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相似文献
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1.
转液胞膜AtNHX1基因的白三叶耐盐性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以白三叶(Trifolium repens)吸胀种子的子叶为转化体,用根癌农杆菌(Agrobacterium auncfaciens)介导法将拟南芥(Arabidopsis)液胞膜Na /H 逆向转运蛋白基因AtNHX1转入白三叶,经过筛选、分化和再生,得到了具有卡那霉素抗性的转基因植株.对这些植株进行PCR、Southern印迹和Northern杂交分析,结果表明,外源目的基因已经整合到白三叶基因组中并且得到了表达.室内耐盐性试验结果表明,表达AtNHX1的转基因植株总叶面积和地上部分干重都显著高于非转基因对照,说明液胞膜上的AtNHX1基因有助于提高白三叶耐盐性.  相似文献   

2.
以白三叶吸胀种子的子叶为转化体,用农杆菌介导法将拟南芥液胞膜Na+/H+ 逆向转运蛋白基因AtNHX1转入白三叶,经过筛选、分化和再生,得到了具有卡那霉素抗性的转基因植株。对这些植株进行PCR、Southern 印迹和 Northern 杂交分析,结果表明,外源目的基因已经整合到白三叶基因组中并且得到了表达。室内耐盐性试验结果表明,表达AtNHX1的转基因植株总叶面积和地上部分干重都显著高于非转基因对照,说明液胞膜上的AtNHX1基因有助于提高白三叶耐盐性。  相似文献   

3.
三价转基因抗病毒西瓜的培育   总被引:6,自引:0,他引:6  
利用西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)外壳蛋白(CP)基因、西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)复制酶(NIb)基因和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)复制酶基因构建三价植物表达载体,根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化西瓜(Cirrullus lanams)子叶外植体获得再生植株。经PCR和Southern-blot检测,证明目的基因成功地导入西瓜植株,并能够在后代植株中遗传,转化效率约为1.7‰。在温室和大田对T2、T3代转基因株系进行了病毒接种实验和抗病性筛选鉴定,转基因西瓜株系表现出感病、抗病、免疫和症状恢复等不同的类型。其中BHI-7株系的T2代植株对ZYMV和WMV的抗病能力普遍达到中等水平以上,并保持了受体西瓜品系原有的优良农艺性状。  相似文献   

4.
商陆抗病毒蛋白基因转化芥菜的获得及抗性研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
以芥菜(Brassica Juncea Coss.)的子叶为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的介导,将商陆抗病毒蛋白基因PAP导入到芥菜中。对所获得的40株抗性植株进行PCR扩增,其中阳性植株为29株;Southern blot分析结果证明PAP基因已被整合到芥菜基因组中,在大多数转基因植株中外源基因呈单拷贝,少数为双拷贝;Northern blot分析结果表明,PAP在转基因植株中正常表达。转基因植株接种病毒试验初步结果表明,转PAP基因的植株对芜菁花叶病毒TuMV的侵染有一定的抑制作用。  相似文献   

5.
以芥菜(Brassica Juncea Coss.)的子叶为外植体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的介导,将商陆抗病毒蛋白(PAP)基因导入到芥菜中。对所获得的40株抗性植株进行PCR扩增,其中阳性植株为29株;Southern blot分析结果证明PAP基因已被整合到芥菜基因组中,在大多数转基因植株中外源基因呈单挎贝,少数为双挎贝;Northern blot分析结果表明,PAP在转基因植株中正常表达。转基因植株接种病毒试验初步结果表明,转PAP基因的植株对TuMV的侵染有一定的抑制作用。  相似文献   

6.
为了降低bFGF(basic fibroblast growth factor)的生产成本,结合植物生物反应器的优点,就bFGF在转基因苜蓿中的表达进行了探索。将bFGF插入植物表达载体pBⅡ21中,获得了含有bFGF基因的植物表达pBIcbFGF,再将pBIcbFGF利用冻融法转到农杆菌中。利用农杆菌介导法将基因转化保定苜蓿,转基因苜蓿在TM-1培养基+20mg/L卡那霉素(Kan)+200mg/L特美汀(Tim)中诱导分化,在生根培养基中生根,获得再生植株。再生植株通过PCR检测、RT—PCR及Western blot证实外源基因已经在苜蓿中成功表达。获得含有目的蛋白的阳性植株。为苜蓿作为植物生物反应器生产bFGF奠定了理论及技术基础。  相似文献   

7.
转CP基因的番茄,南瓜和甜瓜植株的抗病性研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
借助土壤农杆菌Ti质粒介导的叶盘转化法获得了番茄、南瓜三种作物的黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV-CP)基因工程植株。比较了三种转化植株对CMV的抗病性类型。试验结果:番茄转化植株表现为免疫反应,南瓜为抗扩散反应,而甜瓜主要表现为早期抗性,即明显推迟接种植株的发病。用二个不同血清型的CMV株系接种三种作物的转化植株,同一种转化植株对不同株系的抗性反应一致。三种转化作物中表达了CMV-CP基因的植株均能  相似文献   

8.
表达dsRNA的转基因烟草能阻止烟草花叶病毒的侵染*   总被引:7,自引:0,他引:7  
将烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的部分运动蛋白基因(AMP)构建成反向重复结构,插入植物表达载体pBin438上,通过三亲交配法导人根癌农杆菌(Agrobactetqum tumefaciens)菌株EHl05后通过农杆菌介导法转化烟草(Nicotiana tabacam)品种云烟87,获得了50株转基因烟草。PCR和Southern blot分析表明目标基因已整合到烟草植株的基因组内。用TMV对转基因烟草进行挑战接种,症状观察和病毒浓度的TAS-ELISA检测表明,转基因烟草对TMV的抗性包括3种类型:免疫型占10%;抗病型占4%;感病型占86%。Northern blot分析表明,目标基因mRNA在不同抗病类型植株中的积累量存在明显差异,目标基因mRNA的积累量与抗病性成负相关。  相似文献   

9.
将柽柳(Tamarix. sp)金属硫蛋白基因(MT1)插入到植物表达载体pBI121,利用农杆菌(Agrobactrium tumefaciens)介导法将MT1导入烟草基因组。对转基因T1植株的卡那霉素抗性分析表明,多数转基因植株后代表现为3:1的分离比例,只有少数转基因植株的抗性分离表现为15:1或不符合孟德尔遗传的分离比例。说明整合到烟草基因组的外源基因多为单拷贝基因,也有少数为多拷贝基因。对具有卡那霉素抗性的转基因植株进行PCR-Southern检测和Northern杂交分析表明,外源MT1基因已整合到烟草基因组,并且得到了正确表达。转基因植株对重金属镉的抗性比对照显著提高,表现为转基因植株的株高和鲜重均明显优于非转基因株系。  相似文献   

10.
构建了1个含高赖氨酸蛋白质基因和bar基因的植物表达载体,用基因枪法将其分别导入籼稻(Oryza sativa ssp.indica)中优早5号幼胚和龙特甫B成熟胚诱导的愈伤组织中,筛选后得到16株可育的再生植株。PCR和Southern blot检测结果表明,外源基因已整合到水稻的基因组中。T1代植株表现出对PPT的抗性。对部分T1代转基因水稻种子进行分析表明,中优早5号种子中蛋白质含量(12.07%~16.2%)和赖氨酸含量(0.52%-0.67%)分别提高了35.18%和45.09%,龙特甫B种子中蛋白质含量(11.92%,12.87%)和赖氨酸含量(0.51%-0.57%)分别提高了27.69%和16.15%。  相似文献   

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