水平上为PVS的检测提供了新手段。 相似文献
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总RNA的纯度和完整性对橡胶树分子生物学实验至关重要。为探索更适合橡胶树总RNA的提取方法，本文以巴西橡胶树无性系热研7-33-97叶片为试材，利用凝胶电泳、紫外吸光值测定、RT-PCR检测等方法对CTAB-LiCl法和CTAB-NaAc法提取的总RNA进行比较。结果显示：CTAB-LiCl法提取RNA不仅耗时产率低，且RNA溶液中的Li+和Cl-影响反转录效率。CTAB-NaAc法提取叶片的总RNA经DNaseⅠ处理后凝胶电泳条带完整，产率高，无DNA污染；A260/A280比值为2.03，A260/A230比值为1.96；反转录的cDNA 经PCR检测质量较好。另用CTAB-NaAc法对橡胶树的花、树皮、胚、根进行总RNA的提取，均能得到较高质量的总RNA。 相似文献
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Most multi-purpose water resources have been planned and constructed by governments in Taiwan to meet the water demands of
different users. However, economic and solvency differences among parties using water create conflicts regarding the reasonable
and equitable allocation of investment and operational costs. The Chi-Chi Weir in Nantou County, which was completed in 2002,
meets the high water demand of residents and the needs of industrial growth in central Taiwan. Thus, multi-purpose water reservoirs
are designed to serve agriculture, the public and industry. Three analytical methods, the quantity-based method, marginal
cost method, and separable cost remaining benefit method (SCRB), are employed to compare the cost allocation for different
parties using water. The quantity-based method indicates that proportional costs allocated to agriculture, the public, industry
and new irrigated areas are 88.02, 3.63, 7.86, and 0.49%, respectively. Via the marginal cost method, the proportional costs
allocated to agriculture, the public, hydropower, industry and new irrigated areas are 68.44, 2.51, 28.71, and 0.34%, respectively.
The marginal cost price of water is NT$ 2.97 ton−1; industrial use has the highest price. Based on the SCRB method, the proportional costs allocated to agriculture, the public,
hydropower, and new irrigated areas are 18.2, 22.2, 51.8, 4.8, and 2.9%, respectively. 相似文献
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不同方法从大豆不同组织中提取基因组DNA效果的比较 总被引：11，自引：0，他引：11
从大豆组织中获得高质量和足够产量的基因组DNA,是进行大豆分子生物学研究的基础.为进行大豆基因组的PCR,RAPD,SSR等分子生物学研究,分别以大豆种子和其叶片为实验材料,采用改良的SDS法和CTAB法对大豆基因组DNA进行了提取.对DNA的提取效果,采用紫外分光光度检测、琼脂糖凝胶电泳分析及DNA的限制性内切酶图谱分析进行了综合比较.结果表明,在以叶片为材料时,SDS法和CTAB法的大豆基因组DNA的提取效果差别不大,SDS法稍好于CTAB法.在以大豆种子为材料时,SDS法的提取效果明显优于CTAB法,SDS法可从大豆种子中提取到能够充分满足各种分子操作的高质量和数量的大豆基因组DNA. 相似文献
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为了快速获得较高质量的DNA用于SSR分析,并建立一套稳定的SSR反应体系,以小麦单粒干种子为材料,比较了CTAB法和SDS法获得的DNA条带清晰度和RNA残留带的清晰度;同时,研究了模板DNA浓度、引物浓度、dNTPs浓度以及Taq酶用量对SSR结果的影响。结果表明,CTAB法微量提取小麦干种子DNA可获得理想的扩增结果;SSR的最佳反应体系是:模板DNA浓度为4.0~4.8ng·μL-1,Taq酶用量为1U,引物浓度为50~200nmol·L-1,dNTPs浓度为50~500μmol·L-1。 相似文献
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转基因大豆是目前我国进口量最大的转基因作物,为避免转基因大豆及制品的违法使用,快速筛查大豆中转基因成分的方法策略亟待开发。为检索已知商业化转基因大豆的外源基因信息,通过构建转基因大豆常用转化元件的数据库,建立了转基因大豆的筛查策略。结果表明:已知的15个转基因大豆转化事件中,利用Ca MV35S启动子、CP4-epsps基因、Bt基因、pat基因4个靶标元件的组合,可筛查12个转基因大豆的转化事件;另有3个转化事件需要使用转化事件特异性引物检测。使用4个靶标元件和转化事件组合的筛查方法检测的灵敏度可达到1 g·kg~(-1),可对大豆中的转化事件进行快速、高灵敏度的筛查。 相似文献
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玉米矮花叶病预测预报研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了较准确地预测玉米矮花叶病发生流行情况,对该病进行有效控制,根据历史资料和实际调查数据,应用生长模型预测法、马尔科夫链预测法和回归模型预测法对该病进行了预测预报研究,初步建立了玉米矮花叶病流行预测体系.生长模型预测法可对生长到一定阶段后的春玉米进行玉米矮花叶病短中期预测,对夏玉米出苗后即可进行短中期预测.马尔科夫链预测法可对发生程度作概率预测,可作为玉米矮花叶病长期发生趋势预测预报的一个参考.应用回归模型预测法可进行中期预测,预测一个生长季的最终病情。 相似文献
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马铃薯块茎借休眠以渡过不利其生长的条件,从而保证世代繁衍的遗传特性。马铃薯块茎的大小和休眠时间的长短影响其商品价值和利用时间,储藏过程中的休眠解除会造成水分、养分大量消耗,以至丧失应用价值。随着生产发展的需要,有关马铃薯休眠的研究已经被提出,了解休眠特征和打破休眠的方法,对于栽培和储藏保鲜具有十分重要的意义。 相似文献
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Fabric or foam sheet moulding is an important manufacturing technique for the apparel industry, in particular for bra production.
It is the most economical and convenient method to seamlessly form a garment part into a specified 3D shape. This paper proposes
an example-based method for designing moulded bra cups. In this study, a total of 10 typical moulded bra cup specimens were
scanned using the Steinbichler Comet white light scanner. Parameterization based remeshing and registration algorithm was
used to characterize the 3D shapes of the convex surface of the scanned bra cups. Using an example-based method, virtual master
moulds were constructed based on the 3D surfaces of the investigated bra cups after eliminating the style lines and size differences.
Then a new bra cup design can be developed from the master mould, either by drawing the style lines in the virtual environment
or using scissors to cut the moulded plastic shot along the desired style lines. Different sizes can also be made by grading
the wire frame model in 3D manner. The present method will provide a scientific tool for the product development of new bra
cups which was conventionally very time-consuming and ineffective. 相似文献
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为了准确高效地检测土壤交换性铝含量,探寻适宜的检测方法。比较分析了氯化钾交换-中和滴定法、铝试剂法和羊毛铬花青R比色法所测交换性铝的差异性、精密度、准确性和适用性。结果表明,3种方法所测交换性铝无显著性差异。但羊毛铬花青R比色法的精密度优于氯化钾交换-中和滴定法和铝试剂法,羊毛铬花青R比色法平均回收率达99.28%,准确性高于另2种方法。羊毛铬花青R比色法的线性范围在0~0.32 mg/L,对应吸光值范围在0~0.778;铝试剂法的线性范围在0~0.8 mg/L,对应吸光值范围在0.006~0.157;与铝试剂法相比,羊毛铬花青R比色法的线性范围小于铝试剂法,但其吸光值范围大于铝试剂法。羊毛铬花青R比色法显色剂与显色物质吸收峰间隔较远,测定背景干扰小,方法灵敏度较高。羊毛铬花青R比色法检测单个样品的平均用时为4.2 min,检测效率高于另2种方法,且操作简捷,适用性较高。因此,推荐羊毛铬花青R比色法为土壤交换性铝的测定方法。 相似文献