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为建立甜瓜松散胚性愈伤组织再生体系，给分子标记辅助育种、转基因育种、诱变育种等新型的育种技术提供优质材料，以甜瓜成熟叶片为外植体，调节培养基中激素、蔗糖浓度以及愈伤组织继代次数诱导甜瓜松散型胚性愈伤组织。结果表明，在2,4-D的作用下叶片能诱导出愈伤组织，在MS+0.1 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D+20 g/L蔗糖的培养基上，可以获得结构松散、质地较软呈黄绿色的愈伤组织；诱导松散型愈伤组织最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+30 g/L蔗糖，经过3次继代后可以获得生长速度较快，结构松散、质地较硬呈黄绿色的松散型愈伤组织；在MS+0.25 mg/L 6-BA+0.25 mg/L 2,4-D+40 g/L蔗糖的培养基上愈伤组织胚性化最好，继代5次，可获得结构松散、质地较硬，生长速度较快的松散型胚性愈伤组织。 相似文献
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少花桂愈伤组织诱导的初步研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以MS为基本培养基,利用少花桂未成熟种胚作外植体,研究了外植体大小、不同培养方式及激素配比对少花桂愈伤组织的诱导.结果表明:大于5mm的种胚较易获得愈伤组织;诱导愈伤组织的较佳培养基为MS 2 mg/L2,4-D 2%蔗糖 5g/L活性炭,在黑暗条件下采用液体悬浮培养,其最高诱导率达64.3%,得到黄色的愈伤组织,质地好. 相似文献
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本研究以豆瓣绿无菌苗叶片为外植体诱导获得质地疏松、稳定性高的颗粒状胚性愈伤组织,开展胚性细胞悬浮培养研究。结果表明:豆瓣绿胚性愈伤组织最适继代培养基为MS+0.6%琼脂+3%蔗糖+2,4 D1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,继代间隔14 d;体细胞悬浮最佳培养基为MS+3%蔗糖+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,继代间隔7 d;体细胞悬浮最佳碳源为蔗糖,蔗糖最佳浓度为30 g/L;体细胞悬浮摇床最佳转速为110 r/min。本研究考察激素种类、激素浓度、碳源种类、糖浓度、摇床转速对体细胞胚悬浮体系的影响,并采用解剖镜进行形态学观察,为后期研究体细胞胚胎形态结构提供基础数据。 相似文献
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本试验以连香树授粉120 d后未成熟种子子叶胚为外植体,开展胚性愈伤诱导增殖和悬浮培养体系的研究,初步建立了连香树胚性细胞悬浮系与植株再生体系。将连香树未成熟子叶胚接种在添加0.5 mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA+1.0 g/L AC的1/2 MS基本培养基上,进行胚性愈伤组织诱导,获得的愈伤组织在0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 g/L AC的1/2 MS固体培养基上进一步增殖培养。将得到的胚性愈伤组织置于添加5%聚乙二醇6000的1/2 MS的悬浮培养液中进行振荡培养,建立起细胞均一、增殖较快、稳定性较强的细胞悬浮系;将悬浮培养获得的胚性材料接种到添加5%香蕉汁的0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 g/L AC的MS固体培养基中进行培养,可分化出的子叶期体胚,将获得的子叶胚转接到添加1.0 mg/L IBA的WPM固体培养基中,体胚萌发再生成植株。 相似文献
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本研究旨在为诱导再生成苗提供基础材料,为进一步开展荚用菜豆育种相关研究奠定基础。以荚用菜豆无性细胞（茎、叶、子叶等器官）为试验材料,通过筛选植物激素及其最佳组合,获得了以细胞质浓密的圆球形细胞为主体的松散型愈伤组织细胞团。最终筛选出诱导无性细胞产生普通愈伤组织的“诱导培养基Ⅰ号”：MS +2,4-D 1 mg/L+蔗糖30 g/L。进一步研究获得了“诱导培养基Ⅱ号”：MS + 6-BA 0.25 mg/L + 2,4-D 0.5 mg/L+ AgNO3 10 mg/L。此培养基可以诱导和保持松散型胚性愈伤组织。本研究筛选出可以将无性细胞诱导为松散型胚性细胞团,并且维持胚性细胞继续增殖的系列培养基,解决了诱导过程中愈伤组织褐化问题,创建了一套诱导荚用菜豆松散型胚性愈伤组织的新方法。 相似文献
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水曲柳子叶和下胚轴愈伤组织和体胚的诱导 总被引：2，自引：0，他引：2
《分子植物育种》2015,(7)
为了建立水曲柳愈伤组织诱导和体胚发生体系,并为体胚发生分子机理研究提供有效培养系统,本研究以水曲柳成熟合子胚和未成熟合子胚的子叶和下胚轴为外植体,探讨了灭菌剂及其处理时间对外植体灭菌效果的影响和激素浓度对愈伤组织诱导和体胚发生的影响。结果表明:外植体处理试剂和消毒时间是10%Na Cl O处理1 min最为适宜;以MS1/2(MS所有成分均减半)为基本培养基,NAA 3 mg/L+BA1.5 mg/L为水曲柳未成熟合子胚子叶和下胚轴诱导愈伤组织和体胚发生的最佳激素组合,诱导率分别为6.5%和9.7%;NAA 5 mg/L+BA 2 mg/L为水曲柳成熟合子胚子叶与胚轴诱导愈伤组织和体胚发生的最佳激素组合,诱导率分别为29.3%和19.5%。研究结果补充和突破了前人研究只从水曲柳合子胚子叶获得体胚发生和只从叶柄获得有效愈伤组织增殖的结果,并为揭示体胚发生机理有效愈伤组织和体胚发生系统的建立奠定了基础。 相似文献
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本研究旨在建立西番莲细胞悬浮培养体系,并优化悬浮系培养条件,为西番莲遗传工程提供基础。本研究以西番莲无菌苗为材料,研究西番莲愈伤组织的诱导和建立细胞悬浮系,并结合单因素试验与正交试验优化悬浮系培养条件。结果表明,西番莲愈伤诱导的外植体最佳选择是幼苗胚轴,愈伤诱导激素选择2 mg/L 2,4-D为宜,出愈率达83.3%。以疏松健康的愈伤组织培养细胞悬浮系,经单因素试验和正交试验,细胞悬浮系培养最佳培养培养基为MS培养基+2 mg/L 2,4-D+0.2 g/L Glutamine+30 g/L蔗糖,培养基pH 6.1,起始细胞用量为6.0 mg/mL,摇床转速为100 r/min,28℃暗培养,此条件下建立的细胞悬浮系均匀一致,细胞生长旺盛,西番莲悬浮细胞生长曲线呈“S”型,继代最佳时期为12~18天。本研究为后续利用细胞悬浮系建立西番莲高效细胞工程及遗传转化技术体系提供良好的材料和技术基础,对加强西番莲种业发展具重要意义。 相似文献
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以高粱无菌苗幼叶为试验材料,对颗粒状胚性愈伤组织的获得、细胞悬浮系的建立及影响悬浮细胞生长的主要因素进行了研究。结果表明：幼叶在MS（Murashige and Skoog）+2mg/L 2,4-D培养基上诱导出的愈伤组织,经2~3次继代筛选后获得了浅黄色、颗粒状胚性愈伤组织;胚性愈伤组织接种于液体培养基中,于25±1℃、黑暗条件下,经45~60d的悬浮震荡培养建立了高质量的细胞悬浮系,细胞生长曲线呈“S”型,细胞密度可达6.45×10 5~5.08×10 6个/mL以上,活细胞率可达72.76%,近圆细胞率可达87.50%;培养基的基本成分、激素种类和水平对悬浮细胞生长状态有很大的影响,相比1/2MS培养基,MS培养基为适宜的培养基,2,4-D对保持细胞系的稳定增殖至关重要,适宜的浓度为1mg/L;培养液中加入0.5mg/L KT或6-BA会造成悬浮液褐化,影响悬浮细胞的生长;最适宜的细胞悬浮培养基为L2培养基（MS+1mg/L 2,4-D,30g/L蔗糖,pH5.8）,震荡培养转速为110~120r/min,继代周期为7d,新旧培养基的接种比例为2∶1。 相似文献
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《分子植物育种》2016,(7)
本研究以尾巨桉无性系(32-29)无菌苗茎段作为外植体,进行组织培养及植株再生研究,通过优化不同浓度的植物生长调节剂组合以及LM、1/2LM以及MS不同培养基和不同浓度蔗糖溶液、不同温度的预处理,探讨尾巨桉胚性愈伤组织诱导的适宜培养基和培养条件。结果表明,在添加了1.5 mg/L 2,4-D与1.0 mg/L6-BA的改良1/2LM培养基上,茎段外植体培养6 d后愈伤组织诱导率达96%以上。将愈伤组织接种在0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA激素组合的培养基中体胚诱导率最高可达到19.5%。本研究为尾巨桉胚状体诱导及植株再生提供了借鉴与参考。 相似文献
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荔枝胚性悬浮细胞系的快速建立及其体胚植株的再生 总被引：1，自引：0，他引：1
荔枝幼胚诱导的胚性培养物在低糖条件下连续继代4~6次左右,可筛选到颗粒细小、不含原胚的松散型胚性愈伤组织;以这种松散的胚性愈伤组织作为起始材料,在附加2,4-D 2mg/L或2,4-D 2mg/L、KT1 mg/L、AgNO3 5mg/L的MS液体启动培养基上振荡培养（100~120 r/min）10~14 d,即可建立起分散性良好的胚性悬浮细胞系。采用激素减半的2种启动培养基交替继代培养或周期性固体－液体轮回培养,可以长期保持胚性悬浮细胞系。荔枝胚性悬浮细胞在附加NAA 0.1 mg/L、KT 或Ze 5 mg/L、肌醇100 mg/L、蔗糖50g/L、琼脂10g/L的MS固体培养基上诱导体胚,25~40d后可形成大量胚状体,诱导体胚数量达10,000个/g FW以上。经过成熟培养后,正常的体胚75%以上萌发再生完整植株。 相似文献
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红景天愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养 总被引：1，自引：0，他引：1
红景天的细胞培养是充分利用该树种优良特性的生物工程基础.试验以红景天的茎为外植体,研究愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系.结果表明愈伤组织诱导的最适培养基为MS 1.0mg/L6-BA 0.2mg/L NAA 0.1 mg/L2,4-D,在此培养基上诱导的愈伤组织生长速度快、质地均一疏松;愈伤组织最佳生长培养基为MS-t0.6mg/L6-BA 0.1mg/LNAA 1.0mg/L2,4-D;且选择松散型愈伤组织和3.0×105个/ml的起始细胞浓度,25℃黑暗培养18d为红景天细胞最适悬浮培养体系. 相似文献
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《分子植物育种》2015,(10)
本研究在正交设计的基础上,以短柱铁线莲的叶片、叶柄、茎段为外植体,进行愈伤组织培养,并探讨愈伤组织褐化的抑制。研究结果表明:短柱铁线莲诱导愈伤组织的适宜外植体为茎段,诱导率为89.8%;合适的愈伤诱导培养基为1/2MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA+10 g/L蔗糖,诱导率为90%;合适的增殖培养基为1/2MS+30 g/L蔗糖+0.2 g/L肌醇+0.2 g/L水解络蛋白(CH)+5 mg/L Vc+0.3 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA,增殖率为302.3%。适宜不定芽诱导培养基为1/2MS+30 g/L蔗糖+0.76%琼脂+0.2 g/L肌醇+0.2 g/L水解络蛋白(CH)+0.3 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA,诱导率达63.3%。培养基中添加5 mg/L Vc或1 g/L活性炭时,可以能够很好地抑制短柱铁线莲褐化。 相似文献
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小麦幼胚愈伤组织诱导影响因素的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
小麦幼胚愈伤组织是目前小麦遗传转化中最常用的转化受体系统。以小麦幼胚为外植体,对愈伤组织诱导中的不同基因型、基本培养基、激素、碳源进行了研究。结果表明,不同基因型材料、不同基本培养基的幼胚愈伤组织诱导存在明显差异,其中西农1376和小偃22两个基因型小麦的组培特性较好,MS培养基适于作为小麦幼胚愈伤组织诱导的基本培养基。在MSD培养基中加入1.0mg/LABA或0.2mg/L6-BA能明显改善愈伤组织的生长状态,并以ABA的效果更为显著。将MSD培养基中的蔗糖浓度从30g/L降为15g/L,同时加入15g/L山梨醇,可显著提高愈伤组织的质量。选择适宜的基因型和合理的培养基构成是改良小麦幼胚愈伤组织诱导效果的关键。 相似文献
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《分子植物育种》2021,19(15):5083-5091
为建立稳定高效的落叶松体细胞胚再生体系,本研究以长白落叶松未成熟合子胚作为外植体材料,选择生长良好的胚性愈伤组织,依次通过液体培养基A,半固体培养基B,固体培养基C三种成熟培养基诱导体细胞胚形成。其中,愈伤诱导培养基为S培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.3 mg/L,蔗糖20 g/L,琼脂3 g/L;继代培养基为S培养基+2,4-D 0.15 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.05 mg/L,蔗糖30 g/L,琼脂6 g/L;成熟培养基A为S培养基+PEG-4000 100 g/L+ABA 15 mg/L+Ag NO310 mg/L,蔗糖45 g/L的液体培养基;成熟培养基B和C分别为添加了2 g/L和10 g/L琼脂的成熟培养基A。该方法体胚成熟时间为32 d左右,同步率为78.0%,正常形态体胚比例为83.0%。正常形态体胚形成效率可达223.0个/g胚性愈伤,体细胞胚萌发率可达47.2%。相较于单一成熟培养基,缩短成熟时间,使体胚生成更同步,并提高了体胚产量和质量。为落叶松体胚再生的商业化提供了途径,为大规模化育种繁殖、生理生化研究和转基因改良带来极大的方便,具有较大实际应用价值。 相似文献
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以洪平杏(Armeniaca hongpingensis Yu et Li)不同取样时期的不同外植体进行愈伤组织的诱导,研究发现洪平杏开花11周左右的去子叶胚和子叶较容易诱导出愈伤组织,污染率低,诱导率高。不同外植体愈伤组织诱导能力大小依次为去子叶胚=子叶>未成熟胚>花药>嫩叶叶柄>嫩叶叶片。以洪平杏子叶为外植体诱导体细胞胚胎发生,诱导子叶愈伤组织的最佳培养基是MS+0.5 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA,愈伤诱导率为(97.04±2.31)%;胚性愈伤组织诱导的培养基为MS+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA;体细胞胚胎增殖的培养基为MS+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+0.2 g/L水解酪蛋白。 相似文献
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铁皮石斛愈伤组织诱导研究 总被引：1，自引：0，他引：1
研究了8种不同浓度的2,4-D培养基和3种不同的培养条件对铁皮石斛愈伤组织诱导的影响。结果表明:诱导愈伤组织时,培养基以0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA及1.5 mg/L 2,4-D+20.0 g/L蔗糖+200.0 g/L马铃薯泥+2.0 g/L活性碳+10.0 g/L琼脂的培养基效果最好,在暗培养15 d后光培养的条件下诱导愈伤组织效果最好。 相似文献