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相似文献
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1.
二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)、乙二醇(EG)和甘油(GL)4种冷冻保护剂程序化冷冻牛GV期卵母细胞的结果表明,EG和PROH的保护效果比GL和DMSO好。4种不同冷冻方法冷冻保存牛GV期卵母细胞,比较解冻后卵母细胞的体外成熟率、受精后卵裂率。结果表明,在程序化冷冻法与细管玻璃化法(Straw)之间的差异不显著(P>0.05),在开放式拉管法(OPS)与毛细玻管法(GMP)之间的差异不显著(P>0.05);但OPS和GMP与程序化冷冻法和Straw之间的差异极显著(P<0.01)。玻璃化冷冻效果优于程序化冷冻。说明GMP和OPS玻璃化冷冻优于Straw玻璃化冷冻。说明可以采用GMP方法冷冻保存牛GV期卵母细胞。  相似文献   

2.
不同冷冻曲线对种公牛精液冷冻质量的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
种公牛精液的冻后活力是评定冷冻精液品质好坏的重要指标之一,也是影响牛人工授精受胎率的重要因素.影响冻精解冻后活力的因素包括种公牛个体差异(鲜精品质、耐冻性)、稀释液(甘油浓度、稀释液成分)、生产工艺(稀释方法、平衡、冷冻方法、冷冻曲线)和解冻方法等.而冷冻速度,即精子通过对细胞产生致死性伤害的0~-60℃温度区的速度,是决定冷冻精液冻后品质好坏的关键所在.  相似文献   

3.
在简化牛卵母细胞体外成熟的基础上,观察了保护剂、平衡温度、预平衡方法、解冻方法以及冷冻方法对牛卵泡卵母细胞冷冻的影响。结果表明:在体外成熟培养液中添加26.2 mmol/L的NaHCO3和对屠宰场卵巢进行选择更能促进牛卵母细胞的体外成熟;无论是程序冷冻还是玻璃化冷冻,乙二醇(EG)与甘油(GLY)相比更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻效果;在程序冷冻中,冷冻液中添加0.1 mol/L蔗糖比添加0.3mol/L的蔗糖更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻;在玻璃化冷冻中,37℃和25℃的平衡温度比4℃更适合牛卵泡卵母细胞的冷冻;在10%、5%、1%的预平衡浓度之间,5%的预平衡浓度即可达到预平衡的效果;在解冻时,多步脱除保护剂更能保护冷冻的卵母细胞;比较了几种最小样本量(minimum size sample,MSS)玻璃化冷冻方法,解冻成熟培养后的成熟率,拉细毛细玻璃管冷冻法为(41.67±3.19)%,极显著高于未拉细毛细玻璃管冷冻法(glassmicropipette,GMP)的(30.19±1.93)%和固体表面冷冻法(solid surface vitrification,SSV)的(28.33±2.89)%(P<0.01)。  相似文献   

4.
本试验选择BPSE(Blesville Poultry Semen Extender)作为精液稀释液,以二甲基乙酰胺(dimethylacetamide,DMA)和乙二醇(ethylene,EG)2种试剂作为抗冻剂,分别以不同的质量浓度进行组合,对杏花鸡精液冷冻保存的平衡时间、冷冻方式和解冻温度以及时间等影响精液冷冻效果的关键因素进行了研究。结果如下:(1)质量浓度分别为4%DMA和6%EG的抗冻剂对精液保护效果较好,精子冻后活力分别为0.466和0.464,两者之间差异不显著;(2)选择质量浓度为6%EG为抗冻剂,平衡8 min后的精子活力最高,为0.542;(3)在(2)的基础上,选用颗粒冷冻和细管冷冻2种方式冷冻,分别在水浴锅里以40℃、55℃、70℃3个温度解冻。结果表明,用颗粒冷冻在55℃水浴锅里解冻的精子活力最高,为0.482;(4)采用颗粒冷冻和细管冷冻2种方式对新鲜精液冷冻解冻后与新鲜精液一起进行人工授精,捡蛋入孵后统计受精率,细管冷冻、颗粒冷冻以及鲜精的受精率为0、0和92.52%。结论:在本试验中,以6%EG为抗冻剂,在5℃下平衡8 min,用颗粒冷冻的方法在55℃恒温水浴箱内解冻可以使解冻后的精子达到最大的存活率;授精试验效果不佳,表明该程序虽然可以使精子存活,但是对精子有损害作用。  相似文献   

5.
不同冷冻和解冻方法对小鼠桑椹胚发育的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
本试验以2种程序化冷冻液和2种玻璃化冷冻液对昆明白系小鼠的桑椹胚进行细管法冷冻保存,比较程序化冷冻-管外解冻和玻璃化冷冻-管内解冻对胚胎体内、外发育的影响。胚胎体外培养结果表明:玻璃化冷冻组及程序化冷冻组胚胎发育率(95.3% ̄95.8%,98.9%)无显著(P>0.05)差异。将程序化冷冻、EFS30玻璃化冷冻以及新鲜的胚胎各168枚移植给假孕受体鼠,妊娠受体产活仔率各组间相比(50.8%,58.3%,54.9%)无显著性(P>0.05)差异。结果证明,玻璃化冷冻保存的胚胎管内解冻效果好,为生产中家畜的胚胎移植提供了理论和技术参考。  相似文献   

6.
以广西巴马小型猪为供体,采用超数排卵技术,采集5~6日龄的胚胎(囊胚/桑椹胚),比较2种冷冻方法、胚胎承载工具、透明带处理和冷冻胚胎移植受体对猪胚胎冷冻效果的影响.结果表明,2种冷冻方法的冷冻效果没有显著差异;GMP法能显著提高冷冻胚胎存活率(83.8%vs 77.6%,P<0.05)和囊胚细胞数(47.5 vs 53.1,P<0.05);以0.5%链蛋白酶10 s处理透明带,虽然对猪胚胎存活率没有显著影响,但能显著提高囊胚细胞数(60.1vs 46.6,P<0.01);以地方猪种(枫泾母猪)为冷冻胚胎移植受体能显著提高妊娠率和胚胎效率(P<0.01).  相似文献   

7.
本研究旨在探讨东佛里生奶绵羊冷冻稀释液中添加维生素B12以及不同冷冻保护剂对冷冻精液品质的影响,并筛选适合东佛里生奶绵羊的精液冷冻程序。通过假阴道法采集3只健康配种用东佛里生奶绵羊的精液,分为3组,分别为对照组(基础稀释液+6%甘油)、维生素B12组(基础稀释液+6%甘油+0.05 mg/mL维生素B12)、冷冻保护剂组(基础稀释液+5%乙二醇)。在-10~-100℃温区内设置3种降温速率(40、30、20℃/min)进行冷冻。结果显示:维生素B12组冷冻精液的运动性能和畸形率较对照组没有显著变化;对照组冷冻精液的总活率、前向运动比例、平均路径速度、直线速度、曲线速度、直线性、鞭打频率、摆动性优于冷冻保护剂组(P<0.05),畸形率低于冷冻保护剂组(P<0.05)。在冷冻程序的设计上,在-10~-100℃温区内以-40℃/min速率进行降温的冷冻程序A,其冷冻精液总活率、前向运动比例、平均路径速度、直线速度、曲线速度、直线性优于其他2个程序(P<0.05),其畸形率最低(P<...  相似文献   

8.
为了探索不同家禽卵黄在德国牧羊犬精液冷冻中的应用效果,分别在精液冷冻稀释液中添加不同家禽(鸽、鸡、鸭、鹅和鹌鹑)和不同浓度(10%、15%、20%、25%和30%)的卵黄,并分别对冷冻前和解冻后的精子活率、顶体完整率和畸形率进行比较分析。结果:在德国牧羊犬精液冷冻稀释液中加入相同浓度的5种不同家禽卵黄,家鸽组冻后活率、顶体完整率和畸形率分别为(52.0±2.1)%、(54.3±3.7)%和(27.7±1.8)%,对德国牧羊犬精液冷冻有最佳的保护效果,其最佳浓度为20%。因此,鸽卵黄可替代鸡卵黄,作为冷冻稀释液的组成成分,用于德国牧羊犬的精液冷冻。  相似文献   

9.
采用PBS作为冷冻基础液,分别用甘油和二甲基亚砜(DMSO)作为冷冻保护液,在程序化冷冻保存和玻璃化冷冻保存条件下,研究小鼠生发泡期(GV期)卵母细胞的抗冻能力。结果表明,2种冷冻方法对小鼠GV期卵母细胞解冻后形态正常率和存活率无显著影响(P>0.05)。冷冻保护剂种类对小鼠GV期卵母细胞解冻后形态正常率无显著影响(P>0.05);但对存活率有显著影响,玻璃化冷冻采用二甲基亚砜作为冷冻保护液效果极显著优于甘油(P<0.01)。以冷冻效果较好的二甲基亚砜作为冷冻保护液,采用玻璃化冷冻不同发育阶段(GV期和MⅡ期)的小鼠卵母细胞,解冻后形态正常率无显著差异(P>0.05),但存活率GV期要显著优于MⅡ期卵母细胞(P<0.05)。  相似文献   

10.
为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明:两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG...  相似文献   

11.
完善种公牛饲养管理规程和冷冻精液生产质量控制体系,是保证冷冻精液质量的有效措施。对云南省种畜繁育推广中心生产的牛冷冻精液质量指标进行检测和统计分析,结果:冻精解冻活力平均(42.10±1.81)%,每剂量有效精子数平均(1449.0±312.3)万个,畸形率平均为(15.41±2.56)%,微生物菌落数平均(16.66±13.88)个。结论:规范的牛冷冻精液生产工艺流程和规范的饲养管理是牛冷冻精液质量的保障。  相似文献   

12.
小尾寒羊精液保存技术研究   总被引:2,自引:3,他引:2  
为了充分发挥种公羊的生产潜力,快速扩繁优良群体,本实验以取材方便的小尾寒羊为实验动物,对其精液采用室温、低温和细管法冷冻3种保存方法进行了研究。结果表明:在低温(4±0.5)℃条件下稀释保存小尾寒羊精子,显著优于室温(23±2)℃条件下的保存效果。其中采用II液低温保存绵羊精子的时间和活率(168 h,0.35)显著优于III液(72 h,0.30)I、V液(48 h,0.35)和I液(18 h,0.42)。而采用III液冷冻保存绵羊精液,其解冻后活率(0.532±0.004)极显著高于IV液(0.470±0.003)I、液(0.445±0.004)和II液(0.432±0.012)3种冷冻稀释液(P<0.01)。4种冷冻稀释液冷冻解冻后的精子,均能在室温下6 h内保持0.35以上的活率。  相似文献   

13.
试验为探究2种不同冷冻稀释液对公猪精液稀释冷冻效果的影响。试验采用手握法采集同一头公猪精液,将采集的精液分为2组,进行液氮熏蒸制作细管冻精,分别使用Ⅰ号冷冻稀释液和Ⅱ号冷冻稀释液对猪精液进行冷冻保存,24 h后检测2种冷冻稀释液细管冻精的活力。结果显示,Ⅰ号冷冻稀释液冷冻解冻后的精子活力显著高于Ⅱ号冷冻稀释液(P0.05),同一种稀释液距液氮面5 cm进行熏蒸冷冻的效果较距液氮面4 cm冷冻效果好,但差异不显著(P0.05)。研究表明,利用Ⅰ号冷冻稀释液在距液氮面5 cm处进行液氮熏蒸冷冻可获得较好的公猪冷冻精液。  相似文献   

14.
采取低温冷冻法、冷冻干燥法提取黄芪多糖,将两种方法提取的黄芪多糖配成制剂(400mg/kg)灌喂大白鼠15d,检测13项血液生理指标及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素(UREA)、总胆固醇(TC)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(Glu)的活性.结果表明:低温冷冻组、冷冻干燥组白细胞总数(WBC)显著低于对照组(P<0.05),低温冷冻组Lym、Mid%极显著高于对照组(P<0.01),冷冻干燥组中值细胞百分数(Mid%)显著高于对照组(P<0.05>;低温冷冻组、冷冻干燥组血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)显著高于对照组(P<0.05);低温冷冻组的TP、Glu活性极显著高于对照组(P<0.01),AST、UREA活性极显著低于对照组(P<0.01),冷冻于燥组对照组TP、Glu活性显著高于对照组(P<0.05),AST、UREA活性显著低于对照组(P<0.05).  相似文献   

15.
以MII期卵母细胞作为试验材料,应用玻璃化冷冻方法,就目前应用最多的7组冷冻保护液配方进行筛选,并且比较3种不同冷冻载体冷冻卵母细胞的效果。结果发现:7组冷冻保护液对MII期卵母细胞有低毒性作用,各组分裂率、囊胚率、囊胚细胞数均低于对照组;综合各组指标,选取3组对猪MII期卵母细胞的发育能力损伤最小的冷冻保护剂,应用GMP管对其冷冻保护效果进行比较,发现第7组冷冻保护液配方EFS不适于MII期卵母细胞的冷冻,其形态正常率、分裂率分别为1.19%、0,与第3组、第6组形态正常率、分裂率(59.48%、53.55%;24.19%、35.02%)差异显著(P0.05)。综合考虑,选取HM+7.5%(DMSO+EG),HM+17%(DMSO+EG)+0.4 mol/L Su作为冷冻保护剂来比较3种不同冷冻载体冷冻卵母细胞的效果差异,发现半麦管冻融后MII期卵母细胞的分裂率高达53.67%,与OPS法的29.33%及GMP法的35.00%相比差异显著(P0.05),半麦管法更适合MII期猪卵母细胞的玻璃化冷冻。  相似文献   

16.
为了比较冷冻叶片(Cryoleaf)、冷冻帽(Cryotop)、自制半麦管(hemi-straw)三种冷冻载体的冻存效果,试验采用玻璃化冷冻方法冻存昆明小鼠8-cell胚胎。结果表明,Cryoleaf组、Cryotop组和hemi-straw组胚胎复苏率分别为92.3%、89.2%和86.2%,三组比较差异不显著(P0.05)。Cryoleaf组、Cryotop组及hemi-straw组胚胎的囊胚形成率分别是95.0%、91.4%和80.4%,三组比较差异显著(P0.05);新鲜对照组囊胚形成率为98.5%,与Cryoleaf组、Cryotop组分别比较差异不显著(P0.05),与自制hemi-straw组比较差异显著(P0.05)。结论:采用玻璃化冷冻方法冻存小鼠8-cell期胚胎,使用Cryotop和Cryoleaf作为冷冻载体,可以获得更高的复苏率和囊胚率,优于自制hemi-straw,可以很好地用来冻存人类的胚胎。  相似文献   

17.
用液氮熏蒸法在氟板上制作冻精颗粒,以解冻后的精子活率、活力和质膜完整性为判定指标,比较4种冷冻稀释液及不同冷冻-解冻程序对五指山小型猪精液冷冻的效果。结果表明:①Ⅳ号冷冻稀释液冷冻解冻后精子的活率(0.610±0.036)、活力(0.427±0.025)和质膜完整性(0.503±0.015)均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号冷冻稀释液(P<0.05)。②实验中精液在4℃冰箱中平衡降温2 h的精液精子活力、质膜完整性均好于在17℃平衡3 h再放入4℃冰箱中平衡2 h的解冻效果,而且精子活率差异显著(P<0.05)。③湿解法的效果优于干解法。  相似文献   

18.
采用JC-1染色结合流式细胞仪和激光共聚焦显微镜,分别对4组牛精液样品(鲜精、分离精液、普通冻精和分离冻精)的线粒体膜电位进行检测,研究分离和冷冻处理对牛精子线粒体膜电位的影响。结果表明:分离处理对A和B种公牛的精子线粒体膜电位影响不显著(P0.05),但对C种公牛影响显著(P0.05);而冷冻处理后,A、B和C种公牛的线粒体膜电位均显著变化(P0.05);且鲜精时线粒体膜电位无显著差异的A和B种公牛,分离后线粒体膜电位出现显著差异(P0.05)。当精液从采集到处理的间隔时间在24h以内时,分离处理后精子线粒体膜电位无显著性变化(P0.05),但同样时间间隔内冷冻处理后,精子线粒体膜电位显著变化(P0.05)。实验表明和分离处理相比,冷冻处理对精子线粒体膜电位的影响更为显著,且不同种公牛对分离和冷冻处理的耐受性不同。  相似文献   

19.
比较了普通冷冻(-20℃)、快速冷冻(-80℃)、急速冷冻(液氮浸渍,-196℃)3种冷冻方式及冷冻前采用氯化钙溶液预处理对新鲜桑椹营养活性成分含量和硬度的影响程度,明确适合桑椹保鲜的冷冻方式。与普通冷冻方式相比,采用快速或急速冷冻方式能有效降低桑椹在解冻过程中的汁液流失率。经不同方式冷冻后桑椹在解冻过程中,含有的花青素、总酚和维生素C均会不同程度损失,其中花青素和维生素C的损失程度在不同冷冻方式处理组间差异不显著。采用5 g/L氯化钙溶液进行预处理能显著减少冷冻桑椹中原果胶的损失,并且快速冷冻或急速冷冻处理组桑椹中的可溶性果胶含量显著高于普通冷冻处理组的桑椹。经扫描电子显微镜观察,快速冷冻和急速冷冻处理组桑椹的组织细胞结构与新鲜桑椹相近,说明冷冻前采用氯化钙溶液预处理能在一定程度上维持桑椹细胞结构的稳定性。研究结果表明,与普通冷冻方式相比,采用快速冷冻和急速冷冻对维持桑椹的硬度与减少汁液流失具有一定作用;冷冻前采用氯化钙溶液预处理能显著降低桑椹中的原果胶损失。生产中对新鲜桑椹的贮藏,适宜采用氯化钙溶液预处理结合快速冷冻或急速冷冻的方式。  相似文献   

20.
赵傲雪  张晓娟  刘慧慧  曾彦军 《草业科学》2016,33(11):2248-2253
以采集于甘肃省临泽县境内的芒颖大麦草(Hordeum jubatum)种子为材料,测定了种子的休眠率,并研究了去除种柄、预先冷冻、预先干热、硝酸钾(KNO_3)、赤霉素(GA3)、蒸馏水浸种和开水浸种7种处理方法破除休眠的效果。结果显示,参试种子的休眠率为73%~77%。预先冷冻、预先干热、KNO_3、GA3和蒸馏水浸种均能显著降低参试种子的休眠率(P0.05),但以预先冷冻和GA3溶液预湿发芽床两种处理的效果为最好。预先冷冻和GA3处理后种子的萌发率和萌发指数达到最大值,分别为92%、89%和39.80、42.99;平均萌发时间为最小值,分别为2.43和3.10d。去除种柄和开水浸种均未能有效破除种子休眠(P0.05)。综上分析认为,参试种子休眠属于轻度生理休眠。  相似文献   

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