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1.
《中国农学通报》2010,(21)
研究通过建立猪肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC)原代培养的方法,研究了赖氨酸对体外培养的猪小肠黏膜上皮细胞碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响。用机械刮取初生仔猪小肠黏膜加胶原酶Ⅱ消化的方法,成功地在体外培养了新生仔猪IEC;分别用浓度为0、2、8mmol/L赖氨酸处理细胞96h,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR方法,检测了碱性氨基酸转运载体在不同处理细胞中的表达丰度。结果表明:高浓度的赖氨酸对CAT-1 mRNA的表达有上调作用,差异极显著(P0.01),并且呈剂量依赖效应;不同浓度的赖氨酸对CAT-2 mRNA的表达影响不大,8mmol/L和2mmol/L赖氨酸组CAT-2 mRNA的表达丰度均有低于0mmol/L的趋势,但二者之间差异不显著(P0.05);不同浓度的赖氨酸对y+LAT1 mRNA表达影响差异不显著(P0.05);高浓度的赖氨酸可提高4F2hc mRNA的表达;0mmol/L和2mmol/L赖氨酸组4F2hc mRNA的表达丰度均低于8mmol/L,且差异显著(P0.05);0mmol/L和2mmol/L赖氨酸组之间差异不显著(P0.05)。 相似文献
2.
甲状腺素及胰高血糖素对高温条件下体外培养奶牛乳腺上皮细胞热休克蛋白表达的影响 总被引：4，自引：0，他引：4
为阐明甲状腺素及胰高血糖素对高温体外培养奶牛乳腺上皮细胞内热休克蛋白(HSPs)mRNA转录和蛋白表达的影响。本试验对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞添加不同浓度的甲状腺素、胰高血糖素,分别于42℃培养12 h。采用RT-qPCR方法检测细胞内HSF-1、HSP27、HSP70和HSP90的mRNA表达丰度,ELISA方法检测HSP27、HSP70和HSP90的蛋白质表达。各浓度的甲状腺素、胰高血糖素均能显著降低高温条件下奶牛乳腺上皮细胞中HSP27、HSP70和HSP90 mRNA表达丰度(P0.05);各浓度的胰高血糖素能极显著的降低高温条件下HSP27、HSP70和HSP90的蛋白表达(P0.01),同时各浓度甲状腺素也能极显著的降低HSP27、HSP70的蛋白表达(P0.01),而仅0.01,0.1,2μmol/L的甲状腺素能极显著的降低HSP90的蛋白表达(P0.01)。结果提示,甲状腺素及胰高血糖素能明显降低高温条件下HSPs mRNA的转录和蛋白的表达水平。 相似文献
3.
摘要：为研究精氨酸和谷氨酰胺对猪小肠上皮细胞增殖的影响及并探讨精氨酸和谷氨酰胺在小肠上皮细胞内的相互转化关系,本试验在猪小肠上皮细胞培养液中添加不同剂量的精氨酸和谷氨酰胺,测定了细胞增殖、细胞中精氨酸合成代谢途径关键酶（P5CS、NAGS、NOS）基因mRNA表达量以及细胞上清液中精氨酸代谢产物（谷氨酰胺、精氨酸、精胺、一氧化氮）含量。结果表明：添加谷氨酰胺提高了细胞中NAGS基因mRNA表达量,有效提高了细胞中精氨酸含量,促进细胞了增殖; 添加精氨酸降低了细胞中P5CS和NAGS基因mRNA表达量,抑制了猪肠上皮细胞中谷氨酰胺向精氨酸转化,并且,高剂量精氨酸显著降低了细胞上清液中谷氨酰胺含量; 精氨酸与谷氨酰胺同时添加,对猪小肠上皮细胞增殖的促进效果优于两者单独添加。表明在猪小肠上皮细胞中,外源添加的精氨酸不能转化为谷氨酰胺,外源添加的谷氨酰胺可以转化为精氨酸并部分替代精氨酸发挥作用。关键词：猪 小肠上皮细胞 精氨酸 谷氨酰胺 相似文献
4.
为了研究mTOR通路及其相关联途径上与蛋白质合成有关的eIF4E、与能量代谢有关的PPARGC-1、与血管形成有关的VEGFA、与细胞增殖有关的C-Jun4个基因在不同品种猪背最长肌中的表达丰度,选用上市体重的长白猪、地方猪种蓝塘猪和大花白猪各8头作为动物模型,以管家基因GAPDH作为内标,采用Real-time RT-PCR方法,比较这些品种猪的背最长肌中目的基因mRNA表达丰度。结果表明:大花白猪背肌eIF4E mRNA的表达量显著高于蓝塘猪和长白猪(P0.05),其在蓝塘猪背肌的表达量高于长白猪但差异不显著(P0.05);蓝塘猪背肌PPARGC-1mRNA的表达水平显著高于大花白猪(P0.05),与长白猪相比差异不显著(P0.05),长白猪与大花白猪相比无显著差异(P0.05);VEGFA和C-Jun mRNA在蓝塘、长白、大花白猪背肌中的表达没有差异(P0.05)。以上结果提示,eIF4E和PPARGC1基因的差异表达可能与不同猪品种间肌肉性状和肉质差异密切相关。 相似文献
5.
本试验选用96头体况相似、平均体重为69.01±4.43 kg的长大二元母猪,随机分成4个组,每个组4个重复。根据饲料原料可消化赖氨酸(DLys)和理想蛋白质氨基酸平衡模式(IAAP)配制低蛋白质试验饲粮(等能、等氨基酸平衡模式),测定不同饲粮赖氨酸水平对70－100 kg阶段和100－125 kg阶段二元母猪生长性能、血清指标的影响。结果表明,70－100 kg阶段,2组平均日增重(ADG)最高(908.33 g),料重比(F/G)最低(2.77)；2组血清尿素氮(UN)浓度显著低于1组和4组(P<0.05),与3组差异不显著(P>0.05),血清胰岛素(INS)、类胰岛素生长因子－Ⅰ(IGF-Ⅰ)浓度呈现随饲粮DLys水平的升高先升高后降低的变化趋势(P>0.05)；血清赖氨酸(Lys)和苏氨酸(Thr)浓度4组显著高于1组(P<0.05),其它血清氨基酸浓度呈现随饲粮DLys水平的升高先降低后升高的变化趋势(P>0.05),以2组较低。100－125 kg阶段,2组ADG最高(863.14 g),F/G 2组最低(3.08)；血清UN浓度3组显著低于1组和4组(P<0.05),与2组间差异不显著(P>0.05),血清INS浓度3组显著高于1组(P<0.05),与2组和4组间差异不显著(P>0.05)；血清IGF-Ⅰ浓度呈现随饲粮DLys水平的升高先升高后降低的变化趋势(P>0.05)；血清Lys浓度1、2组显著低于3、4组(P<0.05),其它组血清氨基酸浓度基本呈现随着饲粮DLys水平的升高先降低后升高的变化趋势(P>0.05),以2组较低。因此,在本试验条件下,二元母猪70－100 kg阶段和100－125 kg阶段饲粮DLys适宜日摄入量分别为16.57 g/d和15.96 g/d,即饲粮赖氨酸水平分别为0.66%和0.60%,能获得较好的生长性能。 相似文献
6.
-βactinmRNA和18SrRNA因其在相同试验条件下的稳定表达,而被广泛用作内标基因来确定目的基因的表达量。试验分别使用这2种内标基因,用相对定量RT-PCR的方法对肉鸡(0~58 d)十二指肠钠葡萄糖共转运载体1(Sodium glucose cotransporter 1,SGLT1)的发育规律进行了分析研究,比较不同内标基因对SGLT1 mRNA表达水平检测结果的影响,以确定两者在一致试验条件下表达的相似度。结果表明,分别以-βactinmRNA和18SrRNA作为内标,SGLT1 mRNA表达发育规律完全一致,均表现为2~30 d不断升高,44 d下降,58 d回升;2 d和44 d的SGLT1 mRNA丰度显著低于16 d(P<0.05)和30 d(P<0.05),58 d的SGLT1 mRNA表达水平显著低于30 d(P<0.05)。提示这2种管家基因均可以作为内标用于肉鸡肠道转运载体基因mRNA发育规律的相对定量研究。 相似文献
7.
为探讨乳酸菌主要代谢产物乳酸抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的仔猪空肠上皮细胞凋亡的作用以及保护肠黏膜屏障的部分机制,分别使用TNF-α(200μg/L)、乳酸(100μL/L)、TNF-α(200μg/L)+乳酸(100μL/L)处理仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)组,并设空白对照。用MTT法检测各组的细胞活力;用ELISA方法检测各组caspase-3的蛋白表达量和蛋白活性。结果表明：TNF-α组的细胞存活率极显著低于对照组(P＜0.01),乳酸+TNF-α组可显著升高细胞存活率(P＜0.05)。乳酸+TNF-α组caspase-3蛋白量和活性显著低于TNF-α组(P＜0.05)。乳酸可以抑制TNF-α诱导的IPEC-J2细胞损伤,抑制TNF-α诱导的caspase-3蛋白表达量和蛋白活性的升高,提示乳酸菌主要代谢产物乳酸可通过抑制上皮细胞凋亡来保护肠上皮细胞,进而保护肠黏膜屏障。 相似文献
8.
《华北农学报》2015,(4)
为探明Ghrelin及其受体Ghsr-1a在早期胚胎发育中的作用,以小鼠体内受精、体外受精和孤雌激活胚胎为研究对象,在其体外发育过程中添加不同浓度Ghrelin,观察胚胎发育效率;通过免疫荧光染色和荧光定量PCR,观察不同时期胚胎中Ghsr-1a的变化。结果表明,体内受精胚体外发育中添加0.1 ng/m L Ghrelin显著降低了囊胚率(P0.05),添加1 ng/m L的Ghrelin显著降低了小鼠体外受精胚的囊胚率(P0.05)。在体内受精胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平在4细胞显著高于其他时期(P0.05);体外受精胚中,Ghsr-1a的mRNA水平在8细胞前无明显差异,桑椹胚和囊胚显著下降(P0.05)。在孤雌激活胚胎中,Ghsr-1a的mRNA表达水平从2细胞到8细胞显著降低,之后到囊胚期开始显著升高,其蛋白表达模式与mRNA表达模式相反。Ghsr-1a在体内受精和体外受精胚胎中的表达相似,囊胚期表达量最低。结果提示,Ghrelin能够抑制体内和体外受精胚的体外发育,不同来源胚胎Ghsr-1a mRNA和蛋白表达模式均不相同。研究结果为进一步探索Ghrelin在胚胎发育中的作用机制提供了试验基础。 相似文献
9.
为了研究泌乳期奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, BMECs)不同代数乳蛋白基因αs1-casein,β-casein,κ-casein的表达;利用real-time PCR方法分别对泌乳期奶牛乳腺组织,以及由乳腺组织分离得到的细胞原代(P0),1代(P1),2代(P2),3代(P3),4代(P4),5代(P5)中的乳蛋白基因表达状况进行检测;结果表明,αs1-casein,β-casein,κ-casein在泌乳期奶牛乳腺上皮细胞原代及传代细胞中有不同程度的表达。其中,原代中的表达量显著高于P1~P5(P<0.05),而P1~P5之间的表达量无显著差异(P>0.05)。并且随着传代次数的增加,基因表达量呈现逐渐下降的趋势。说明P2~P5 BMECs可以作为基础理论问题研究的试验材料而被应用。 相似文献
10.
猪圆环病毒2型和伪狂犬病弱毒疫苗体外共接种对猪外周血单个核细胞调节性细胞因子mRNA表达的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
为分析猪圆环病毒2型（PCV2）对伪狂犬病弱毒苗（PRV）免疫反应的影响,用real-time PCR技术检测了仔猪外周血单个核细胞（PBMC）体外单接种和共接种PCV2与PRV后调节性细胞因子IL-4、IL-10、IL-12p40及IFN-γ的mRNA表达水平。结果表明,PRV能引起IL-4、IL-12p40与IFN-γ的mRNA表达上调,PCV2能引起IL-4、IL-10与IL-12p40的mRNA表达上调;而且,PCV2能抑制PRV诱导IL-4、IL-12p40及IFN-γ的mRNA表达上调,其中对IFN-γ mRNA表达的抑制效果最为显著（P<0.05）,提示PCV2可能会对PRV的细胞免疫反应产生不利影响。 相似文献
11.
Ca2+参与NO对切花月季瓶插期间乙烯合成的调控 总被引：2，自引：1，他引：1
分别用0.1 mmol?L-1 SNP（NO供体）、0.1 mmol?L-1 SNP+0.3 mmol?L-1的TFP（CaM）、0.1 mmol?L-1 SNP+10 mmol?L-1的TFP（Ca2+螯合剂）、6 mmol?L-1 Ca2+、6 mmol?L-1 Ca2++0.05 mmol?L-1的PTIO（NO清除剂）处理切花月季‘Kardinal’,研究切花瓶插期间内源乙烯的生物合成变化以及Ca2+在NO对切花月季瓶插期间乙烯合成调控中的作用。结果表明：Ca2+处理能提高月季瓶插前期花瓣中的NOS活性,保持了花瓣中的NO的较高水平,减缓切花瓶插后期NOS活性的升高,进一步研究表明,Ca2+螯合剂EGTA和CaM的抑制剂TFP处理却可使花瓣中的ACS和ACO活性升高,ACC的含量增加,从而加速了乙烯的生物合成;同时,NO的清除剂PTIO处理也可以抑制由于Ca2+处理导致的ACS和ACO的活性降低以及乙烯合成底物ACC的含量下降。因此,Ca2+和CaM可能参与了NO对切花瓶插期间乙烯的合成调控及其信号转导。 相似文献
12.
山麻鸭血液生化指标与产蛋性能的相关性研究 总被引：1，自引：1，他引：0
为了探索山麻鸭有关血液生化指标与产蛋性能之间的关系,对该鸭品种的早期择提供科学依据,测定分析了山麻鸭部分血液生化指标和产蛋数。结果表明,山麻鸭的总蛋白（TP）含量为（67.571±5.522）g/L,白蛋白（ALB）含量为（23.371±3.296）g/L,球蛋白（GLB）含量为（44.289±3.252）g/L,谷丙转氨酶（GPT）活性为（48.022±11.036）U/L,谷草转氨酶（GOT）活性为（37.622±21.895）U/L,谷氨酰转移酶（GGT）活性为（3.333±1.945）U/L,碱性磷酸酶（AKP）活性为（187.511±106.655）U/L,总胆固醇（CHOL）含量为（4.231±1.049）mmol/L,甘油三脂（TG）含量为（15.704±4.925）mmol/L,产蛋数（EP）为（100.040±8.166）枚。且山麻鸭的EP与TP、ALB、GLB、CHOL和TG存在极显著或显著相关（p＜0.01或p＜0.05）。同时,对山麻鸭产蛋数的选择,采用通径系数比相关系数要更加准确。根据产蛋数与生化指标之间的关系,采取向后淘汰法得到最优回归方程为：Y=-16.580x1+16.501x2+16.595x3+97.187,经F检验,其回归关系达显著水平（p＜0.05),各偏回归系数也达显著水平（p＜0.05),相关指数达到0.897。 相似文献
13.
盐胁迫对将军菊苣生长及离子吸收的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
旨在了解盐胁迫对将军菊苣的生长及Na+、K+、Ca2+吸收和分配的影响。用Hoagland溶液配制不同浓度的NaCl (70、140、210、280 mmol/L)并处理将军菊苣幼苗15天,测定其生物量、生长速率、新生叶参数和矿物质离子。结果表明：与对照组相比,随着盐浓度升高,菊苣生长速率明显减缓(P<0.05);叶长、宽和面积以及鲜重均显著下降,而70 mmol/L组植株根系干重显著增高(P<0.05);处理组根和叶的Na+含量均明显升高而K+含量降低,其中根部显著降低(P<0.05),Ca2+含量变化不明显;根和叶的K+/Na+以及叶的Ca2+/Na+比值均显著降低。这说明盐胁迫造成菊苣植株的离子失衡,促使K+和Ca2+的选择性吸收而耗能,从而使植株生长受到抑制。 相似文献
14.
甜菜碱缓解盐胁迫菊苣种子萌发和芽苗生长的作用 总被引：2，自引：2，他引：0
为了研究外源甜菜碱(glycine betaine, GB)对盐胁迫菊苣(Cichorium intybus L.)种子萌发和芽苗生长的影响,以不同浓度(0~280 mmol/L)的NaCl结合外源GB(0~10.0 mmol/L)处理菊苣种子并进行发芽试验,测定了种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数等指标。结果表明盐溶液抑制了种子的萌发。其中,280 mmol/L NaCl能完全抑制种子的萌发。外源GB可以不同程度的缓解盐胁迫的抑制作用,且具有浓度依赖效应,其中2.5 mmol/L GB的缓解作用最好,能显著提高210 mmol/L NaCl胁迫下菊苣种子的发芽势、发芽率和发芽指数(P<0.05)。但外源GB对盐胁迫下芽苗的鲜重和干重无明显的缓解作用。外源GB能缓解盐胁迫对菊苣种子萌发的抑制作用。 相似文献
15.
青虾transformer-2基因RNA干扰规律的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
通过对青虾性别调控相关基因transformer-2（tra-2）的RNA干扰规律进行研究,探讨了tra-2 基因RNA干扰的最适注射部位、注射剂量、干扰效果以及干扰规律等。通过对青虾肌肉、心脏、围心腔和眼柄基部注射比较发现,围心腔注射死亡率最低,适宜RNA干扰研究。采用4 μg/g 的dsRNA剂量进行时间依赖性干扰试验,RT-PCR检验注射后第1,7,14 天的卵巢tra-2 表达量,结果显示第7 天基因表达量出现显著降低（P<0.05）。不同剂量水平（0.4 μg/g、4 μg/g 以及12 μg/g）干扰研究发现,0.4 μg/g dsRNA没有干扰结果,4 μg/g 和12 μg/g 剂量的干扰效果均显著。与4 μg/g 的剂量相比,12 μg/g 的dsRNA能在较短时间内起到明显的干扰效果,且能持续较长的时间,表明干扰规律会随着剂量的改变而变化。但两组tra-2的最低表达量分别为正常水平的23%和21%,无显著差异（P>0.05）。 相似文献
16.
氮素浓度对大白菜小黑点病发生的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
摘要：研究了大白菜抗小黑点病品系C24、P8-1和感小黑点病品系03B9、P8-2,在氮素浓度为5(N5)、15(N15)、25(N25) mmol/L的水培条件下,对叶柄铵态氮、电导率、丙二醛含量和多酚氧化酶活性的影响及其与小黑点病发生的关系。结果表明,随氮浓度的增大,小黑点病发病加重。抗病品系随时间延长,铵态氮含量逐渐下降,C24在N25浓度下,第14天含量仅是第2天的49.95%。氮浓度对感病品系03B9和P8-2的细胞膜透性和MDA含量的影响比抗病品系C24和P8-1大,感病品系细胞膜结构遭到破坏,可能是小黑点发生的原因。 相似文献
17.
用采自英国苏克塞斯的海滨碱蓬为材料,将铺有滤纸的培养皿中发芽7天的海滨碱蓬幼苗,移栽到育苗盘中溶液培养,用调整过的Hoagland营养液培养海滨碱蓬21天,用150 mmol/L NaCl处理海滨碱蓬0 h、6 h、12 h、24 h、36 h及48 h,测定海滨碱蓬在不同处理时间下根、茎、叶的鲜重、干重及Na+含量。分析Na+吸收速率在48 h内的变化趋势。结果表明,不同处理之间海滨碱蓬Na+吸收速率差异不显著。因此,海滨碱蓬在48 h内的Na+吸收速率基本保持不变,在与Na+吸收途径有关的试验中处理时间设为48 h不仅可以节省人力物力财力,又可以取得事半功倍的良好研究目的。 相似文献
18.
不同浓度钾素对甜菜幼苗生理生化指标的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
试验采用1/2Hoagland营养液水培,研究不同浓度K+对甜菜幼苗生长和生理生化指标的影响。结果表明,甜菜幼苗叶片、叶柄、根系和整株的干物质量均随钾素浓度提高而增加,在K+浓度为3.00 mmol/L时最高;随K+浓度提高,甜菜幼苗根系、叶柄、叶片钾含量,幼苗全氮、磷、钾积累量,叶片、叶柄含水量,叶片相对含水量以及叶片面积随之逐步升高,3.00与6.00 mmol/L K+处理无明显差异;叶片叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a+b含量,SOD、GPX活性,根系、叶柄和叶片全N含量随之逐步下降,3.00与6.00 mmol/L K+处理无明显差异;叶片CAT活性,根系、叶柄和叶片P含量保持不变或变化无规律。在本研究条件下,3.00 mmol/L K+是甜菜幼苗生长最佳营养浓度。 相似文献
19.
为探明甘露寡糖对三黄鸡免疫功能和盲肠菌群的影响及替代抗生素的可行性,选用1日龄三黄鸡216只,随机分为 6 组, 每组3 个重复, 每重复12 只鸡, 分别饲喂6 种不同日粮, 自由采食和饮水,第Ⅰ 组为空白对照组, 第Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ组为试验组, 在基础日粮的基础上分别添加600 mg/kg林可霉素, 1 g/kg甘露寡糖,2 g/kg甘露寡糖,4 g/kg甘露寡糖和8 g/kg甘露寡糖。结果表明：（1）添加4 g/kg甘露寡糖,可显著提高胸腺指数(P<0.05),有提高脾脏和法氏囊指数的趋势,但差异不显著(P>0.05);（2）饲料中添加600 mg/kg林可霉素或4 g/kg甘露寡糖,均能显著提高血清溶菌酶活性(P<0.05),而8 g/kg甘露寡糖组血清新城疫抗体滴度均显著高于对照组和林可霉素组(P<0.05);（3）添加甘露寡糖,可显著提高盲肠乳酸杆菌的数量,降低沙门氏菌的数量(P<0.05),大肠杆菌的数量有增加的趋势但差异不明显(P>0.05);（4）甘露寡糖可替代林可霉素在三黄鸡养殖中的应用。 相似文献