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1.
嗜水气单胞菌菌毛的提纯及特性分析 总被引：4，自引：0，他引：4
用电镜观察嗜水气单胞菌Ｊ－１株，见有两种不同的菌毛，一种为短而硬直的Ｒ菌毛，另一种为长而易弯曲的Ｗ菌毛。Ｒ菌毛数量多，周身分布；Ｗ菌毛数量少，一个菌体仅４～６根。搅拌菌体悬液可使菌毛脱落，低速离心的上清液经ＰＥＧ沉淀、硫酸铵盐析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ层析后，获得纯化的Ｒ菌毛。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，在有２－巯基乙醇存在时，Ｒ菌毛的亚单位分子量为１７０００。氨基酸组分分析表明，Ｒ菌毛含有４１％的疏水性氨基酸。用纯化的Ｒ菌毛免疫家兔获抗血清，建立菌体凝集试验和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，检测５０个待检样本的Ｒ菌毛，两法检出率均超过６０％，符合率为８８％。 相似文献
2.
检测棉花黄萎病菌的间接ELISA法建立与应用 总被引：8，自引：0，他引：8
棉花黄萎病菌（大丽轮枝菌－ＶＤ８）培养液中产生的毒素经纯化后获得电泳纯毒素ＰＬＰｓ,制备ＰＬＰｓ的抗血清,建立了检测棉花黄萎病菌毒素的间接ＥＬＩＳＡ方法。研究结果显示,ＰＬＰｓ抗血清的效价为１：１０２４００,最低检测为１．５６ｎｇ。间接ＥＬＩＳＡ法检测显示,ＰＬＰｓ的免疫抗血清可以与多种棉花黄萎病菌菌株体外培养液,带菌棉籽的培养液,以及病棉的叶脉、叶柄及茎杆的榨取液发生特异性的反应,而与其他致病菌 相似文献
3.
应用玻片凝集、琼扩试验、抗Ｄ－甘露糖微量血凝试验（ＭＲＭＨ）证实所购３株大肠杆菌只表达Ｋ８８菌毛；该菌毛的特与资料报道的完全一致。通过比较上述３种方法的敏感性，本文还提出了筛选、鉴定Ｋ８８菌株的可行方法。用ＳＤＳ－ＰＡＱＧＥ分析该菌毛的粗提物表明其中含有一种分子量为２４０００Ｄａ的蛋白质，它可能就是Ｋ８８菌毛蛋白。 相似文献
4.
在探讨原生质体制备、融合及再生条件的基础上，采用聚乙二醇（ＰＥＧ）对耐高温的酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＨＵ－ＴＹ－１Ａ菌株和淀粉发酵力最强的糖化酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｄｉ－ａｓｔａｔｉｃｕｓ）５２０６－１Ｂ菌株进行种间或同株间的原生质体融合，获得了数株ＨＵ－ＴＹ－１Ａ和５２０６－１Ｂ的同株以及种间融合株，融合率为（１．３～９．０）×１０￣（－６）．通过测定融合株的细胞体积大小、ＤＮＡ含量、遗传稳定性和营养要求等表明：融合株细胞体积和ＤＮＡ含量约为两亲株之和；种间融会株具有双亲株的遗传特性；融合株的倍性为２ｎ，３ｎ，４ｎ及５ｎ。 相似文献
5.
马铃薯淀粉凝集菌的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
从马铃薯、豌豆和绿事瓣自然发酵“酸浆”中分离到５株淀粉凝集菌（ＳＴ－１、ＰＳ－１、ＰＳ－２、ＰＡ－１和ＰＡ－２）鉴定为乳酸链球菌。５个菌株均具有民铃薯淀粉凝集和沉降的能力，其中从马铃薯“酸浆”中分离到的ＳＴ－１株作用最强。结果还表明，５个菌还能使马铃薯的褐用显著减弱。 相似文献
6.
水稻纹枯病拮抗细菌的分离和筛选 总被引：2，自引：0，他引：2
从水稻叶鞘、根系,玉米叶鞘和土壤中以及稻纹枯病菌菌核上分离到３６０株细胞,经平板抑菌初测得到５９株拮抗菌。其中,抑菌带宽０．５６～０．８４ｃｍ的７株中,除Ｂ１－２－１外,其它６个ＭＳＥ系列菌株均来自玉米叶鞘。分离材料不同,其拮抗细菌的分离率明显不同。即稻体最低（４．２５％）,土壤纹枯病菌菌核最高（２３．８％）,玉米居中（１６．３％）。在室内人工接种病菌条件下,测定其中４３个拮抗菌株对离体稻秆纹枯病的控制作用,筛选到防效在４８．４７％～９０．９５％的１３株。其中,ＭＳＥ１－７,ＰＢＲ－１,ＭＳ２－１,Ｌ１－３－１,Ｈ１－４,Ｌ１－５－３的防效均达８０％以上。对上述１３个菌株补加ＭＳＥ１－４,共１４个供试菌,接种病菌,对再生稻纹枯病防效为３２．００％～４７．７８％的５株（其中ＭＳＥ１－４为４７．７８％,Ｌ１－５－３为４０．４４％）。其中,ＭＳＥ１－４,ＭＳＥ１－７对稻苗地上部生长有一定的抑制效应,干重分别比对照降低６．８５％和１．３４％,但对根系有促生作用,根系干重分别比对照增加１０．２５％和２．８１％;Ｌ１－５－３,３′－７１和ＭＳ２－１对稻苗地上、下部生长均表现不同程度的促进作用。 相似文献
7.
洪湖市土壤中快生型大豆根瘤菌的多样性 总被引：2，自引：4，他引：2
从湖北省洪湖市土壤中分离纯化了９２株快生型大豆根瘤菌。用来自８个取样地点的１２个快生型典型菌株和１个慢生型菌株的抗血清检测了该快生型大豆根瘤菌群体的抗原构成。其中６５株菌归入１５个血清型，２０．７％属于ＵＳＤＡ２０５型，１５．２％为Ａｄ３０１（１）型。有２７株不与已知抗血清反应，为未知的血清型。对供试菌株质粒进行的快速检测结果表明，各菌株均含有２～６个质粒，其中最大的质粒在５００Ｍｄ左右。含４个质 相似文献
8.
出发菌株是通过原生质体融合而获得的酿酒酵母（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）菌株ＨＵ－ＴＹ－１Ａ与糖化酵母（Ｓ．ｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓ）菌株５２０６－１Ｂ的不同核倍性融合株．经对其生长速率、生物量、耐渗性、耐酒精能力以及发酵力等的测定,表明均不同于原双亲株ＨＵ－ＴＹ－１Ａ和５２０６－１Ｂ;同时发现两株性状优异的四倍体菌株：４ＡＢ２－６０和４ＢＡ１－３．在３０℃培养时,其生长速率和生物量略高于亲株或与之相当,４０℃时明显高于双亲株,耐高渗、耐酒精能力高于５２０６－１Ｂ,与ＨＵ－ＴＹ－１Ａ相当;３０℃淀粉发酵与５２０６－１Ｂ接近,４０℃时则优于５２０６－１Ｂ;３０℃葡萄糖发酵,４ＢＡ１－３低于５２０６－１Ｂ,高于ＨＵ－ＴＹ－１Ａ,４ＡＢ２－６０则优于双亲株,４０℃时,４ＡＢ２－６０和４ＢＡ１－３均优于双亲株．同时我们还发现不同倍性的同株融合株之间存在一定的基因表达剂量效应． 相似文献
9.
Dot—ELISA快速检测鱼类动物性气单胞菌的研究 总被引：5，自引：1，他引：5
制备了引起常见鱼病的６株运动性气单胞菌的兔抗血清，建立了检测运动性气单胞菌的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法，该法能检出含１０＾菌细胞／ｍＬ的菌悬液及１０个菌细胞／ｍＬ增菌２０ｈ的培养物，与运动性气单胞菌群内的菌株，均呈现明显的阳性反应，不与鲁克耶尔森氏菌，荧光假单胞菌，鳗弧菌等１０株对照菌发生影响检测结果的交叉反应。应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ与常规分离法分别对人工感染的４０份样本进行检测，其阳性数分别为３３和３ 相似文献
10.
Dot-ELISA快速检测鱼类运动性气单胞菌的研究 总被引：2，自引：2，他引：2
制备了引起常见鱼病的６株运动性气单胞菌的兔抗血清，建立了检测运动性气单胞菌的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法。该法能检出含１０７菌细胞／ｍＬ的菌悬液及１０个菌细胞／ｍＬ增菌２０ｈ的培养物，与运动性气单胞菌群内的菌株，均呈现明显的阳性反应，不与鲁克耶尔森氏菌、荧光假单胞菌、鳗弧菌等１０株对照菌发生影响检测结果的交叉反应。应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ与常规分离法分别对人工感染的４０份样本进行检测，其阳性数分别为３３和３４，两法符合率为９７％。经Ｘ２检验表明，两法检测结果间有显著意义的一致性（Ｐ＜０．０５），但前者可在２４ｈ内报告结果。应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ又对８株鱼源菌检定，结果与细菌学检查相符。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法具有快速、敏感、特异、实用的优点，可用于引起常见鱼病的运动性气单胞菌群的检测。 相似文献
11.
鱼炎宁是一种以中西药结合研制而成的新型鱼药。本文报道了该药的体外抑菌试验和体内治疗试验的结果：试验表明鱼炎宁具有高度的抗菌作用，当浓度低到１：５１２０时仍对嗜水气单胞菌有明显的抑菌作用，病菌不能生存。嗜水气单胞菌、荧光极毛杆菌、巴氏杆菌、沙门氏杆菌、葡萄球菌等革兰氏阴性和阳性菌均对鱼炎宁极敏感。体内治疗试验表明，鱼炎宁对鲫鱼嗜水气单胞菌感染的保护率达９３．３３—１００％，具有显著的治疗效果，而且毒性很低。 相似文献
12.
从上海野生动物园百鸟园饲养的病死噪鹛中分离到一株革兰氏阴性、有运动力的短杆菌。其生化特性为氧化酶阳性;发酵葡萄糖产酸产气;发酵甘露醇、七叶苷、阿拉伯糖和蔗糖;不发酵肌醇;鸟氨酸脱羧酶阳性，对新生霉素不敏感，VP试验阳性。用致病性嗜水气单胞菌，检测试剂盒试验呈阳性结果。毒力试验显示，分离株对小鼠的LD50为5×103CFU,具有很强的致病性。经鉴定该病原菌为嗜水气单胞菌（Aeromonashydrophila）。 相似文献
13.
[目的]建立一种基于PCR的致病性嗜水气单胞菌的检测方法。[方法]采用平板划线法从患病鲫鱼病灶部位分离、纯化获得嗜水气单胞菌,采用CTAB法提取DNA,根据GenBank已经登录的致病性嗜水气单胞菌气溶素基因保守序列设计引物P1和P2,并以P1、P2为引物对其进行PCR扩增,将测序结果在Blast上进行比对分析。[结果]PCR扩增得到一条约540 bp的条带,Blast分析表明该基因与GenBank登录的气溶素基因的同源性达95.67%。[结论]试验建立的致病性嗜水气单胞菌气溶素基因PCR检测方法简单、可行。 相似文献
14.
吴建农 《上海海洋大学学报》1997,(2):112-115
从患细菌性败血症的鲢肝脏中分离到一菌株，编号青１－２－３。通过代感染试验，发病症状与自然病鱼基本一致，对致病菌株进行细菌学鉴定为嗜水气单胞菌。青１－２－３的生化表型不同于银鲫病原，为致病性嗜水气单胞菌的不同菌株。 相似文献
15.
鲢细菌性败血症病原的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
吴建农 《上海水产大学学报》1997,6(2):112-115
从患细菌性败血症的鲢肝脏中分离到一菌株，编号青１－２－３。通过代感染试验，发病症状与自然病鱼基本一致，对致病菌株进行细菌学鉴定为嗜水气单胞菌。青１－２－３的生化表型不同于银鲫病原，为致病性嗜水气单胞菌的不同菌株。 相似文献
16.
以嗜水气单胞菌（AhJ-1）灭活疫苗腹腔注射免疫鲫鱼（Crucian carp）,加强免疫后取血分离出淋巴细胞,进行巨噬细胞移动抑制试验,结果显示致敏淋巴细胞于体外培养时,在特异性抗原刺激下,产生了巨噬细胞移动抑制因子,抑制了巨噬细胞移动,移动抑制指数约为0.67,初步说明细胞免疫应答在鲫鱼的免疫应答中具有一定的地位。 相似文献
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杜仲叶粉对鲤鱼免疫力的影响 总被引：42，自引：1，他引：42
罗庆华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2002,28(1):51-53
为了开发理想的鱼用中草药饲料添加剂，在鲤鱼饲料中添加2%，4%，6%的杜仲叶粉，饲养30d后，测定鲤鱼的体重及嗜水气单胞菌活菌攻毒后的免疫保护力，接种经福尔马林灭活的嗜水气单胞菌（F-AH），21d后测定各试验组与对照组血清的凝集抗体效价和血液中白细胞的吞噬活性，研究杜仲叶粉对鲤鱼免疫力的影响。结果表明：饲料中添加杜仲粉能明显提高鲤鱼的免疫应答水平，增强的抗细菌感染能力，促进鲤鱼的生长，尤以添加4%，6%的效果显著。 相似文献
18.
鱼血清转铁蛋白对嗜水气单胞菌的抗性研究 总被引：2，自引：0，他引：2
嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)在铁限制培养基(M70-Fe)中培养,并用铬天青S(CAS)方法分析,不能产生可检测的含铁细胞;培养两周后,该菌在蓝色的琼脂培养基上产生围绕细菌菌落的清晰的橘黄色晕轮。但在鲫鱼血清中培养36h后,便达到了对数生长期。表明嗜水气单胞菌依靠夺取血清中的铁,可以正常生长;而在铁限制培养时,则难以存活。以细菌胞外蛋白酶消化鱼类血清,并在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)后进行原位铁结合试验,结果表明：嗜水气单胞菌胞外蛋白酶只能通过降解血清中转铁蛋白以外的含铁蛋白来补偿含铁细胞中的铁,而含铁转铁蛋白和脱铁转铁蛋白均不能被胞外蛋白酶消化,仍有很强的铁结合能力。 相似文献
19.
嗜水气单胞菌表层蛋白及外膜蛋白的初步分析 总被引：5，自引：0，他引：5
用甘氨酸缓冲液处理对鱼类致病的嗜水气单胞菌代表菌株 Ah J-1菌体细胞,可使该菌表层蛋白(S层)成片脱落。电镜观察发现,S 层是由四边形的蛋白亚单位呈晶格样排列而成。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明,该蛋白的分子量约50k;免疫印迹显示,它是 Ah J-1的主要表面抗原。另将 Ah J-1用 Triton X-100选择性抽提,经 SDS-PAGE,在考马斯亮蓝染色图谱中显示其外膜蛋白(OMP)为3条主要蛋白带,分子量分别为34,46和58k. 相似文献
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铁对嗜水气单胞菌毒力因子的影响 总被引：7，自引：0，他引：7
用含不同浓度铁离子的培养基培养嗜水气单胞菌Ｊ－１株,３６ｈ时检测细菌含量以及毒素、蛋白酶、载铁体的表达量。发现菌液的浓度随着Ｆｅ２＋浓度的升高而升高,而毒力因子的表达量则相反,当Ｆｅ２＋的加入浓度为０时,毒素、蛋白酶、载铁体的表达量达最大值。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳及免疫转印分析细菌的外膜蛋白（ＯＭＰ）,嗜水气单胞菌Ｊ－１株在表达载铁体的同时多表达一条ＯＭＰ,其相对分子质量为７１．７×１０３,应为载铁体的受体。此时,经ＥＬＩＳＡ检测细菌菌体及抽取物Ｓ蛋白为阴性;经超薄切片电镜观察,菌体无Ｓ层结构。随着铁离子浓度的降低,Ｊ－１株毒素、蛋白酶及载铁体的表达增多,菌体Ｓ蛋白消失,并产生相应的ＯＭＰ条带,显示铁对嗜水气单胞菌毒力因子的产生具有重要影响。 相似文献